国家科技重大专项(2009ZX08009-090B)
- 作品数：7 被引量：29H指数：5
- 相关作者：谢宗铭董永梅陈受宜李月李有忠更多>>
- 相关机构：新疆农垦科学院中国科学院遗传与发育生物学研究所新疆农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项新疆生产建设兵团博士基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 新陆早33号体细胞植株再生技术研究被引量：5
- 2014年
- 以模式品种Coker 312为对照研究新疆主栽陆地棉品种新陆早33号的体细胞胚胎发生和植株再生。研究表明,2个品种的下胚轴均能在0.05mg·L-1 2,4-D+0.1mg·L-1 KT的激素组合诱导下获得初生愈伤组织,然后在无激素诱导条件下获得胚性愈伤和体细胞胚。新陆早33号与Coker 312在MSB3培养基上最早体细胞胚胎发生时间分别为60d和87d,胚胎分化率分别为67.2%和61.4%。新陆早33号在180d获得根系发育良好的再生幼苗,而Coker 312需要210d。应用此法,成功获得新陆早33号的体细胞胚和再生植株,且其胚胎发生能力和再生效率均优于对照材料。
- 马盼盼谢宗铭李全胜田又升李有忠
- 关键词：棉花新陆早33号体细胞胚胎植株再生
- 棉花转录因子GhGT30基因的克隆及转录功能分析被引量：11
- 2013年
- Trihelix转录因子广泛参与植物生长发育、非生物胁迫应答等一系列生理活动。本研究根据表达序列标签(EST)电子拼接,结合cDNA末端快速扩增技术(RACE)和RT-PCR技术,从棉花中克隆了一个cDNA全长为2210bp的新基因,其开放读码框为2025bp,编码一个675氨基酸的蛋白,分子量约76.26kD,等电点为6.21。SMART蛋白结构预测发现,该基因在N端和C端各有一个trihelix结构域,属于GT-2型trihelix转录因子,被命名为GhGT30(GenBank登录号为JQ013098)。氨基酸序列比对显示,该蛋白和其他高等植物的GT蛋白有较高的同源性。进化树分析表明,GhGT30基因和大豆GmGT-2B基因处在同一进化树分支。拟南芥原生质体中瞬时表达分析表明,GhGT30主要定位于细胞核中。实时荧光定量PCR分析表明,该基因在棉花的花、纤维(12DPA)中的表达量明显高于根、茎、叶及胚珠(0DPA),同时,该基因对干旱、高盐、低温及脱落酸(ABA)等处理都有一定程度的响应,推测该基因对棉花非生物胁迫的调控起重要作用。
- 李月孙杰陈受宜谢宗铭
- 关键词：棉花非生物胁迫
- 新疆早熟棉3个主栽品种的体细胞胚胎发生及植株再生被引量：5
- 2013年
- 以新疆主栽早熟棉品种新陆早13、新陆早26、新陆早33为试材,通过不同质量浓度的激素组合成功诱导并获得体细胞胚,进一步培养再生成苗。结果表明,3种培养基均能有效诱导愈伤组织,但以0.1mg/LKT和0.1mg/L 2,4-D配合为最佳;愈伤组织在MSB+30g/L Glucose+2.5g/L Phytagel+0.02mg/LIAA+0.1mg/L ZT或MSB+30g/L Glucose+2.5g/L Phytagel+0.15g/L活性炭培养基上易获得胚性愈伤组织;新陆早13号、新陆早26号、新陆早33号在MSB+30g/L Glucose+2.5g/L Phytagel+0.02mg/LIAA+0.1mg/L ZT培养基上分化率分别为32.5%、20.6%、57.5%;在MSB+30g/L Glucose+2.5g/LPhytagel+0.15g/L活性炭培养基上分别为26.2%、25%、55%;培养获得的胚性愈伤组织在MSB(去掉NH4NO3)+1.0g/L Gln+0.5g/L Asn的培养基上生长发育成再生植株。3个试验材料在8个月内都能成功获得再生苗。
- 李有忠谢宗铭董永梅田琴司爱君马盼盼
- 关键词：棉花胚胎发生植株再生
- SSR分子标记辅助选择转育棉花胞质雄性不育系的回交亲本被引量：8
- 2011年
- 将常规育种选择方法和分子标记技术相结合,对用于回交转育棉花胞质雄性不育系的33个早熟陆地棉品系进行筛选。用9个主要性状观察值和260对SSR引物扩增结果均可将33个品系聚为2大类4亚类,这些亚类之间的表型特征差异较明显。从基于分子标记结果划分出的A1、A2、B1、B2亚类中挑选出关键性状综合表现较好的优良品系,并参照主要性状观察值的聚类结果剔除表现型相似的品系,筛选出8个典型代表优良品系,用以进一步回交转育棉花胞质雄性不育系。
