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国家自然科学基金(30870109)

作品数:16 被引量:35H指数:3
相关作者:曹雪松刘国富李芳芳王媛媛申永梅更多>>
相关机构:聊城大学曲阜师范大学山东省委党校更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:农业科学生物学自动化与计算机技术经济管理更多>>

文献类型

  • 16篇中文期刊文章

领域

  • 13篇农业科学
  • 3篇生物学
  • 1篇经济管理
  • 1篇自动化与计算...

主题

  • 4篇马铃薯
  • 4篇基因
  • 3篇英文
  • 3篇荧光
  • 3篇原核表达
  • 3篇侵染
  • 3篇马铃薯X病毒
  • 3篇RNA沉默
  • 3篇沉默
  • 2篇蛋白
  • 2篇烟草
  • 2篇运动蛋白
  • 2篇小麦
  • 2篇克隆
  • 2篇黄矮病
  • 2篇黄矮病毒
  • 2篇基因克隆
  • 2篇HSP60
  • 2篇大麦
  • 2篇大麦黄矮病

机构

  • 12篇聊城大学
  • 1篇曲阜师范大学
  • 1篇山东省委党校

作者

  • 12篇曹雪松
  • 9篇刘国富
  • 4篇王媛媛
  • 4篇李芳芳
  • 4篇霍晓辉
  • 4篇申永梅
  • 3篇杨纪君
  • 3篇曲宇杰
  • 2篇赵阳
  • 1篇田野
  • 1篇卢娇
  • 1篇赵庆臻
  • 1篇田东方

传媒

  • 4篇安徽农业科学
  • 4篇Agricu...
  • 2篇Animal...
  • 1篇生物技术通报
  • 1篇病毒学报
  • 1篇天津农业科学
  • 1篇聊城大学学报...
  • 1篇植物学报
  • 1篇Plant ...

