福建省农科院青年科技人才创新基金(2007F3081)
- 作品数：5 被引量：27H指数：3
- 相关作者：王万宗陈宗雄刘晓强刘明东盛天金更多>>
- 相关机构：南京军区福州总医院福州大学福建师范大学更多>>
- 发文基金：福建省农科院青年科技人才创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 一种新颖葡萄糖生化传感器的研制及其在鲁米诺电化学发光法测定葡萄糖含量的应用被引量：3
- 2011年
- 将葡萄糖氧化酶1mg,纳米金及碳纳米管的复合材料2mg,无水乙醇1mL和10μL全氟磺酸用超声方法分散均匀后滴涂于玻碳电极表面,制成新颖的葡萄糖生化传感器(记作Nano-Au/CNT′s/GOD/GCE)。在含0.2mol·L^(-1)磷酸盐缓冲溶液及5.5×10^(-5)mol·L^(-1)鲁米诺存在的溶液中,用此生化传感器作工作电极,测得葡萄糖浓度在8.0×10^(-7)～5.0×10^(-4)mol·L^(-1)范围内与鲁米诺反应产生的化学发光强度呈线性关系,其检出限(3S/N)为8.0×10^(-8)mol·L^(-1)。同一支传感器连续5次测定,所得测定值的相对标准偏差为4.8%。将此传感器置于pH7.8磷酸盐缓冲溶液中,在4℃条件下保存2周后,在相同体系中进行测定时,其发光强度降低7.2%。
- 叶瑞洪王万宗林振宇
- 关键词：电化学发光生化传感器鲁米诺葡萄糖
- 胰蛋白酶及Ⅱ型胶原酶消化获取关节软骨细胞被引量：6
- 2010年
- 背景:近年来,众多研究欲采用体外分离培养的关节软骨细胞作为修复缺损的关节软骨的种子细胞,然而,获得纯化的具有生物活性的关节软骨细胞较为困难。目的:拟运用胰蛋白酶与Ⅱ型胶原酶联合消化获取关节软骨细胞。方法:从SD大鼠的正常股骨及胫骨关节表面获取关节软骨,先后运用0.25%的胰蛋白酶和0.2%Ⅱ型胶原酶消化,显微镜下见大量细胞游离后,弃去大块的未消化的关节软骨碎片,离心,去上清,PBS洗涤2次后,加入软骨细胞原代培养液进行培养、增殖。应用甲苯胺蓝及苏木精-伊红染色方法检验所得细胞是否为关节软骨细胞。结果与结论:在严格掌握酶的浓度及消化时间的前提下,通过0.25%胰蛋白酶和0.2%Ⅱ型胶原酶联合酶解关节软骨的方法,成功从大鼠股骨及胫骨关节软骨内分离培养出细胞,并经过甲苯胺蓝染色及苏木精-伊红染色证实,所得的细胞为具有生物活性的关节软骨细胞。
- 刘明东盛天金王万宗
- 关键词：关节软骨细胞胰蛋白酶甲苯胺蓝苏木精-伊红染色
- 骨髓间充质干细胞与关节软骨细胞Transwell共培养诱导形成软骨被引量：14
- 2010年
- 背景:研究证实,关节软骨细胞具有分泌诱导因子促进骨髓间充质干细胞向关节软骨细胞分化的能力,但至今未见两种细胞运用Transwell共培养诱导骨髓间充质干细胞形成软骨的报道。目的:观察在Transwell共培养系统中共培养后,关节软骨细胞诱导骨髓间充质干细胞向关节软骨样细胞转化的能力。方法:骨髓间充质干细胞来源于4周龄SD大鼠的股骨及胫骨干骨髓,关节软骨细胞来源于4周龄SD大鼠的正常股骨头表面的关节软骨。分别吸取第3代骨髓间充质干细胞和关节软骨细胞,按1:1的细胞比例分别植于Transwell共培养系统中,下室植入骨髓间充质干细胞,上室植入关节软骨细胞。同时设置相同浓度单纯骨髓间充质干细胞对照组,分别在含胎牛血清的DMEM培养基中培养,相差显微镜下观察细胞的增殖和基质合成情况,并对各组细胞爬片进行Ⅱ型胶原免疫组化染色及氨基聚糖含量检测。结果与结论:共培养组骨髓间充质干细胞数量增多,细胞外基质合成丰富,其基质能被Ⅱ型胶原免疫组化染色,细胞染色呈现黄色。氨基聚糖含量随着诱导时间增加而增多。提示关节软骨细胞分泌物具有促进骨髓间充质干细胞向关节软骨样细胞转化的能力,与此同时,骨髓间充质干细胞还能分泌促进组织细胞修复的细胞因子,使共培养中的软骨细胞功能得以加强。由此可见,软骨细胞与骨髓间充质干细胞共培养诱导具有独特的优势。
- 王万宗陈宗雄刘晓强
- 关键词：关节软骨细胞骨髓间充质干细胞
- 骨髓间充质干细胞和关节软骨细胞共培养与转化生长因子β1诱导的比较被引量：7
- 2010年
- 背景:应用生长因子可诱导骨髓间充质干细胞向软骨样细胞分化,但诱导后的细胞在生物体内很难形成成熟的软骨细胞且仍具有分泌软骨基质及抗压,抗摩擦的能力。目的:对比分析骨髓间充质干细胞与关节软骨细胞共培养诱导、转化生长因子β1诱导骨髓间充质干细胞的效果。方法:提取SD大鼠关节软骨细胞与第3代骨髓间充质干细胞,按1:2,1:1,2:1浓度比种植于Transwell共培养系统中。同时设置转化生长因子β1诱导组为对照。相差显微镜下观察细胞的增殖和基质合成情况,并诱导结果行MTT比色法检查、氨基聚糖水平检测及WesternBlot检测Ⅱ型胶原基因的表达情况。结果与结论:关节软骨细胞与骨髓间充质干细胞1:2比例诱导的结果与10μg/L转化生长因子β1诱导结果相当,但随着关节软骨细胞在诱导中体系中比例的增加,诱导结果明显优于转化生长因子β1诱导,当诱导细胞达到一定比例时,诱导结果不会随之变化。说明软骨细胞与骨髓间充质干细胞共培养可以诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞转化,在开始时,诱导结果与软骨细胞所占的比例成正相关,当软骨细胞达到一定比例时,骨髓间充质干细胞的诱导结果并未发生明显变化,提示骨髓间充质干细胞对软骨细胞的诱导存在饱和现象。
- 陈宗雄刘晓强王万宗
- 关键词：骨髓间充质干细胞关节软骨细胞转化生长因子Β1
- 鲁米诺在SnS/ITO电极上的ECL行为及其在SOD测定中的应用
- 2010年
- 本文通过阴极恒电位方法在ITO电极上修饰SnS薄膜,优化了镀膜条件并对修饰电极通过SEM、电化学等性能进行了表征。研究了鲁米诺在SnS/ITO修饰电极上的ECL行为,研究发现SnS的存在可以促进ECL的增强,ECL的强度同鲁米诺的浓度成正比,鲁米诺的最低检测限可达到3.9×10-11 mol/L。另外,基于超氧化物歧化酶(SOD酶)可以抑制鲁米诺的电致化学发光的原理,利用该修饰电极建立了一种SOD测定ECL方法,测定的线性范围为2.4×105U/L～2.16×106 U/L,最低检测限为1.5×106 U/L。
- 王万宗
- 关键词：SNS电致化学发光鲁米诺
