国家自然科学基金(30271481)
- 作品数：10 被引量：12H指数：2
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- 相关机构：第三军医大学新桥医院重庆医科大学附属第一医院重庆大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生电子电信生物学更多>>
- ALA诱导结肠癌细胞内PPIX产生和光动力学疗法杀伤效应研究
- 2009年
- 目的观察δ氨基酮戊酸(δ-aminolaevulinic acid,ALA)诱导人结肠癌细胞SW480内产生内源性卟啉IX(protopor-phyrin IX,PPIX)规律以及与光动力学疗法(photodynamic therapy,PDT)杀伤作用的关系。方法在SW480结肠癌细胞培养的基础上,采用激光共聚焦显微镜分析ALA诱导SW480结肠癌细胞内产生PPIX的变化规律;用MTT法检测细胞存活率,研究杀伤作用规律。结果加入ALA后SW480细胞产生PPIX的量随时间延长,PPIX量逐渐增加,加药后8h达最高峰,24h后恢复到正常细胞水平。PPIX荧光主要产生在细胞浆内,细胞核内较少。PDT24h后细胞存活率开始明显降低,PDT杀伤作用与癌细胞内PPIX量呈负相关。结论ALA诱导SW480细胞产生PPIX的量在加药后8h达最高峰,24h后恢复到正常细胞水平,PPIX荧光主要分布在细胞浆内。PDT杀伤作用与癌细胞内光敏剂明显相关。
- 陈祖林杨桦廖海洋潘英俊肖卫东
- 关键词：光动力学治疗结肠肿瘤
- ALA—PDT后结肠癌细胞生长抑制及P21、cyclinDl、CDK2 mRNA表达的研究被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨ALA—PDT对结肠癌细胞增殖抑制及以及对P21c、yclinDl、CDK2的影响。方法:采用MTT法检测PDT后对细胞增殖抑制情况。应用RT—PCR技术检测细胞P21、cyclinDl、CDK2mRNA的含量。结果:PDT后P21mRNA含量较PDT前提高(P<0.01),而cyclinDl、CDK2mRNA的含量下降(P<0.01),SW480细胞出现明显的增殖抑制。结论:ALA—PDT对肿瘤细胞的增殖抑制作用与其诱导P21的过表达,进而下调cyclinDl、CDK2的表达有关。
- 刘嘉孙晓菲葛海燕肖卫东陈祖林廖海洋潘英俊
- 关键词：P21CYCLIND1CDK2
- 钙信号在ALA-PDT诱导SW480细胞凋亡及细胞自身保护机制中的作用被引量：2
- 2006年
- 背景与目的:肿瘤的光动力疗法(photodynamictherapy,PDT)是基于光敏剂选择性积聚在肿瘤组织中,肿瘤细胞接受可见光照后凋亡或坏死的一种治疗方法。细胞内游离钙作为重要的第二信使参与多种细胞功能的调节,但钙信号在PDT中的作用却不甚清楚。本研究的目的是探讨钙信号在!氨基酮戊酸-光动力学疗法(ALA-PDT)诱导SW480细胞凋亡及细胞自身保护机制中的作用。方法:将SW480细胞分为4组:空白对照组、激光照射组、ALA组和ALA-PDT组。用TUNEL法检测细胞凋亡;用激光共聚焦显微镜观测各组细胞内游离钙离子浓度的变化;放射免疫法测定各组细胞内cAMP及cGMP含量;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组细胞中钙调素的基因表达;Western蛋白印迹检测各组细胞MEK和ERK1/2蛋白产物及磷酸化蛋白产物的表达。