国家重点基础研究发展计划(2011CB504706)
- 作品数：8 被引量：12H指数：2
- 相关作者：王化磊杨松涛赵丽丽夏咸柱齐瑛琳更多>>
- 相关机构：军事医学科学院吉林大学中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 具备中和中东呼吸综合征冠状病毒活性的单克隆抗体的制备
- 2014年
- 目的制备并鉴定对中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)具有中和活性的单克隆抗体,为进一步开展MERS-CoV感染与免疫保护机制研究,以及发展诊断与治疗手段奠定基础。方法 MERS-CoV S蛋白受体结合区与人IgG Fc片段融合表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫后小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,通过ELISA筛选出阳性克隆,随后通过多次亚克隆筛选出稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,制备单抗腹水并进行抗体效价测定及亚类鉴定;通过MERS-CoV假病毒及活病毒中和试验筛选出中和单抗。结果获得了10株能够稳定分泌抗原特异性单抗的杂交瘤细胞株。制备的腹水单抗亚类均为IgG1;其中7株单抗抗体ELISA效价达到10 000以上,并有1株单抗对MERS-CoV具有良好的中和活性。结论本研究获得了1株对MERSCoV具有良好中和活性的单克隆抗体。
- 于虹邱洪杰潘婷李琳唐健郭彦孙世惠寇志华赵光宇周育森
- 关键词：单克隆抗体中和活性
- 小胶质细胞在病毒性中枢神经系统感染中的作用被引量：1
- 2012年
- 小胶质细胞是中枢神经系统中的免疫细胞,是中枢神经系统抵抗病原体入侵的第一道防线。当病原微生物进入脑组织后,小胶质细胞迅速做出反应,识别、吞噬病原微生物,呈递抗原和分泌多种生物活性物质。但是,小胶质细胞的过度活化又可诱发中枢神经系统免疫病理损伤或神经退行性病变。因而,具有生理和病理双重作用。本文就小胶质细胞在病毒感染性中枢神经系统疾病中的作用及其机制进行综述。
- 赵丽丽赵平森齐瑛琳梁红茹金宏丽梁萌王化磊杨松涛夏咸柱
- 关键词：小胶质细胞中枢神经系统病毒感染性疾病炎症反应
- 两株犬源狂犬病病毒街毒株全基因组序列测定与分析被引量：2
- 2011年
- 目的对2株犬源狂犬病病毒街毒株全基因组测序,了解国内狂犬病病毒的流行和变异情况。方法采用乳鼠脑内接种方法分离2株天津地区狂犬病病毒街毒株,RT-PCR扩增病毒DNA覆盖全基因组12个相互重叠的基因片段,PCR产物平端克隆后进行全基因组核苷酸序列测定,然后对其分子变异和进化特点进行分析。进行两分离株的序列相似性、氨基酸同源性、主要功能位点的变异比较和种系发生分析。结果 TJD04和TJD05两株狂犬病病毒全基因组长均为11 924 nts,全基因组序列的组成和结构均符合弹状病毒科狂犬病病毒属的特征。病毒基因组由5个编码区组成,基因起始位点和终止位点高度保守,氨基酸编码长度未发生变异,5个编码蛋白序列较少发生变化,仅有个别主要功能位点发生变异,且大部分变异均属于无意义沉默突变。多序列相似性比较和种系发生分析显示,两株病毒均属于基因1型,N基因与全基因进化树保持一致,与中国犬源狂犬病病毒BD06同源性最高(99.6%),进化关系近,并具有较为独特的中国地域特点。结论两天津株狂犬病毒可能是自然界中固有的狂犬病病毒街毒株。
- 齐瑛琳金宏丽赵丽丽王化磊赵平森付玉涂长春杨松涛夏咸柱
- 关键词：狂犬病病毒全基因组
- 狂犬病病毒感染免疫反应研究进展被引量：3
- 2011年
- 狂犬病病毒感染机体后可引起严重的脑炎,病死率几乎为100%。暴露前预防免疫和及时的暴露后免疫可有效阻止脑炎的发生,一旦出现狂犬病临床症状后,几乎所有的治疗方法均无效。病毒感染机体后,激发机体产生先天性和获得性免疫应答,而在病毒进入中枢神经系统前,机体产生的免疫应答不足可能是免疫保护失败的原因之一。本文综述了机体对狂犬病病毒感染与疫苗免疫产生的免疫反应。
- 金宏丽王化磊齐瑛琳赵平森赵丽丽梁萌杨松涛夏咸柱
- 关键词：狂犬病病毒免疫反应免疫抑制
- microRNA-200家族在狂犬病病毒感染鼠脑组织中的表达及其靶基因预测被引量：1
- 2013年
