四川省教育厅资助科研项目(007ZZ027)
- 作品数：1 被引量：9H指数：1
- 相关作者：石恬张博陈杨王小玉郭万柱更多>>
- 相关机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 联合表达PPV VP2和PCV2 ORF2基因的重组PRV的构建被引量：9
- 2009年
- 将包含有完整阅读框架的PPV VP2基因(1740 bp)和PCV2 ORF2基因(750 bp)插入真核表达载体pPI-2.EGFP中,构建了重组质粒pPI-2.EGFP.VP2.ORF2。采用脂质体介导法将重组质粒的DNA和PRV SA215株的DNA共转染Vero细胞,转染后20 h出现带荧光的空斑,挑斑纯化后繁殖,并收获病毒液。PCR和免疫荧光试验结果证实,成功构建了重组病毒,将其命名为PRV SA215(D1)株。细胞培养特性试验结果显示,重组病毒可以在Vero、MDBK、ST和IBRS-2等多种细胞上增殖,在Vero细胞上的增殖效价为1×106PFU。分别以1×105PFU/头、1×104PFU/头剂量接种28日龄仔猪,结果显示,免疫仔猪的PPV、PCV2抗体水平均逐渐升高,并分别从接种后第14 d和21 d开始,PPV、PCV2抗体转为阳性。此结果进一步佐证了重组PRV SA215(D1)株已构建成功。
- 徐志文郭万柱陈杨石恬朱玲王印张博王小玉
- 关键词：猪细小病毒伪狂犬病病毒
