中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(ywf-td-1)
- 作品数：3 被引量：28H指数：2
- 相关作者：冯冲潘登科龙川张莉周艳荣更多>>
- 相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业大学军事医学科学院更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家高技术研究发展计划中国农业科学院院长基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 运输温度与时间对猪孤雌胚胎发育的影响被引量：2
- 2009年
- [目的]比较不同运输温度与时间对猪孤雌胚胎发育的影响,确立猪克隆胚胎的最佳运输温度与时间。[方法]研究不同温度(37、38、39℃)对孤雌胚胎卵裂率、囊胚率的影响;不同时间(2、3、4 h)对孤雌胚胎卵裂率、囊胚率的影响。[结果]培养3 h后,在39℃运输时,孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率与37℃、38℃的卵裂率和囊胚率相比,差异显著(P<0.05);培养3 h后,孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率与培养2 h、4 h的卵裂率和囊胚率相比,差异显著(P<0.05)。[结论]在39℃,3 h内进行孤雌胚胎的运输,能获得较高的卵裂率、囊胚率。
- 张卫红闫军冯冲龙川张兆旺潘登科
- 关键词：运输时间孤雌胚胎卵裂率囊胚率
- 影响奶牛体细胞手工克隆技术因素的研究
- 2009年
- 旨在优化奶牛的手工体细胞克隆技术方案,本试验以牛卵母细胞为材料研究了2个半卵不同粘合交流电压、重构胚不同激活方法和不同的COCS采集方法对奶牛手工体细胞克隆胚发育的影响。结果表明,(1)降低2个半卵粘合交流电压能显著提高其随后的卵母细胞融合率(P<0.05);(2)A23187+6-DMAP组激活的无透明带重构胚分裂率和囊胚率显著高于Ionomycin+6-DMAP组(P<0.05);(3)真空蠕动泵抽吸法和刀片切割法获得的卵母细胞总数显著高于注射器抽吸法(P<0.05),而切割法获得的1和2级卵母细胞百分数显著高于其它2种方法(P<0.05)。因此,采用真空蠕动泵抽吸法获得COCS,用较低的粘合交流电压进行半卵粘合,采用A23187+6-DMAP激活法进行融合后的激活能显著提高奶牛手工体细胞克隆效率。
- 张诺杜卫华郝海生王栋武珅朱化彬
- 关键词：体细胞克隆
- 体细胞核移植生产转ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1克隆猪被引量：26
- 2009年
- 转ω-3脂肪酸去饱和酶基因猪在优质猪培育及研究ω-3不饱和脂肪酸预防心血管和癌症疾病中的作用方面有着重大的应用．本研究首次通过体细胞核移植制备了转线虫ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1猪．将sFat—1基因转染到大白猪胎儿成纤维细胞，获得转基因阳性细胞克隆，然后以转基因细胞为核供体、体外成熟的猪卵母细胞为核受体构建克隆胚胎，胚胎体外培养或进行移植．先后移植了1889枚1-4细胞期克隆胚胎到10头受体母猪的输卵管内，28天B超检测9头受体母猪妊娠（90％），7头妊娠足月（70％）分娩产下21头仔猪，体细胞克隆猪的效率为1．1％（出生仔猪／移植胚胎）．体细胞克隆猪效率的提高，主要是对克隆胚胎的移植环节进行了改进，比较了受体母猪排卵状况对胚胎移植效率的影响．当受体母猪卵泡发育处于即将排卵或正在排卵阶段，能够获得较高的妊娠率和妊娠足月率（100％），而排卵后移植妊娠足月率为0％．对健康存活15头克隆猪进行了PCR和Southern检测，证实13头为转基因猪，转基因阳性率为87％．RT—PCR检测13头转基因猪，12头表达sFat—1基因．以上结果表明，利用优化的体细胞转基因结合核移植技术，可以成功地批量生产转sFat-1基因的克隆猪．
- 潘登科张莉周艳荣冯冲龙川刘晓董恩球王树臣万荣张健陈红星
- 关键词：体细胞核移植转基因猪
