福建省自然科学基金(2011J01058)
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
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- 相关机构：厦门大学更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学理学更多>>
- 人胰岛素原密码子的优化及其在毕赤酵母中的表达被引量：2
- 2012年
- 依据毕赤酵母偏好密码子,设计合成长效人胰岛素原(human proinsulin,HPI)基因序列,所合成的HPI基因全长为200bp,并在其N端添加信号肽(EEAEAEAEPK)以提高目的蛋白表达.将改造后基因克隆到pPIC9K载体中,构建分泌表达型载体pPIC9K-HPI,转化到毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中.用遗传霉素G418梯度筛选获得高拷贝菌株,在甲醇诱导下表达分子质量为7.87ku的HPI,利用金属螯合层析纯化蛋白质,胰蛋白酶酶切后利用人胰岛素试剂盒测得生物活性,HPI摇瓶最高产量可达35.4mg/L.该研究为获得大量长效胰岛素基因工程产品奠定研究基础.
- 史莹飞敬科举凌雪萍卢英华
- 关键词：胰岛素原基因改造毕赤酵母
- 离子交换树脂吸附L-色氨酸的动力学研究被引量：5
- 2012年
- 通过静态吸附实验,研究了L-色氨酸在001×7型阳离子交换树脂上的等温吸附和吸附动力学特性。采用动边界模型描述L-色氨酸在该树脂上的交换行为,考察了料液浓度、树脂粒径和温度对交换过程的影响。结果表明,L-色氨酸在001×7型阳离子交换树脂上的吸附等温线符合Langmuir等温方程,且随pH降低,树脂的最大平衡吸附量逐渐增大;交换过程的吸附速率随L-色氨酸浓度和温度的升高而增大,但随树脂粒径的增大而减小;离子交换过程的速度控制步骤为颗粒扩散控制。交换过程的反应速率常数k0为1.199×10 5,反应级数为1.7,表观活化能Ea为19.94kJ mol 1,并得到了动力学总方程式。
- 谢友坪敬科举姚传义卢英华
- 关键词：L-色氨酸离子交换树脂动力学
- 癸酸钠抗性菌株产达托霉素培养条件的响应面优化被引量：4
- 2013年
- 为提高玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)NRRL 11379产达托霉素的能力,在实验室已有研究基础上对生产菌株进行癸酸钠抗性筛选,得到癸酸钠抗性株D1000-S3-2-P2000,经验证其能够耐受高癸酸钠浓度.此外,使用因子筛选和响应面设计对发酵培养基进行氨基酸、维生素、微量元素种类的筛选和优化,最终确定培养基组成为(g/L):酵母提取物11,(NH4)2Fe(SO4)2.6H2O 0.86,葡萄糖10.7,糊精72,糖蜜7.2,组氨酸1.7,天冬氨酸1.3,L-天冬酰胺0.74,硫辛酸0.007 92,ZnSO4.7H2O 0.55.利用此培养基进行摇瓶和发酵罐分批发酵培养得到达托霉素产量分别为42.38和411mg/L,分别是优化前的2.52倍和1.46倍.
- 段然叶驰名吴意珣卢英华敬科举
- 关键词：达托霉素抗性筛选响应面设计培养基优化
