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转化生长因子β_1对人胚肺成纤维细胞平滑肌肌动蛋白α表达的影响被引量：14: 2004年; 胡永斌初令李翔王金胜沈明曾庆富; 关键词：转化生长因子Β1 肺纤维化

转录因子Egr-1及其在肺病变中的研究进展被引量：11: 2004年; Egr-1 is an important transcription factor, which regulates at least 30 kinds of gene expression. Egr-1 couples extracellular signals to long-term responses by altering expression of Egr-1 target genes. So egr-1 can directly or indirectly affect cell differentiation,apoptosis,immune response,injury and repair. This article reviewed the progress in Egr-1 and the lung disease.; 初令曾庆富; 关键词：基因即早转录因子肺疾病

二氧化硅活化巨噬细胞中早期生长反应因子-1及其信号转导通路的研究被引量：3: 2005年; 目的探讨早期生长反应因子(Egr-1)及其信号转导在矽肺发生发展中的作用.方法用细胞免疫荧光、原位杂交方法检测二氧化硅(SiO2)刺激后Egr-1的表达定位,用报道质粒及EMSA检测其活性改变;用激酶活性分析法检测SiO2刺激巨噬细胞后ERK1/2活性改变,进一步用激酶抑制剂初步探讨SiO2活化Egr-1的信号转导通路.结果 SiO2刺激RAW264.7细胞短时间Egr-1核蛋白表达及转录因子明显增加;且在处理后30～60 min,Egr-1核蛋白结合活性明显升高(为未处理组的20倍);在刺激后15 min ERK1/2活性开始升高,30 min达高峰(活性为对照组的29倍)而后渐降至基础水平;进一步用激酶阻断发现,Egr-1mRNA及蛋白表达均减少.结论 SiO2能激活巨噬细胞中Egr-1,且此过程可能由ERK1/2、p38介导,提示SiO2-ERK1/2、p38-Egr-1通路可能在矽肺发生发展过程中起重要作用.; 初令金中元蒋海鹰胡永斌曾庆富; 关键词：二氧化硅巨噬细胞信号转导通路 EGR-1

激活蛋白-1调控转化生长因子β_1诱导的人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原分泌被引量：4: 2007年; 目的:探讨核转录因子激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)在转化生长因子β1(transfor-ming growth factor-β1,TGF-β1)诱导人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原分泌中的作用。方法:以人肺成纤维细胞HLF-02细胞系为研究对象,给予10μg/L的TGF-β1刺激,于不同时间点收集细胞,采用RT-PCR和Wester blot检测细胞Ⅰ型胶原转录和分泌;阻断实验中选用AP-1抑制剂姜黄素为阻断剂,凝胶阻滞实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测细胞内AP-1的DNA结合活性变化,同时Western印迹检测Ⅰ型胶原分泌变化。结果:TGF-β1能诱导HLF-02细胞Ⅰ型胶原mRNA的转录和分泌(P<0.05);TGF-β1能提高HLF-02细胞AP-1的DNA结合活力(P<0.05);姜黄素能明显抑制TGF-β1诱导的HLF-02细胞AP-1的DNA结合活力,抑制率分别为17.1%,17.6%,24.2%,31.3%(P<0.05);同时,姜黄素能明显抑制TGF-β1诱导的HLF-02细胞Ⅰ型胶原的分泌,抑制率分别为62.1%,58.8%,62.1%,59.6%(P<0.05)。结论:核转录因子AP-1参与TGF-β1刺激的HLF-02细胞Ⅰ型胶原的分泌调控。; 胡永斌曾庆富冯德云李翔彭劲武; 关键词：肺成纤维细胞 I型胶原激活蛋白

大鼠硅肺纤维化中NF-κB和MMP-9的表达被引量：2: 2003年; 目的　研究核转录因子 κB(NF κB)和基质金属蛋白酶 9(MMP 9)的表达在硅肺纤维化发生发展中的作用。方法　应用免疫组化S P法观察NF κB和MMP 9在大鼠硅肺组织中的表达。结果　对照组支气管上皮细胞、肺巨噬细胞和肺间质细胞均可表达NF κB和MMP 9,肺泡上皮细胞和血管内皮细胞未见表达。实验组的支气管上皮细胞、肺巨噬细胞、间质细胞和肺泡上皮细胞NF κB、MMP 9表达均明显增加。在实验的每一个时间点 ,肺巨噬细胞、肺间质细胞中NF κB和MMP 9的半定量表达基本同步 ,呈明显正相关。支气管上皮细胞NF κB在 1～ 2 8d均呈持续高水平表达 ,但MMP 9在 14d后开始减少 ;肺泡上皮细胞NF κB在 114d呈较高水平表达 ,以后下降 ,而MMP 9仅于第 3～ 7天时有阳性表达。结论　矽尘作用下肺内多种细胞NF κB和MMP 9表达增加 ,并可能通过NF κB介导调控MMP 9表达而影响硅肺的发生发展。; 牛海艳初令曾庆富; 关键词：硅肺纤维化 NF-ΚB MMP-9 核转录因子-ΚB 基质金属蛋白酶-9