结果:TUNEL法显示ALA-PDT组的人结肠癌细胞在PDT后30min凋亡指数(apoptosisindex,AI)为(25.26±5.04)%,60minAI为(50.45±7.85)%;激光共聚焦结果为ALA-PDT组细胞内游离钙离子浓度在10min时荧光强度为100.00±19.83,而20min时达185.40±18.90(P<0.01),而空白对照组、单独激光照射组、ALA组细胞内钙离子浓度无明显变化;在监测时间内,cAMP含量在30min时为(3.215±0.245)pmol/L,显著高于其它各组及各组内不同时相的cAMP含量(P<0.001);空白对照组、激光照射组、ALA组以及ALA-PDT后30min、60min、90min组的CaM3的相对表达量分别为3.97±0.29、4.28±0.39、4.51±0.44、12.60±1.84、11.39±1.13和12.77±1.35,ALA-PDT后30～90min组的CaM3表达显著高于空白对照组、激光照射组和ALA组(P<0.001);ALA-PDT后SW480细胞的ERK通路激活。结论:钙信号对ALA-PDT诱导SW480细胞凋亡起着重要作用,同时也诱导了细胞自身的保护机制——ERK通路激活。
- 郑江华时德赵渝陈祖林
- 关键词：ALAPDTSW480细胞钙信号
- 转化生长因子β1基因转染对结肠癌SW480细胞增殖的抑制作用
- 2006年
- 目的：探讨转化生长因子β1（TGF-β1）基因转染对结肠癌细胞SW480体外增殖的抑制作用。方法：以腺病毒为载体将人TGF-β1基因导入体外培养的人结肠癌细胞株SW480，应用免疫组织化学及逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测SW480细胞中转化生长因子β1（TGF-β1）蛋白及mRNA的表达情况。通过MTT法检测转染后细胞增殖的抑制情况。结果：转染hTGF-β1基因后，与对照组相比，TGF-β1蛋白和mRNA在细胞中的表达均增强。SW480的增殖受到明显抑制（P〈0．05），抑制率为60％～80％。结论：转染hTGF-β1基因对体外培养的结肠癌细胞SW480的增殖有明显抑制作用。
- 刘嘉葛海燕肖卫东陈祖林
- 关键词：结肠肿瘤转化生长因子Β逆转录聚合酶链反应增殖抑制
- 细胞外信号调节激酶通路激活抑制δ氨基酮戊酸-光动力疗法对SW480细胞的细胞毒作用被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨δ氨基酮戊酸-光动力疗法(ALA-PDT)诱导SW480细胞后的细胞外信号调节激酶(ERK)通路以及阻断此通路对细胞毒作用的影响。方法:将SW480细胞分为空白对照组、激光照射组、ALA组、ALA-PDT组(又分为30、60、90min组)及PD98059组,Western蛋白印迹检测各组细胞MEK和ERK1/2蛋白产物及磷酸化蛋白产物的表达;用MTT比色法分别检测各组细胞在不同时间段的光密度值,计算各组细胞存活率。结果:ALA-PDT后SW480细胞的ERK通路激活;阻断ERK通路后ALA-PDT对SW480细胞的细胞毒作用增强。结论:ERK通路的激活对ALA-PDT后SW480细胞起着保护作用;不同水平阻断ERK通路,可能成为增强ALA-PDT杀伤结肠癌细胞的新靶点。
- 郑江华时德赵渝陈祖林
- 关键词：光动力疗法SW480细胞外信号调节激酶通路
- PDT对SW480细胞和转染CD自杀基因的SW480结肠癌周期和凋亡的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:观察PDT对SW480细胞和转染CD自杀基因的SW480结肠癌细胞周期和凋亡的影响。方法:采用脂质体基因转移技术将CD基因转染SW480结肠癌细胞后,进行PDT处理,用流式细胞仪分析ALA-PDT结合CD/5Fc自杀基因系统对结肠癌细胞周期和凋亡的影响。结果:ALA-PDT可使SW480细胞G1,细胞比率明显降低,S期细胞比率升高;ALA-PDT不会增加SW480细胞凋亡。PDT与5—Fc结合对SW480-CD细胞各周期比率的影响与对照组相似,表明对各期细胞影响度相似;两种方法结合可以明显诱导SW480细胞凋亡。结论:静止期SW480细胞对PDT比较敏感,增殖期细胞相对不敏感。PDT与5-Fc结合对静止期和增殖期癌细胞均有杀伤作用,且可明显诱导细胞凋亡。
