国家自然科学基金(30872601)
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
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- 相关机构：第三军医大学新桥医院第二军医大学解放军第187医院更多>>
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- 兔退变椎间盘中BNIP3的免疫组织化学研究
- 2012年
- 目的探讨兔退变椎间盘中BNIP3蛋白的表达情况。方法建立兔椎间盘穿刺退变模型,分别培养2、4、8周后对目的椎间盘进行组织HE染色、番红O染色及BNIP3免疫组织化学染色,与正常椎间盘随机对照,检测椎间盘退变程度及BNIP3蛋白表达情况。结果成功建立兔椎间盘退变模型,随椎间盘退变程度加重,BNIP3蛋白在中央髓核组织中的阳性表达逐渐增强。结论兔椎间盘退变过程中,BNIP3蛋白表达增强诱导髓核细胞死亡增加。
- 刘杰彭娜王建
- 关键词：椎间盘退变BNIP3免疫组织化学
- 青少年特发性脊柱侧凸柔韧性影响因素分析及仰卧侧屈角度的预测被引量：6
- 2010年
- 目的分析青少年特发性脊柱侧凸柔韧性影响因素,探讨预测指标,初步建立仰卧侧屈位Cobb角角度的预测模型。方法通过对青少年特发性脊柱侧凸150例患者(包括胸椎侧凸和胸腰段/腰椎侧凸共216个)的站立位脊柱全长正位X线片和仰卧侧屈位X线片资料进行回顾性研究,用仰卧侧屈位X线片矫正率作为柔韧性指标,与站立位冠状面Cobb角、年龄、性别、Risser征、是否主侧凸和侧凸位置6个指标进行Pearson或Spearman相关分析及多元线性回归,筛选相关因素;采用同样方法 ,分析6个指标与仰卧侧屈Cobb角的关系。结果站立位冠状面Cobb角(P<0.01)和侧凸位置(P<0.01)与柔韧度存在明显线性回归关系。站立位冠状面Cobb角(P<0.01)、侧凸位置(P<0.01)和是否主侧凸(P<0.01)与仰卧侧屈Cobb角存在明显的线性回归关系。对青少年特发性脊柱侧凸,站立位冠状面Cobb角每增加10°,柔韧度约减少8%,胸椎侧凸柔韧性平均比胸腰段/腰椎侧凸低10%。站立位冠状面Cobb角>45°的胸椎次侧凸和>50°的胸腰段/腰椎次侧凸,成为结构性侧凸几率较大。结论站立位冠状面Cobb角和侧凸位置是显著影响青少年特发性脊柱侧凸柔韧度的因素,实验探讨了1种预测仰卧侧屈Cobb角角度的简单方法 ,解决了临床实际问题。
- 陈自强谢杨徐瑾王传锋杨长伟赵颖川张晶涛易红蕾李明
- 关键词：青少年脊柱侧凸柔韧性仰卧位
- 兔退变椎间盘中髓核细胞凋亡与BNIP3基因表达的意义被引量：4
- 2010年
- 目的髓核细胞凋亡可能与髓核组织代谢障碍产生缺氧,导致BNIP3基因表达有关。通过观察兔退变椎间盘中髓核组织的细胞密度、细胞凋亡率及BNIP3的表达,为进一步了解髓核细胞凋亡机制提供实验依据。方法健康3月龄雄性新西兰大白兔30只,体重(2.3±0.2)kg,随机分为实验组(n=20)及对照组(n=10)。实验组大白兔采用针刺L3、4、L4、5及L5、6椎间盘制备椎间盘退变模型;对照组仅暴露椎间盘后缝合。术后4、8周通过MRI检查评价椎间盘退变情况,采用组织学观察和TUNEL法检查椎间盘髓核组织中凋亡细胞,用免疫组织化学染色法检测兔椎间盘髓核细胞BNIP3的表达。结果 MRI检查示实验组术后4、8周椎间盘髓核信号强度呈逐渐降低趋势。根据Pfirrmann分级标准,实验组术后4、8周椎间盘退变分级比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。组织学观察及TUNEL检查示:对照组椎间盘髓核中细胞密度高,可见少量散在的凋亡细胞;实验组术后4、8周时椎间盘髓核组织内细胞密度逐渐降低,可见较多凋亡细胞。各时间点实验组细胞密度、TUNEL染色阳性细胞率与对照组比较,以及实验组各指标两时间点间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组椎间盘髓核组织细胞中无BNIP3表达;实验组术后4、8周椎间盘髓核组织细胞中BNIP3表达逐渐增多,BNIP3染色阳性细胞率分别为13.45%±1.16%、32.00%±1.82%,BNIP3灰度值分别为194.32±4.65、117.54±2.11,各时间点间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论椎间盘退变与髓核组织中细胞密度下降有关,细胞凋亡是椎间盘髓核细胞减少的原因之一,BNIP3参与了椎间盘髓核细胞凋亡。
