国家自然科学基金(30971527)
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
- 相关作者：黄红云王洪美任玉水姜晓荣田国忠更多>>
- 相关机构：北京市虹天济神经科学研究院首都医科大学附属北京康复医院北京大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 来源于人胚室下区神经干/祖细胞的贴壁法培养和鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的建立有效的人胚胎神经干/祖细胞分离及纯化方法以达到临床需要。方法无菌取胎脑室管膜下区组织,经反复机械吹打制备细胞混悬液,采用贴壁法进行体外培养、传代。传代后用Nestin进行细胞鉴定。结果应用贴壁法进行胎脑室管膜下区神经干/祖细胞的培养能够稳定传代20代以上;共聚焦显微镜下可见Nestin阳性细胞表达呈递增趋势,传至P3(passage3)阳性率为35%,P7为79%,P12为90%,P15为99%。传到前七代时分别做细胞存活率鉴定,可达(82.57±1.38)%。结论成功建立了来源于人胚室下区的神经干/祖细胞的贴壁法培养,为该细胞移植治疗神经系统疾病提供了技术方法支持。
- 姜晓荣王洪美陈琳田国忠包建玲任玉水黄红云郗海涛
- 关键词：细胞培养人胚胎免疫细胞化学
- 临床应用型人脐血间充质干细胞分离培养与鉴定
- 2010年
- 目的探讨能够达到临床细胞治疗标准的人脐血间充质干细胞的体外培养与纯化方法。方法以15%FBS/DMEM作为培养基,采用淋巴细胞分离液间接分离法,分离MSCs,以贴壁培养法进行原代培养和纯化。倒置显微镜下观察生长状态和形态学变化,共聚焦显微镜下观察细胞表面抗原CD34,CD44免疫组化染色的鉴定。结果细胞计数显示人脐血间充质干细胞产品的细胞成活率大于95%,其纯度大于85%,符合卫生部第三类医疗技术的有关标准。结论脐带血内含MSCs,可在体外分离培养纯化增殖,获得大量相对纯化的MSCs,达到临床应用水平。
- 肖娟陈琳王洪美李莹任玉水黄红云
- 关键词：脐血间充质干细胞细胞培养免疫组化
- ABCA2蛋白在大鼠面神经组织内雪旺细胞成熟过程中的表达
- 2010年
- 目的本研究通过检测面神经发育过程中ATP结合盒式转运蛋A2(ABCA2)的表达方式,探讨ABCA2蛋白在周围神经系统髓鞘形成过程中的作用。方法应用多重免疫荧光方法检测发育过程中面神经组织内ABCA2和特异雪旺细胞标志抗体的表达。结果 ABCA2蛋白由出生后第8d在成髓鞘雪旺细胞特异抗体-锌指端转录因子Krox20和S100阳性的细胞中开始少量表达;在出生后第14d,近50%髓鞘化的该类细胞中可检测到ABCA2蛋白;在成熟期,所有该类细胞中都可检测到ABCA2蛋白。结论 ABCA2在生后雪旺细胞的表达随髓鞘化的发育成熟而增加。
- 王琰于何姜学钧齐藤隆稻垣畅也
- 关键词：雪旺细胞髓鞘化
- 人胚嗅球嗅鞘细胞原代培养的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的拟建立人胚胎嗅球嗅鞘细胞的培养方法并探讨这些细胞在活性、纯度方面是否具备临床应用水平。方法用含有促进细胞生长的谷氨酰胺、转铁蛋白、生物素、硒酸纳的无血清纯化液纯化嗅鞘细胞,胰蛋白酶消化收集细胞,制成单细胞悬液。采用台盼蓝染色法进行活性测定,P75NGFR和S-100双标免疫荧光染色鉴定,以Hoechst复染鉴定OECs的纯度。结果可见比较典型的嗅鞘细胞:双极或梭形、多突起形和扁圆形,主要以梭形和多突起形细胞为主。细胞活性大于95%,纯度大于90%。结论实验建立的人胚胎嗅球嗅鞘细胞原代培养的方法可行,细胞活性大于95%,纯度和均一性已达到临床应用水平。
- 任玉水闫军浩王洪美陈琳黄红云周长满姜晓荣田国忠
- 关键词：嗅鞘细胞细胞培养纯化免疫荧光人胚
- 成人鼻腔嗅区黏膜细胞的分离培养与免疫学特点被引量：1
- 2010年
- 目的探讨成人鼻腔嗅区黏膜细胞的分离培养方法及嗅鞘细胞(OECs)的免疫学特点。方法通过手术取成人嗅区黏膜7例,将其消化为单个细胞后采用差速贴壁法除去成纤维细胞。倒置显微镜下行形态学观察,并利用p75、S100、GFAP抗体对嗅鞘细胞进行免疫荧光化学染色,共焦显微镜下进行各种抗体阳性率的统计。结果共焦显微镜下可见嗅黏膜细胞中S100和p75阳性细胞多见,GFAP阳性细胞在嗅黏膜细胞中较少见。一般在同一细胞上可见S100和p75共同表达,而GFAP与S100、p75未见有共同表达现象;p75阳性细胞胞体大小和形态也大不相同。经统计S100和p75阳性细胞的平均百分率为(35.0±8.3)%。结论成功进行了成人鼻腔嗅区黏膜细胞的分离培养。
- 王洪美任玉水田国忠姜晓荣曹敬丽刘婧媛周长满黄红云
- 关键词：嗅鞘细胞P75S100细胞移植
- 人骨髓基质细胞培养、纯化和鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的：介绍一种为临床细胞学治疗提供自体骨髓基质细胞（BMSCs）的分离纯化方法。方法：采用红细胞沉降和密度梯度离心相结合的分离纯化方法从骨髓血中分离BMSCs。台盼蓝染色实验测定BMSCs活力；对BMSCs进行CD44、CD34抗体免疫荧光显色，激光共聚焦显微镜观察。结果：BMSCs活性大于95％，纯度大于85％，细胞的纯度和均一性均符合中国卫生部第三类医疗技术的要求，已达到临床应用标准。结论：本细胞制备方法简单易行，可批量获得BMSCs，满足临床治疗的需要。
- 田国忠闫军浩黄红云周长满陈琳王洪美姜晓荣任玉水
- 关键词：骨髓基质细胞纯化免疫荧光