大鼠实验性矽肺早期生长反应基因表达及其作用的初步探讨被引量：12: 2004年; 目的　探讨核转录因子早期生长反应基因 (Egr 1)在矽肺发生发展中的作用。方法　建立大鼠矽肺模型 ,用免疫组化SP法结合图像分析技术观察了大鼠矽肺组织中各种细胞表达Egr 1、转化生长因子 β1(TGF β1)和纤维黏连蛋白 (FN)的动态变化及相互关系。结果　大鼠矽肺组织中肺巨噬细胞、肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞、间质细胞的Egr 1表达 (灰度值范围 118.58± 5.65～ 168.52± 5.67)比对照组 (灰度值范围 166.2 3± 5.2 3～ 188.12± 8.3 5)均明显增强 ,且主要定位于胞核 ;这 4种细胞表达TGF β1(灰度值范围 12 3 .49± 5.65～ 170 .2 4± 3 .56)比对照组 (灰度值范围 166.53± 6.2 5～ 198.56± 4.53 )也明显增强 ,且定位于胞浆。在大鼠支气管上皮细胞、肺巨噬细胞、肺泡上皮细胞中FN表达较弱 (灰度值范围150 .3 2± 6.54～ 2 0 1.54± 7.3 8) ,但间质细胞中呈高表达 (灰度值范围 12 1.43± 5.65～ 167.55± 6.3 5)。实验第 1～ 2 8天 ,TGF β1和Egr 1在大鼠支气管上皮细胞、肺巨噬细胞、肺泡上皮细胞和间质细胞表达变化基本同步 ,二者呈正相关 (r =0 .61,P <0 .0 1) ;而FN在上述细胞中表达和Egr 1未见相关性 ;FN与TGF β1在间质细胞中表达呈正相关 (r=0 .46,P <0 .0 1)。结论　SiO2; 初令李翔胡永斌王金胜郑晖曾庆富; 关键词：实验性矽肺基因表达细胞表达上皮细胞

二氧化硅对人肺泡Ⅱ型上皮细胞纤溶酶原激活物抑制因子-1和激活蛋白-1表达的影响被引量：3: 2005年; 目的研究SiO2对人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549)中纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)及激活蛋白1(AP1)表达的影响,探讨SiO2致肺纤维化的发病机制。方法按SiO2(200μg/ml)与A549细胞共育时间的不同,实验分SiO2刺激0、4、8、16、24h组。利用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、Westernblot及免疫细胞化学SP法检测细胞PAI1mRNA和蛋白的表达;AP1(cjun/cfos)总蛋白及核蛋白表达的检测采用Westernblotting。结果SiO2刺激后,实验组PAI1mRNA及蛋白表达强度随时间延长依次增强,呈直线正相关(rmRNA=0.911,r蛋白=0.902,P<0.05),且实验组PAI1蛋白表达均高于对照组(0.36±0.03),其中24h组(0.73±0.01)表达最强;cjun和cfos核蛋白的表达亦明显高于对照组(0.52±0.02、0.15±0.01),cjun核蛋白的表达4h组(1.54±0.02)最强;cfos核蛋白表达8h组(0.36±0.01)最强;cjun和cfos核蛋白的表达均从孵育16h开始逐渐下降。AP1(cjun/cfos)总蛋白的表达各组间差异无统计学意义(P>0.05);PAI1阳性信号定位于胞浆和胞核。结论SiO2能够诱导A549细胞PAI1的表达,呈现出明显的时间-效应关系,核转录因子AP1在SiO2刺激的早期被激活。; 林志胡永斌冯德云初令王金胜曾庆富; 关键词：二氧化硅纤溶酶原激活物抑制因子-1 纤溶酶原激活剂纤溶酶原激活物抑制因子-1 激活蛋白-1 WESTERNBLOT 二氧化硅 PAI-1

二氧化硅活化巨噬细胞中核转录因子早期生长反应基因-1的表达被引量：9: 2003年; 目的　研究二氧化硅 (SiO2 )刺激的巨噬细胞中核转录因子早期生长反应基因 1(earlygrowthresponsegene 1,Egr 1)表达和定位分布的动态变化 ,探讨Egr 1在硅沉着病发病机制中的作用。方法　用免疫组织化学方法观察大鼠实验性硅沉着病组织中肺巨噬细胞Egr 1表达的动态变化 ;用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、Western印迹和免疫荧光方法分别检测体外SiO2 刺激的巨噬细胞系RAW2 6 4 .7中Egr 1mRNA、蛋白表达及其定位。结果　大鼠实验性硅沉着病中肺巨噬细胞Egr 1表达明显上调 ,阳性反应强度在 14d时达到高峰。体外SiO2 作用RAW2 6 4 .7细胞 15～ 2 4 0min ,Egr 1mRNA表达均明显增高 ,峰值位于 15min ,4 80min时仅微量表达。Egr 1蛋白于 6 0min时核移位最明显 ,持续至 12 0min ,随后减少 ;在 6 0～ 12 0min时间内 ,Egr 1核蛋白及总蛋白的表达量亦达峰值 ,其后开始下降。结论　SiO2 能激活巨噬细胞中核转录因子Egr 1,提示Egr 1可能在硅沉着病的发生发展中起重要的调控作用。; 初令彭劲武蒋海鹰曾庆富; 关键词：二氧化硅巨噬细胞核转录因子硅沉着病

矽肺纤维化细胞分子机制研究的进展被引量：38: 2003年; 胡永斌曾庆富; 关键词：矽肺肺纤维化肺上皮细胞肺成纤维细胞细胞黏附分子核转录因子

肺纤维化中转录因子激活及其信号转导途径被引量：6: 2002年; 胡永斌曾庆富; 关键词：肺纤维化信号转导途径

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国家自然科学基金(30170399)

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