广东省医学科学技术研究基金(A2011632)
- 作品数：3 被引量：10H指数：3
- 相关作者：蒋茂林田超黎建欣曹正国董晓程更多>>
- 相关机构：汕头大学安徽医科大学附属省立医院中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PIWIL2在人膀胱移行细胞癌肿瘤干细胞样细胞中的表达及意义被引量：3
- 2011年
- 目的研究P1WIL2在人膀胱癌肿瘤于细胞样细胞（CSLC）中的表达和意义，探讨PIWIL2化靶向肿瘤干细胞治疗中的作用。方法用无血清悬浮培养法从人膀胱移行细胞癌细胞株BIU-87中分离扶得悬浮细胞球，流式细胞仪检测细胞表面分子标志CDl33和CD44的表达，免疫磁珠分选系统分离CDl33＋C1）44＋细胞；分刖采用Transwell小室侵袭实验、膜联蛋白／碘化丙锭双标流式细胞术、半定量逆转录聚合随链反应（RT—PCR）检测CSLC的体外侵袭能力、凋亡率和PIWIL2 mRNA的表达。结果BIU-87细胞可在无血清培养攮小形成可悬浮生K、稳定传代的肿瘤干细胞样细胞球。与贴壁的BIU-87细胞相比，CSLC高表达CDl33和CD44，具仃更强的体外侵袭力、较低的凋亡率，P1WIl2mRNA在CSLC的表达也显著高于BIU-87细胞。结论采用尤血清悬浮培养法从人膀胱移行细胞癌细胞株中分离获得的CSLC，具有自我更新平和多分化的能力，高懂表达PIWIL2。
- 曾正国田超蒋茂林董晓程吴宝国黎建欣黄洪才
- 关键词：膀胱肿瘤
- PIWIL2在人类膀胱尿路上皮癌中的表达及其功能研究被引量：3
- 2012年
- 目的研究PIWIL2在人类膀胱尿路上皮癌（BTCC）中的表达及siRNA对人类膀胱癌细胞PIWIL2表达的影响。方法采用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测BTCC46例、腺性膀胱炎21例、癌旁组织17例、正常膀胱组织14例中PIWII．2mRNA的表达；设计合成针对PIWIL2的3个特异性siRNA，转入人类膀胱癌BIU-87细胞，分别采用四甲基偶氮唑蓝、DNA原位末端标记法、RT-PCR和Westernblot检测siRNA对BIU．87细胞生长抑制率（IR）、凋亡指数（AI）和PIWIL2mRNA及其蛋白表达的影响。结果BTCC组织中PIWIL2mRNA的表达率为76．08％（35／40），均显著高于腺性膀胱炎组织f42．86％（9／21）]、癌旁组织[41．17％（7／17）]和正常膀胱组织[7．14％（1／14）]（P=0．008，P：0．010，P：0．000）。BTCC组织中PIWIL2的高表达与肿瘤淋巴结转移、病理分级均密切相关。siRNAI一3组细胞的IR[（37．52±8．84）％、（64．36±9．64）％、（62．94±8．43）％]和AI[（26．18±5．42）％、（38．75±6．19）％、（40．02±5．64）％1均分别显著高于对照组[（1．97±0．02）％、（3．35±0．47）％]（均P=0．000），PIWIL2mRNA及其蛋白表达水平均显著低于对照组；其中siRNA2、3组细胞的IR、AI和对PIWIL2表达的抑制作用均显著高于siRNA1组。结论PIWIL2在BTCC中的高表达，提示其与膀胱癌的发生、发展密切相关；体外转录合成的siRNA可抑制BIU一87细胞PIWIL2的表达，诱导肿瘤细胞凋亡，从而抑制肿瘤细胞生长，提示PIWIL2可作为膀胱肿瘤基因治疗的重要靶点。
- 曹正国田超蒋茂林吴奎黎建欣吴宝国黄洪才
- 关键词：SIRNA膀胱肿瘤
- 人膀胱癌组织中肿瘤干细胞样细胞的分离培养及PIWIL2表达被引量：4
- 2012年
- 目的从人膀胱移行细胞癌(BTCC)组织中分离培养肿瘤干细胞样细胞(CSLC),鉴定其生物学特性,并研究PIWIL2在CSLC中的表达和意义。方法收集12例不同临床分期BTCC患者组织标本,通过酶消化和原代培养相结合等方法处理,采用无血清悬浮培养法分离培养获得含CSLC的悬浮细胞球,流式细胞仪检测细胞表面分子标志CD133和CD44的表达,免疫磁珠分选系统分离CD133+CD44+细胞;采用半定量逆转录聚合酶链反应检测PIWIL2mRNA在CSLC中的表达;裸鼠皮下接种CS-LC,观察其成瘤能力。结果成功地从人膀胱癌组织分离培养获得可悬浮生长、稳定传代的CSLC,CSLC高表达CD133和CD44,裸鼠皮下接种1×104、1×105个CSLC均可全部成瘤,PIWIL2mRNA在CSLC的表达显著高于正常膀胱组织细胞。结论采用无血清悬浮培养法成功从人膀胱癌组织中分离获得CSLC,具有肿瘤干细胞特性,能高度表达PIWIL2,为靶向肿瘤干细胞的治疗提供了实验依据。
- 曹正国田超蒋茂林董晓程黎建欣肖恒军
- 关键词：肿瘤干细胞膀胱肿瘤
