河北省科技攻关计划(22761147)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
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- 小剂量豚鼠脊髓匀浆诱导Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的建立被引量：7
- 2009年
- 目的探索以小剂量豚鼠脊髓匀浆为抗原,建立Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,并观察其病理改变。方法按脊髓湿重与冰盐水体积为1:10的比例制备豚鼠脊髓匀浆抗原,免疫Wistar大鼠,建立EAE模型;留取脑和脊髓进行HE染色及三色染色,光镜下观察病理改变。结果Wistar大鼠免疫后第17.20±6.48天第一次发病,发病形式多样,除表现EAE常见症状外,尚出现痉挛状态、斜颈等特殊症状。HE染色发现神经组织内炎细胞浸润,血管"袖套"样病灶形成;三色染色可见轴突肿胀,呈串珠状,且不连续,着色不均匀;髓鞘结构层次紊乱,疏松,崩解。结论小剂量脊髓匀浆诱导的EAE模型,病程及发病表现更接近于人类多发性硬化的表现,且经济实用,是研究多发性硬化的理想动物模型。
- 李波刘瑞春檀国军刘宁宁
- 关键词：自身免疫性脑脊髓炎多发性硬化动物模型
- 复发缓解型EAE大鼠长期、自然病程的视神经病理改变被引量：2
- 2011年
- 目的建立小剂量复合抗原成分诱导的EAE长病程动物模型,通过多种方法观察EAE大鼠的视神经病理改变。方法雌性Wistar大鼠72只,6~8周龄,体重180~200g,其中12只为对照组,余60只诱导EAE模型,进行EAE动物的神经功能评分(按照Kono五级评分法[1]进行),观察大鼠每次发病时的病情、病程变化。于第一次发病后第7d和半年时行眼底照相检查,并取视神经行HE染色光镜观察和透射电镜观察其病理改变。结果 EAE组大鼠视神经光镜主要表现为有不同程度的炎症反应;电镜主要表现为髓鞘稀疏,其髓鞘板层松解,轴突萎缩、变性,结构模糊不清。EAE组第一次发病后第7d及半年时眼底照相提示视乳头萎缩,边界不清楚。半年时视乳头萎缩更明显。结论 EAE大鼠存在明显的视神经病变,主要表现为视神经炎症反应、脱髓鞘改变和轴索损伤。
- 张建娥蔺辉前杨素红刘瑞春郭艳苏吴书玉吴东霞檀国军
- 关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎视神经脱髓鞘轴索损伤
- 特殊染色鉴定小剂量豚鼠脊髓匀浆诱导Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的价值
- 2009年
- 目的特殊染色鉴定小剂量豚鼠脊髓匀浆诱导Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的价值,并观察其病理的改变。方法按脊髓重量与冰盐水体积之比为1:5的比例制备豚鼠脊髓匀浆抗原,免疫Wistar大鼠,建立EAE模型;组织切片进行HE染色,三色染色,髓鞘碱性蛋白(MBP)及神经微丝(NF)免疫组化,光镜下观察病理改变。结果Wistar大鼠免疫后第16.07±4.25天发病,发病形式多样,除表现EAE经典症状外,尚出现痉挛状态、斜颈等特殊症状。HE染色发现神经组织内炎细胞浸润,血管"袖套"样病灶形成;三色染色可见轴突肿胀,呈串珠状,且不连续,着色不均匀;髓鞘结构层次紊乱,疏松,崩解;MBP及NF免疫组化研究发现病变组织内白质脱髓鞘及轴突损伤。结论三色染色结合MBP、NF免疫组化检测,较常规HE染色更能直接地、准确地显示EAE大鼠的病理变化,可推广应用。
- 李波檀国军刘宁宁刘瑞春
- 关键词：自身免疫性脑脊髓炎髓鞘碱性蛋白神经微丝
- 多病程实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠模型的信号转导通路基因芯片研究
- 2009年
- 目的用信号转导通路发现者基因芯片寻找多病程实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠不同病程的基因表达差异,从而寻找与其发病机制相关的基因。方法采用豚鼠全脊髓匀浆诱导Wistar大鼠建立EAE模型,分别取正常大鼠、发病期大鼠、缓解期大鼠、复发期大鼠的脊髓腰膨大组织,于-70℃冰箱保存。提取样品RNA,逆转录反应生成cDNA,标记探针,探针与芯片杂交,加入链亲和素耦联的碱性磷酸酶(AP)及化学发光底物反应。图像采集使用GEArray Expression Analysis Suite软件进行完整的芯片数据分析。结果发病期、缓解期、复发期EAE大鼠分别与正常大鼠相比,有表达差异的基因数据为19、23、10项;而有10项基因在比较中随病程变化呈现出发病期表达上调,缓解期表达下调,复发期表达再次上调的趋势。结论实验结果显示EAE大鼠不同发病阶段基因表达有差异,且随病程发展呈一定的趋势变化,这些差异基因与多条信号转导通路有关。
- 刘宁宁李波刘瑞春檀国军郭力
- 关键词：多发性硬化实验性自身免疫性脑脊髓炎基因芯片信号转导通路
- 髓鞘碱性蛋白片段69-85诱导建立大鼠自身免疫性脑脊髓炎模型
- 2009年
- 目的探索以大鼠髓鞘碱性蛋白片段69-85（MBP69-85）为单一抗原,建立Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型,并观察其病理改变。方法MBP69-85以生理盐水溶解,与完全福氏佐剂（CFA）充分混匀制备免疫乳剂;雌性Wistar大鼠70只,留取10只作为正常对照组,余者根据免疫乳剂组分的不同随机分为A、B、C组（n=20）。A组：MBP69-85每只50μg＋CFA（含卡介苗6 mg）;B组：MBP69-85每只25μg＋CFA（含卡介苗6 mg）;C组：MBP69-85每只25μg＋CFA（含卡介苗12 mg）。脑和脊髓组织切片进行HE染色,MBP及神经微丝（neurofilament,NF）免疫组化检测,观察神经组织的病理改变。结果A组内部分大鼠在免疫后第12-16天发病,表现为尾部及四肢无力或麻痹、斜颈等,平均临床症状评分为2.38±1.89;B、C组均未见发病;HE染色可见神经组织内炎细胞浸润,血管＂袖套＂样病灶形成;MBP及NF免疫组化染色显示病变组织内白质脱髓鞘及轴突损伤明显。结论EAE模型建立与免疫抗原的剂量有一定的依赖关系;佐剂中的卡介苗含量不是诱导大鼠发病的主要原因;本模型具有多发性硬化的典型临床表现及病理改变,是研究多发性硬化发病机制及治疗的可靠的动物模型。
- 李波檀国军刘宁宁刘瑞春
- 关键词：脑脊髓炎髓鞘碱性蛋白神经微丝卡介苗