年份

  • 1篇2019
  • 1篇2018
  • 1篇2017
  • 1篇2013
  • 3篇2012
  • 4篇2011
  • 5篇2010
16 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
大麦黄矮病毒运动蛋白在烟草中的瞬时表达被引量:2
2010年
[目的]快速鉴定运动蛋白基因在烟草中的瞬时表达,进一步研究该外源基因的功能。[方法]将大麦黄矮病毒的运动蛋白基因定向克隆到马铃薯X病毒载体上,得到重组的马铃薯X病毒,电击转化农杆菌后,利用农杆菌渗透注射技术注射到本生烟草的叶片中,观察病毒对烟草的侵染状况。[结果]渗透注射后第7天观察,重组病毒载体侵染的烟草系统叶有病毒侵染症状,而对照组未有此现象。对2组试验进行逐日跟踪观察,重组病毒载体侵染的烟草有较严重的病毒侵染症状和叶片卷曲现象,后期引起注射叶及系统叶坏死。而空病毒载体侵染的烟草只有轻微的病毒侵染症状,并能够恢复健康。对侵染的烟草进行RT-PCR检测,结果表明外源基因BYDV-MP在烟草体内进行了正常的转录和表达。[结论]BYDV-MP蛋白促进了PVX的系统侵染速度,加重了系统侵染的病毒症状,是病毒病症的决定因子;利用PVX表达载体表达异源MP的方法是可行的。
王媛媛李芳芳刘国富曹雪松
关键词:马铃薯X病毒烟草侵染
Biological Characteristics of Lepus timibus in Captivity
2019年
The biological characteristics of Lepus timibus in captivity, such as living habit, feeding habit, nutrition composition of main food, growth and development, molting rule, were studied systematically. The results showed that there were more than 30 kinds of common plants favored by L.timibus. The linear regression equation of weight gain was y=-23.223+30.929 x. The molting sequence in spring successively was head, dorsum, ear,both sides of the chest, abdomen, limbs, tails.
Liu HaoTu Shuqing
关键词:LEPUSBIOLOGYFEEDINGHABIT
大麦黄矮病毒运动蛋白是RNA沉默抑制因子被引量:2
2012年
大麦黄矮病毒(barley yellow dwarf virus, BYDV)属黄症病毒科家族, 其基因组包含6个开放阅读框(open readingframes, ORFs)。将BYDV的6个基因分别克隆到pWEIMING101载体上, 得到重组基因。电击转化农杆菌后, 利用农杆菌瞬时表达方法渗透注射转GFP基因的本氏烟草16c植株的叶片, 在长波长紫外灯下观察GFP的表达, 并通过Northern blot证明所得现象。研究结果表明, BYDV的PAV株系ORF4编码的运动蛋白(movement protein, MP)是RNA沉默抑制因子, 其表达可以抑制局部和系统RNA沉默。BYDV-MP与GFP的双链RNA(dsGFP)共表达后仍能抑制RNA沉默, 荧光强度与叶片中GFP的mRNA和其沉默降解形成的siRNA的量有对应关系, 其N端核定位序列对抑制局部基因沉默起主要作用, 第5、6位氨基酸是抑制基因沉默的关键氨基酸。BYDV-MP单独渗透注射的部位均产生细胞死亡。
申永梅刘国富杨纪君霍晓辉曹雪松
关键词:大麦黄矮病毒运动蛋白RNA沉默
大麦黄矮病毒运动蛋白形成同型二聚体的功能研究(英文)
2011年
[目的]利用荧光双分子互补技术研究大麦黄矮病毒运动蛋白(BYDV-PAV,MP)形成二聚体的可能性,并研究MP同型二聚体与病毒运动之间的关系。[方法]将双分子荧光互补载体中包含多克隆位点、35S启动子及终止子的DNA片段构建到拷贝数较高的植物表达载体pCAMBIA1300上,然后以BYDV-PAV的全长cDNA为模板,根据GenBank中登记的BYDV-MP的基因序列设计引物,通过PCR扩增得到目的基因片段BYDV-MP,克隆到经过改造的双分子荧光互补载体pCAMBIA1300-NE、pCAMBIA1300-CE上,得到了重组的双分子荧光互补载体。电击转化农杆菌,利用农杆菌渗透注射技术注射到烟草叶片,荧光显微镜下观察植物体内的蛋白互作现象。[结果]农杆菌渗透注射后,2~5d观察双分子荧光互作现象,MP蛋白互作组及正对照组叶片产生黄色荧光,负对照组未有荧光现象。[结论]BYDV-MP在植物体内形成同源二聚体,该研究结果为进一步深入开展BYDV运动过程和机理等研究提供了理论依据。
赵阳曲宇杰刘国富曹雪松
关键词:荧光
病毒基因沉默抑制因子与AGO蛋白结合抑制RNA沉默的研究进展被引量:1
2012年
总结了RNA沉默及病毒RNA沉默抑制因子(VSRs)的研究进展,以及病毒基因沉默抑制因子利用甘氨酸/色氨酸(GW)模型作为ARGONAUTE(AGO)钩和寄主发生RNA沉默的重要作用部位相互结合从而抑制基因沉默的研究机制。通过研究发现,在酵母、动植物细胞中,一些包含GW模型的蛋白质被认为是RNA沉默效应复合物中AGOs的重要协助者。结果说明,GW模型是一种能用于调节RNA沉默途径活性的万能的、有效的工具,用GW模型竞争性结合AGOs并抑制寄主基因沉默可能是一种被许多病原菌用于抵抗寄主RNA沉默的方法。
申永梅杨纪君霍晓辉田东方曹雪松
关键词:RNA沉默
Synthesis of the Intermediate for Prothioconazole被引量:1
2018年
