国家自然科学基金(31171029)
- 作品数：6 被引量：33H指数：4
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- 相关机构：华中科技大学湖北文理学院武汉市中心医院更多>>
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- 小胶质细胞生理特点及在脑缺血损伤中的作用被引量：4
- 2012年
- 小胶质细胞作为中枢神经系统的免疫细胞,监测中枢神经系统微环境的变化,对微环境变化以及损伤性刺激发生快速反应。脑缺血情况下,小胶质细胞快速活化变形产生细胞毒性物质和细胞因子等,并发生一系列生物活性反应。在脑缺血的病理生理中扮演重要角色,为了探究小胶质细胞在脑缺血再灌注损伤中的作用,我们对最近几年的研究进行了综合,为以后的基础研究和临床治疗提供参考。
- 高艳
- 关键词：小胶质细胞脑缺血细胞因子
- Annexin—A1模拟肽Ac2—26抑制小胶质细胞释放炎性介质的作用研究被引量：3
- 2016年
- 目的观察Annexin—A1模拟肽Ac2—26对小胶质细胞炎性介质肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）和一氧化氮（NO）释放的影响及其对Toll样受体2（TLR2）的调控作用。方法根据处理不同将大鼠来源的原代小胶质细胞随机分为Aβ1-42组（给予Aβ1-42刺激组）、Aβ1-42＋对照乱序肽组（在给予Aβ1-42刺激的同时加入氨基酸乱序组处理）、Aβ1-42＋Ac2—26（在给予Aβ1-42刺激的同时加入Ac2—26处理）及空白对照组。经上述处理24h后，收集各组小胶质细胞。用CCK-8法检测细胞存活率，采用倒置相差显微镜观察细胞形态，收集各组细胞上清液采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定TNF-α、IL-1β、IL-6和NO的浓度，采用Western blot法测定TLR2的蛋白水平。结果Aβ1-42和Ac2—26对小胶质细胞存活率没有影响，与空白对照组比较差异无统计学意义。Aβ1-42作用后，小胶质细胞形态发生明显变化，由静息的苎麻状变成激活的阿米巴状巨噬细胞样；Aβ1-42组、Aβ1-42＋对照乱序肽组、Aβ1-42＋Ac2—26及空白对照组上清TNF-α浓度分别为（125．17±7．13）ng／L（118．78±7．28）ng／L、（24．02±2．62）ng／L和（20．89±1．82）ng／L，IL-1β浓度分别为（117．61±8．73）ng／L（108．90±6．53）ng／L、（27．06±3．32）ng／L和（24．58±3．45）ng／L，IL-6浓度分别为（108．67±5．86）ng／L（102．67±4．85）ng／L（25．94±2．83）ng／L和（19．68±2．66）ng／L，Aβ1-42＋Ac2-26组上清液TNF-α、IL-1β和IL-6浓度明显低于Aβ1-42组、Aβ1-42＋对照乱序肽组（P〈0．05），与空白对照组比较差异无统计学意义。Aβ1-42＋Ac2—26组上清液NO浓度为（20．27±2．53）mmol／L，低于Aβ1-42组（75．68±6．14）mmol／L、Aβ1-42＋对照乱序肽组（69．25±4．50）mmol／L，与空白对照组（16．39±2．96）mmol／L比较差异无统计学意义。Western bl
- 罗振钊刘璐马健王静胡绘孔曼王九菊施静卢忠心
- 关键词：小神经胶质细胞TOLL样受体2
- 沉默Annexin-A1对小胶质细胞BV-2生长和迁移能力的影响及其机制被引量：3
- 2016年
- 目的 探讨沉默Annexin-A1（Anxa1）基因对小胶质细胞系BV-2细胞生长、迁移能力的影响及其可能机制.方法 采用RT-PCR和Western blot法从基因和蛋白水平验证小干扰RNA（siRNA）对小胶质细胞系BV-2细胞内Anxa1的沉默效率,采用MTT法检测Anxa1 siRNA对BV-2细胞增殖的作用,膜联蛋白Ⅴ/碘化丙啶（AnnexinⅤ/PI）双染流式细胞术检测Anxa1 siRNA对BV-2细胞凋亡的影响,应用Transwell小室检测Anxa1 siRNA对BV-2细胞迁移能力的影响,Western blot法检测细胞周期和迁移相关信号通路蛋白的表达.结果 Anxa1 siRNA干扰组在24 h、48 h、72 h细胞生长抑制率分别为（16.9±2.1）%、（23.1±3.6）%和（42.4±1.7）%,与siRNA-NC组[分别为（1.35±0.5）%、（2.06±0.7）%和（8.65±0.9）%]比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,沉默Anxa1对BV-2细胞的增殖发挥抑制作用;转染后48 h Anxa1 siRNA组细胞凋亡率为（18.4±2.1）%,明显高于siRNA-NC组（5.2±0.3）%和空白对照组（4.3±0.2）%;Anxa1 siRNA干扰组细胞迁移能力（28.7±5.2）明显低于siRNA-NC组（173.4±11.4,P〈0.01）,Anxa1 siRNA干扰可显著下调细胞周期蛋白Cyclin D1的表达水平和激活p38与JNK信号通路.结论 siRNA沉默Anxa1基因可抑制小胶质细胞的生长、迁移能力,分别通过下调Cyclin D1和激活p38与JNK信号通路来实现.