- 赖雁陈祖林
- 关键词：光动力学治疗结肠肿瘤
- 光动力学疗法诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究进展被引量：1
- 2006年
- 郑江华时德陈祖林
- 关键词：光动力学疗法细胞凋亡机制肿瘤细胞凋亡活性氧物质PDT
- 内源性光动力疗法对人结肠癌SW480细胞cAMP和cGMP的影响被引量：1
- 2006年
- 目的观察内源性光动力疗法(photodynamictherapy,PDT)对人结肠癌SW480细胞环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)的影响。方法将SW480细胞分为4组:对照组、光照组、δ氨基酮戊酸(ALA)组、内源性PDT(ALA PDT)组,用放射免疫法检测光照后30、60、90及120min各组细胞的cAMP和cGMP的浓度。结果cAMP浓度在监测时间内,ALA PDT组在30min时最高,明显高于其余各组相应时相及同一组内其余时相(P均<0.001);在60、90及120min时与其它各组相应时相比较,差异均无统计学意义;其余各组在监测时间范围内,组间及组内不同时相间差异均无统计学意义。cGMP浓度在各组细胞的组间及同组内不同时相间差异均无统计学意义。结论内源性PDT在杀伤肿瘤细胞的同时,SW480细胞也能通过细胞内cAMP浓度的瞬时升高产生保护作用,抑制细胞凋亡。
- 郑江华时德陈祖林肖卫东梁平
- 关键词：SW480细胞环-磷酸腺苷环-磷酸鸟苷
- ALA-PDT结合TGF-β1基因转染对结肠癌细胞抑制作用的研究
- 2006年
- 目的:探讨ALA-PDT结合hTGF-β1基因转染对结肠癌细胞体外增殖的抑制作用。方法:以腺病毒为载体将hTGF-β1基因导入人结肠癌细胞株8W480后,行PDT处理,应用免疫组化法检测TGF-β1的表达情况。通过MTT法检测转染后细胞增殖的抑制情况,应用流式细胞技术检测细胞周期的变化。结果:转染hTGF-β1基因后,TGF-β1蛋白表达明显增强。与单纯行PDT相比,G0/S周期阻滞作用更为明显。对SW480的增殖抑制效果明显提高(p<0.05)。结论:转染hTGF-β1基因可明显增强ALA-PDT对体外培养的结肠癌细胞SW480的增殖抑制作用。
- 陈祖林刘嘉廖海洋潘英俊葛海燕肖卫东
- 关键词：光动力疗法转化生长因子Β1结肠癌增殖抑制
- 低浓度的丝裂霉素对结肠癌光动力增效作用研究被引量：1
- 2005年
- 目的用低浓度的丝裂霉素改变大肠癌细胞周期来达到增强其光动力学疗法,探讨增效作用中对癌细胞杀伤作用规律。方法在结肠癌细胞培养的基础上,加入低浓度的丝裂霉素,光动力学疗法后采用荧光光度法和MTT法对癌细胞内光敏剂含量和细胞存活率进行检测,用SPLM软件统计包进行数据处理。结果低浓度的丝裂霉素可使癌细胞内光敏剂显著增加,随时间延长细胞内光敏含量增加明星;细胞内光敏剂含量与激光照射后细胞存活率呈显著负相关,即细胞内光敏剂含量多,PDT后细胞存活率低;光动力学疗法后癌细胞存活率曲线明显左移,在4、8、16h细胞存活率显著降低;癌细胞与光敏剂作用8～16h激光照射可达到最佳的光动力杀伤效果。结论我们设计单独低浓度的丝裂霉素对结肠癌细胞无杀伤作用,但可通过增加癌细胞内光敏剂含量来达到增效作用,8～16h为最佳给药时间,杀伤作用有明显的规律性。
- 廖新华陈祖林葛海燕梁平
- 关键词：光动力学疗法结肠肿瘤丝裂霉素C