- 相吉山谢宗铭董永梅田琴李有忠司爱君
- 关键词：SSR分子标记回交转育聚类分析
- 棉花GhGT-2转录因子的克隆及其功能分析被引量：4
- 2015年
- 【目的】棉花是重要的纤维作物,其生长常遭受非生物逆境危害,严重影响棉花的生长和产量。Trihelix转录因子在植物抵御各种逆境胁迫中扮演重要作用。克隆棉花Trihelix转录因子基因并分析其表达特性和功能,为最终利用转基因手段改良棉花抗逆性奠定基础。【方法】通过BLAST分析比对,从棉花EST数据库中获得1个高度同源基因,通过基因序列分析,发现其属于Trihelix转录因子GT-2亚家族,命名为GhGT-2。以棉花叶片总RNA为模板,根据EST序列设计引物,利用RT-PCR结合RACE技术,获得GhGT-2的编码序列。使用MEGA5对蛋白序列及其同源序列进行多序列比对分析,并构建同源物种间系统进化树,通过SMART网站(http://smart.emblheidelberg.de/)进行蛋白结构预测。以陆地棉品种新陆早26号为研究材料,在棉花15 d苗龄时(一对真叶期),分别对其植株进行非生物胁迫和ABA处理0、1、3、6和12 h,然后采集相应时段棉苗叶片。另外采集同一品种棉花的不同发育时期的根、茎、叶、花、开花后当天胚珠以及开花后12 d(12 days post anthesis,DPA)纤维等不同组织样品,利用实时荧光定量PCR方法分析GhGT-2在棉花不同组织间的表达差异及其在低温、干旱、高盐和ABA处理下的表达模式。将GhGT-2克隆至GFP表达载体pBI221,和GAL4 DNA结合结构域载体,在拟南芥原生质体中验证GhGT-2在细胞内的定位情况和转录激活活性。利用凝胶迁移试验(EMSA)检测DNA结合元件。【结果】克隆了棉花GhGT-2的cDNA全长序列。该基因cDNA全长1 579 bp,开放阅读框为1 428 bp,编码475个氨基酸的蛋白,推导编码蛋白质的分子量为54.07 kD,等电点为8.96。SMART蛋白结构预测发现,该蛋白含有2个Trihelix家族典型的SANT蛋白结合域。系统进化树分析表明,GhGT-2属于Trihelix转录因子GT-2亚家族,与拟南芥AtGTL1、白杨PtaGTL1亲缘关系最近。实时荧光定量PCR表明,GhGT-2在棉花的根、茎�
- 李月刘晓东谢宗铭董永梅武冬梅陈受宜
- 关键词：棉花非生物胁迫亚细胞定位转录激活
- 新疆陆地棉体细胞培养与植株再生研究现状分析
- 2015年
- 高效的棉花体细胞胚胎发生体系是以体细胞胚途径获得转基因棉花新品种的重要技术条件。本文主要综述了近年来新疆陆地棉体细胞胚胎发生的研究进展,分析影响棉花体细胞胚发生以及提高植株再生效率的主要因素。结合本单位的研究结果探讨新疆陆地棉体细胞培养过程中存在的主要问题,并对该技术的发展前景做了展望。
- 马盼盼田又升张国丽余航谢宗铭
- 关键词：陆地棉体细胞胚发生植株再生
- 棉花Trihelix转录因子GhGT29基因的克隆及功能分析被引量：7
- 2015年
- Trihelix转录因子在植物抵御各种逆境胁迫中扮演重要作用,克隆棉花Trihelix转录因子基因并分析其表达特性和功能,为最终利用转基因手段改良棉花抗逆性奠定基础。本文依据生物信息学分析,采用RT-PCR方法从陆地棉中克隆了一个Trihelix转录因子基因,命名为GhGT29(Gen Bank登录号:JQ013097)。该基因最大开放阅读框(ORF)为1092 bp,编码363个氨基酸,预测分子量为40.9 k Da,等电点为5.45。SMART蛋白结构预测发现,该蛋白含有1个Trihelix家族典型的SANT结构域。系统进化树分析表明,GhGT29属于Trihelix转录因子SH4亚家族,与拟南芥At SH4-like1、At SH4-like2亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果表明,GhGT29受高盐、干旱、低温胁迫和ABA诱导表达;GhGT29在陆地棉的根、茎、叶、花、开花后当天胚珠以及开花后12 d(12 DPA)纤维中均有表达,其中在花中表达量最高,在茎中表达量最低。利用拟南芥原生质体系统进行分析,结果显示GhGT29主要定位于细胞核中,并且具有转录激活活性。以上结果表明GhGT29基因可能参与棉花逆境信号通路中对抗逆功能基因表达的调控。
- 李月刘晓东董永梅谢宗铭陈受宜
- 关键词：棉花非生物胁迫亚细胞定位转录激活