- 目的检测microRNA-200(miR-200)家族在感染狂犬病病毒鼠脑中的表达水平,预测相关靶基因,为miR-200家族靶基因的生物学验证提供数据支持,为研究miR-200家族在狂犬病病毒感染过程中的调节机制和生物学功能奠定理论基础。方法利用MicroRNA基因芯片技术检测miR-200家族在感染狂犬病病毒鼠脑组织中的表达水平,并对其进行qRT-PCR验证;利用TargetScan、MicroCosm Targets和miRarnada等3个数据库预测miR-200的靶基因,并对靶基因进行功能和信号转导通路富集分析。结果与对照组相比,miR-200在感染狂犬病病毒的小鼠脑组织中表达水平显著下降,预测的靶基因有3154个,靶基因主要参与细胞周期、细胞因子受体结合、细胞代谢、高分子代谢和生物学调节等生物学功能(P<0.01)。参与的信号通路主要有JAK-STAT信号通路、TCR信号传导通路、轴突引导、蛋白质泛素化、Wnt信号通路、TGF-β信号通路和癌症等信号通路(P<0.05)。结论 miR-200家族在感染狂犬病病毒的鼠脑组织中表达水平显著下降,预测的靶基因在相关免疫应答中起重要作用,也可能与狂犬病病毒的感染和致病性有关。
- 赵丽丽赵平森齐瑛琳杨玉蛟赵永坤郑学星王化磊王铁成黄耕高玉伟杨松涛夏咸柱
- 关键词：狂犬病病毒MICRORNA靶基因生物信息学
- 中东呼吸综合征冠状病毒假病毒系统的建立及其在中和抗体检测中的应用被引量：2
- 2014年
- 目的:为了避免中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)感染与中和试验中操作活病毒带来的生物安全隐患,构建只具有一次感染能力而无复制能力的MERS假病毒,建立MERS假病毒系统,并应用于中和抗体检测。方法:构建含有MERS-CoV S基因的重组质粒pcDNA3.1-MERS-S,与缺失Env基因、含有萤光素酶报告基因的HIV-1骨架质粒pNL4-3.Luc.RE共转染293T细胞,收获含有假病毒的上清;通过Western印迹、细胞感染实验和血清中和试验,确定是否包装出MERS假病毒,及是否能有效应用于细胞感染与中和试验。结果:MERS假病毒pMERS-S培养上清经Western印迹鉴定出相对分子质量为25×103的HIV-1 P24蛋白和相对分子质量为180×103的MERS-CoV S蛋白;与阴性对照假病毒pEnv-相比,pMERS-S能有效感染MERS-CoV敏感细胞系Huh-7,在感染细胞中产生荧光信号,感染细胞的假病毒量与产生的荧光信号呈明显的量效关系;在MERS假病毒中和试验中,pMERS-S能被MERS-CoV中和抗体中和而失去感染力,反映抗体对MERS-CoV的中和活性。结论:建立了不依赖于BSL-3高等级生物安全条件的MERS假病毒系统,并有效应用于中和抗体检测,为MERS-CoV疫苗、药物评价及病毒致病机制研究提供了良好的技术支撑手段。
- 李琳郭彦赵光宇于虹孙世惠潘婷唐健周育森樊卫平
- 关键词：S蛋白假病毒
- 重组人隐花色素蛋白Ⅰ的表达纯化及其在制备放疗保护剂中的应用
- 2015年
- 放疗是治疗肿瘤的最常用手段之一,为寻找能够保护肿瘤组织周边正常细胞的放疗保护剂,通过原核表达质粒的构建,利用大肠杆菌BL21(DE3)诱导并成功表达出人隐花色素蛋白Ⅰ(h CRY1)。采用包涵体溶解、梯度透析复性、镍柱亲和纯化以及超滤浓缩的蛋白纯化工艺,1 L菌液可收获10-15 mg纯度超过95%的h CRY1。在Ha Ca T细胞中通过细胞DNA损伤修复中所产生的H2A.X foci荧光强度的定量检测,验证了纯化所得的h CRY1具有射线损伤防护功能;通过对经过h CRY1以及对照蛋白处理后的细胞凋亡情况的检测排除了h CRY1的毒副作用对H2A.X foci荧光强度的影响。这些为进一步研究h CRY1提供了便利条件,也为将h CRY1开发成为新的放疗保护剂提供了理论基础。<正>1中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室,北京1001012安徽大学生命科学学院,安徽合肥2306013中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室,广东广州5100604四川省肿瘤医院·研究所肿瘤内科,四川成都6140005广州达博生物制品有限公司广东省肿瘤靶向治疗新药研发企业重点实验室。
- 姚辰盛春姐刘冬高诗娟姜威余虹燕李建东陈慧明武娇祥潘长穿陈帅黄文林
- 关键词：生物节律包涵体DNA损伤免疫荧光
- 狂犬病病毒的功能蛋白研究进展被引量：4
- 2012年
- 狂犬病(Rabies)是由狂犬病毒(Rabies virus,RABV)引起的一种高度致死性中枢神经系统感染的疾病。RABV主要由5个功能蛋白组成,各个蛋白在致病性方面均发挥重要的作用。本文就狂犬病病毒各个功能蛋白的国内外研究进展进行综述,从而加深对于RABV致病性的了解。
- 梁红茹赵丽丽杨玉娇杨松涛王化磊夏咸柱
- 关键词：狂犬病病毒功能蛋白