- 曾顺福刘杰王建
- 关键词：椎间盘退变髓核组织细胞凋亡BNIP3MRI
- 营养剥夺诱导髓核细胞Bcl-2/腺病毒干扰蛋白3表达及线粒体转位的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的通过营养剥夺模拟体内髓核细胞退变微环境,检测Bcl-2/腺病毒干扰蛋白3(Bcl-2/adenovirusE1B 19-kDa-interacting protein 3,BNIP3)表达及线粒体转位情况,为进一步探索髓核细胞退变死亡机制提供实验依据。方法成年清洁级SD大鼠2只,雌雄不限,体重150～200 g。体外分离获取鼠尾椎问盘髓核细胞,将传代后细胞分别置入正常环境(对照组:L-DMEM培养基、10%FBS、21%O_2)和营养剥夺环境(实验组:DMEM无糖无血清培养基、1%O_2)培养24、48、72 h后,实时荧光定量PCR、细胞免疫荧光染色及Western blot检测BNIP3基因及蛋白表达,流式细胞仪检测凋亡率及线粒体膜电位。结果实时荧光定量PCR、细胞免疫荧光染色及Western blot检测显示对照组细胞低表达BNIP3;实验组随培养时间延长,BNIP3表达呈上升趋势,且BNIP3与线粒体相结合;除培养后24 h实验组BNIP3基因表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各时间点实验组BNIP3基因及蛋白表达与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测显示,对照组细胞凋亡率较低,且细胞保持较高的线粒体膜电位;而实验组随培养时间延长细胞凋亡率增加、线粒体膜电位降低,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论营养剥夺可能通过诱导BNIP3表达增加并结合线粒体导致线粒体功能障碍,最终导致髓核细胞死亡。
- 刘杰彭娜曾顺福陆焱王建周跃
- 关键词：髓核细胞线粒体
- 营养剥夺诱导髓核细胞凋亡与BNIP3蛋白表达上调被引量：3
- 2011年
- 目的通过营养剥夺（低氧-无糖-无血清）诱导髓核细胞凋亡，检测髓核细胞线粒体蛋白BNIP3（bcl-2／AdenovirusE1819一kdProtein—Interacting Protein3）表达。方法体外分离培养大鼠尾椎间盘髓核细胞，传代至P1代后将细胞分为正常对照组：DMEM／L培养基（1000nag葡萄糖／L）、10％胎牛血清、21％O2；实验组：DMEM无糖培养基、无血清、1％02；分别将两组细胞培养0、24、48、72h后，免疫荧光检测BNIP3蛋白表达并定位、流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位。结果免疫荧光检测显示正常对照组细胞低表达BNIP3，定位于胞质且未结合线粒体，实验组显示随培养时间延长，BNIP3表达呈上升趋势，在72h明显增加，共定位发现BNIP3主要分布于胞质，并与线粒体相结合；流式细胞仪检测发现正常对照组细胞凋亡率为（1．02±0．21）％，实验组细胞凋亡率明显增加（P〈0＋05），分别为（4．22±0．34）％、（7．51±2．33）％、（19．93±2．58）％，线粒体膜电位结果显示实验组24、48、72h线粒体膜电位均不同程度降低，分别为（90．23±1．32）％、（87．30±2．21）％、（82．63±2．91）％，均显著低于正常对照组（94．21±3．96）％（P〈0．05）。结论营养剥夺可能通过诱导BNIP3表达增加并结合线粒体导致髓核细胞凋亡。
- 刘杰陆焱周跃王建
- 关键词：髓核细胞脱噬作用BNIP3线粒体