- 魏礼清刘璐丁钟欢肖潇施静卢忠心罗振钊
- 关键词：RNA干扰细胞生长
- 缺血性脑卒中患者血清中miR-145、miR-497表达变化及其与Hs-CRP、MMP-9的相关性被引量：13
- 2015年
- 目的探讨miR-145、miR．497在缺血性脑卒中患者血清中的表达水平及其表达变化和超敏C反应蛋白（Hs-CRP）、基质金属蛋白酶-9（MMP-91的相关性。方法选择武汉市中心医院自2013年1月至10月收治的126例缺血性脑卒中患者（患者组，包括轻度神经功能缺损28例、中度神经功能缺损61例、重度神经功能缺损37例）和同期107例健康体检者（对照组）为研究对象，采用荧光定量PCR法检测血清中miR．145、miR-497的表达水平．采用免疫比浊法及ELISA法分别检测Hs-CRP和MMP-9的表达水平，采用偏相关分析法探索患者组血清中miR-145、miR-497的表达变化与Hs-CRP、MMP-9的相关性。结果（1）患者组血清中miR-145、miR-497及Hs-CRP、MMP-9的表达水平明显高于对照组，差异均有统计学意义（氏0．05）。偏相关分析法结果显示：患者组血清中miR-145的表达水平与miR-497、CRP、MMP-9都存在正相关性（r=0．718，P=-0．000；r=0．658，P=-0．000；r=0．455，P=0．000），miR-497的表达水平与CRP、MMP-9都存在正相关性（r=0．845，P=0．000；r=0．787，P=0．000）。（2）重度神经功能缺损患者血清中miR-145、miR-497及Hs—CRP、MMP-9的表达水平明显高于中度、轻度患者，中度神经功能缺损患者血清中miR-145、miR-497及Hs=CRP、MMP=9的表达水平明显高于轻度患者，差异均有统计学意义（P〈0．05）；并且在不同程度神经功能缺损患者血清中，miR-145、miR=497和Hs=CRP、MMP-9的表达水平之间具有不同的相关强度。结论患者血清中miR=145、miR-497可能可以作为诊断缺血性脑卒中的分子标志物，并且二者在缺血性脑卒中的发生发展过程中可能具有协同调控作用。
- 罗振钊孔曼卢忠心王静
- 关键词：缺血性脑卒中MIR-145基质金属蛋白酶-9
- 神经元损伤度对小胶质细胞表型的影响被引量：4
- 2015年
- 目的探讨不同的神经元损伤度对小胶质细胞表型的影响。方法将原代培养的神经元进行缺氧处理,不同的时长(0.5、1、2、4h)后,复氧处理24h,收集神经元条件培养液(neuron-conditioned media,NCM),然后将NCM刺激原代培养的小胶质细胞24h(NCM∶小胶质细胞培养液=1∶1,V/V)。采用Western blot法检测小胶质细胞内的M2表型标记物精氨酸酶-1(arginase-1)和激活标记物离子钙结合衔接分子-1(Iba-1)的表达变化规律,采用免疫荧光法检测arginase-1的表达变化规律。同时,采用ELISA法检测小胶质细胞培养液上清中的营养因子,如脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和炎性因子,如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的分泌变化规律。最后,将不同损伤度的NCM诱导小胶质细胞形成不同表型,将小胶质细胞和缺氧处理2h后的神经元共培养24h,MTT法检测神经元的活力。结果轻微损伤(缺氧0.5、1h)的NCM明显下调M2型标记物arginase-1的表达水平,中度(缺氧2h)和重度(缺氧4h)损伤的NCM能够上调arginase-1的表达,各种损伤度的NCM都能上调Iba-1的表达水平,提示其在一定程度上激活小胶质细胞。同时,轻微损伤的NCM明显上调小胶质细胞TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌,而中度和重度损伤的NCM对这些促炎因子的释放没有影响,各种损伤度的NCM都能明显上调营养因子的分泌。MTT法检测表明,轻微和重度损伤处理的NCM刺激的小胶质细胞进一步加重缺氧处理的神经元损伤,而中度损伤的NCM对缺氧处理后的神经元具有保护作用。结论神经元损伤度是决定小胶质细胞表型的重要因素,进而使小胶质细胞进一步发挥神经毒性或保护作用。
- 罗振钊王静孔曼胡绘卢忠心施静
- 关键词：小胶质细胞细胞因子表型
- 迷走神经刺激术在脑缺血中的应用及神经机制被引量：6
- 2012年
- 长期以来,迷走神经刺激(vagus nerve stimulation,VNS)被广泛用于临床顽固性癫痫和药物抵抗性抑郁症的治疗,近年来又有文献报道迷走神经刺激术对脑缺血损伤也具有保护作用。VNS可以减少梗死灶面积和增加脑缺血后实验动物的功能评分,机制上它可以通过减少兴奋性谷氨酸的释放抑制神经元的兴奋性,通过抑制细胞因子的合成以减少炎症组织的损伤,并能够抑制神经元凋亡、提高神经营养因子表达水平、促进神经细胞新生以及促进去甲肾上腺素释放等。迷走神经刺激术作为未来治疗脑缺血损伤的一种新的方法,具有良好的应用前景,本文就其作用机制进行综述。
- 田云丽施静刘爱芬
- 关键词：迷走神经刺激脑缺血损伤神经元