[Objective] The paper was to study the synthesis technology of the intermediate for prothioconazole: 1-chloro-1-chloroacetyl-cyclopropane. [Method] With 2-acetylbutyrolactone as the raw material, 3,5-dichloro-2-pentanone was synthesized by chlorination and hydrolysis, and1-chloro-1-chloroacetyl-cyclopropane was synthesized by further cyclization and chlorination. [Result] The optimized synthetic process was determined by optimizing reaction conditions of each step. The overall yield of four-step reaction was 76.7%, and the product was verified by1 H NMR and13 C NMR. [Conclusion] The chlorinated product of 2-acetylbutyrolactone was directly hydrolyzed in acid solution without separation, and the final product was obtained by chlorination of cyclization product in the presence of special catalyst methanol. The whole process was smooth and the yield of the reaction was high, with high value for industrial application.
Wang Tao
关键词:植物学病虫害预防措施
小麦热激蛋白60(HSP60)基因的克隆与原核表达(摘要)(英文)被引量:2
2010年
[目的]构建小麦热激蛋白60(HSP60)基因的原核表达载体,并在E.coli中进行高效表达。[方法]根据GenBank中收录的小麦HSP60基因序列设计合成1对引物P1/P2,利用RT-PCR方法从小麦RNA中扩增小麦HSP60基因,应用基因重组技术构建pGEX-4T-1-HSP60表达载体,将构建好的小麦HSP60基因原核表达载体pGEX-4T-1-HSP60转化至大肠杆菌表达菌株E.coliBL21感受态细胞。[结果]对重组质粒进行酶切分析及序列测定鉴定正确后,与GenBank中收录的小麦HSP60基因序列比对分析,同源性达100%。在IPTG诱导下获得了目的蛋白,所表达的GST-HSP60融合蛋白分子量约为90kD。蛋白质电泳(SDS-PAGE)结果表明,表达的蛋白条带与预期大小一致。[结论]成功构建了pGEX-4T-1-HSP60的原核表达载体,在E.coliBL21中高效表达了HSP60蛋白,为进一步研究该蛋白的功能及其作用机制奠定了基础。
李芳芳王媛媛刘国富曹雪松
关键词:HSP60基因克隆原核表达
植物基因沉默的研究进展被引量:5
2010年
植物抗病毒机制是目前研究的热点.在长期的进化过程中,植物形成了一系列复杂有效的防御机制来抵御、破坏病原物的侵染.近年来,基因沉默作为一个重要的细胞内防御外源核酸的机制,越来越受到科学家的重视.对这一领域的研究不仅能够了解基因沉默的机理,并且可以为利用该机制构建抗病毒转基因植物提供理论指导和技术支持.
田野曹雪松
关键词:基因沉默RNA沉默
大麦黄矮病毒运动蛋白核定位信号对PVX病毒运动的影响被引量:3
2012年
应用马铃薯X病毒(PVX)载体研究大麦黄矮病毒运动蛋白(BYDV-MP)核定位信号对PVX病毒运动的影响。我们将BYDV-MP克隆到PVX改造载体pGR107中,同时用GFP作为指示蛋白,研究BYDV-MP对异源病毒PVX系统运动的影响。侵染烟草发现BYDV-MP能够在PVX载体中表达并能加强病毒的系统侵染;将PVX编码系统运动蛋白25kD基因进行缺失突变,重复上述试验发现BYDV-MP能够补偿PVX系统运动;将BYDV-MP的N端的第五、六位氨基酸和第七位氨基酸进行替换突变,侵染烟草发现BYDV-MP的N端的第五、六位氨基酸突变不能完全抑制PVX系统运动,但是可以延迟并减弱PVX系统运动;BYDV-MP的N端的第七位氨基酸突变能够完全抑制PVX系统运动。
杨纪君刘国富申永梅霍晓辉曹雪松
关键词:系统侵染马铃薯X病毒
Tracking Survey of Immune Effects of Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome (HP-PRRS) in Changping District, Beijing City被引量:2
2017年
The epidemiology of highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome( HP-PRRS) in Changping District,Beijing City was investigated from 2010 to 2015. Through statistics of vaccine,immune procedure and antibody levels,the epidemic prevention effect of HP-PRRS in Changping District was scientifically assessed.
Xing GuodongLv YanqiuQiu HailianGao XiaoboZhang YichiWang YueweiKang Xiaojie
关键词:PATHOGENICPORCINEREPRODUCTIVERESPIRATORY
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