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江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目(2009-D-Ag18): 作品数：8 被引量：13H指数：2; 相关作者：贡成良曹广力薛仁宇彭景琨朱越雄更多>>; 相关机构：苏州大学更多>>; 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

家蚕hop基因的克隆及序列分析被引量：1: 2012年; JAK激酶HOP是JAK/STAT信号途径的重要组成成员,在信号传导中发挥重要作用。为研究家蚕的JAK/STAT途径,通过RT-PCR克隆家蚕的hop基因(Bmhop)的cDNA,序列测定结果显示:Bmhop开放读码框为1 924 bp,编码638个氨基酸残基;结构分析结果显示:BmHOP具CRD_FZ、Kringle、转膜区域和PKc超家族蛋白激酶催化结构域TyrKc,每个结构域均可形成特定的三级结构;基于基因芯片的数据分析结果显示:Bmhop在家蚕5龄第3天的睾丸、卵巢、头部、脂肪体、中肠、马氏管中均有表达,但表达水平较低;基于TyrKc结构域序列的进化分析指出:昆虫HOP并不完全按物种聚类,BmHOP单独形成1个分枝,HOP在进化过程有TyrKc结构域扩增和TyrKc结构域组合事件发生。本研究结果为探讨BmHOP在JAK/STAT信号途径中的作用方式以及hop基因进化提供新的线索。; 梁聪彭景琨曹广力薛仁宇贡成良; 关键词：家蚕 JAK/STAT信号通路基因克隆

家蚕SOCS-2基因的克隆与序列分析: 2012年; SOCS基因是JAK/STAT信号通路的负调节基因。为了了解家蚕SOCS基因(BmSOCS)的遗传变异与进化,通过电子克隆获得了SOCS cDNA基因序列,结果显示家蚕基因组中至少存在4种BmSOCS基因,BmSOCS-2基因存在可变剪接。通过RT-PCR从家蚕中扩增得到1个BmSOCS-2基因(BmSOCS-2A),测序结果表明,该792 bp片段含有完整的ORF,由4个外显子组成,编码263个氨基酸残基,分子量为28.8 ku。结构分析显示,BmSOCS-2A有5个α螺旋结构,存在典型的SH2结构域和SOCS结构域。基因芯片数据分析显示,BmSOCS-2在家蚕雌雄性腺组织中表达量最高。进化分析表明,SOCS以不同种类聚类在一起,表明各种SOCS基因家族在各昆虫物种形成前就已产生。; 杨李阳彭景琨薛仁宇曹广力贡成良; 关键词：家蚕电子克隆

家蚕drk基因的克隆及生物信息学分析被引量：1: 2012年; 受体下游激酶(downstream of receptor kinases,DRK)是JAK/STAT信号途径的重要组成成员,在信号传导中发挥重要作用。为了研究家蚕的JAK/STAT途径,本研究通过RT-PCR克隆了家蚕的drk基因(Bmdrk)的cDNA,序列测定结果显示:Bmdrk开放读码框为639 bp,编码212个氨基酸残基。结构分析显示:BmDRK由SH3和SH22种结构域形成了SH3-SH2-SH3的结构形式。基于SH3-SH2-SH3结构域序列的进化分析指出昆虫DRK蛋白序列高度同源,结构与基本功能相似。DRK在进化过程有侧翼1个SH3结构域丢失的事件发生。研究结果为探讨Bmdrk在JAK/STAT信号途径中的作用方式以及drk基因进化提供了新的线索。; 王洋彭景琨曹广力薛仁宇贡成良; 关键词：家蚕 JAK/STAT信号通路基因克隆

感染茶尺蠖的重组家蚕核型多角体病毒的构建: 目前防治茶尺蠖的方法主要是化学方法,但化学杀虫剂毒杀害虫的同时也毒杀其天敌并导致农药残留,而生物方法体现出独特的优越性。为了解决茶尺蠖饲养复杂而导致茶尺蠖核型多角体病毒（EoNPV）繁殖困难,通过Bac-to-Bac系统...; 郭睿刘卫星潘中华刘林彭景琨薛仁宇曹广力朱越雄贡成良; 关键词：BMNPV 重组病毒; 文献传递

家蚕JAK/STAT信号通路相关基因及对BmNPV感染应答初探: JAK/STAT信号通路是一条多种细胞因子共用的信号传导途径,其相关蛋白及基本功能在生物体中保守。本研究克隆、分析了家蚕JAK/STAT信号通路主要相关基因,主要包括BmSTAT,BmHOP,BmSOCS2,BmSOCS...; 张晓丽彭景琨马焕艳潘中华郑小坚曹广力薛仁宇贡成良; 关键词：家蚕 JAK/STAT通路 BMNPV; 文献传递

BmCPV多角体蛋白对异源蛋白的包埋: 为了探索家蚕质型多角体在体内对蛋白的包埋特性,对从从患病家蚕中肠纯化的BmCPV蛋白进行液相色谱-串联质谱分析,共鉴定了28种蛋白质,其中5种蛋白质BmCPV编码,23种蛋白质来自宿主家蚕,显示宿主蛋白可以被包埋进BmC...; 张轶岭孟祥坤潘中华郑小坚曹广力薛仁宇贡成良; 关键词：家蚕质型多角体病毒多角体包埋串联质谱; 文献传递

家蚕同源异型结构域蛋白基因Bmvis的克隆及组织表达和亚细胞定位: 2011年; 同源异型结构域蛋白(homeobox,HOX)基因是对生物体的生长发育从时间和空间上进行调控的一类基因。Vis(vismay)属于同源异型结构域蛋白转化生长影响因子(transforming growth interacting factor,TGIF)家族成员,在脊椎动物的研究中表明TGIF是转化生长因子-β(transforming growth factor β,TGF-β)信号转导途径中的转录抑制子,但在果蝇(Drosophilamelanogaster)的研究中发现其是一种转录激活子。基于为探究家蚕(Bombyx mori)中vis基因的功能提供基础信息的目的,在电子克隆的基础上通过RT-PCR从家蚕5龄幼虫精巢cDNA中克隆了长度为847 bp的vis基因(Bmvis)片段(GenBank登录号:JF412700)。蛋白结构分析表明Bmvis在HOX结构域的螺旋区和TALE区段内高度保守,同时在HOX结构域外的C末端大约20个氨基酸也是高度保守的。进化分析显示昆虫的Vis与Achi(achintya)聚为一类,但Vis与Achi根据物种分类关系聚在一起。对Bmvis在家蚕5龄第3天幼虫组织中表达的RT-PCR检测显示其仅在精巢中表达。将Bmvis进行原核表达后获得抗Bmvis多克隆抗体,亚细胞定位显示Bmvis在细胞核和细胞质中均有表达,但主要分布在细胞核中。; 张瑶瑶曹广力薛仁宇贡成良; 关键词：家蚕蛋白结构多克隆抗体组织表达谱亚细胞定位

家蚕卵巢肿瘤基因Bmotu及其可变剪接被引量：3: 2011年; 已知卵巢肿瘤基因(ovarian tumor gene,otu)在果蝇(Drosophila melanogaster)卵巢发育过程中发挥极其重要的作用,该基因突变会扰乱卵子形成的正常过程。为探究家蚕(Bombyx mori)是否具有类似果蝇生殖发育相关基因otu的同源基因,以及基因存在的可变剪接形式,在电子克隆的基础上,应用RT-PCR从家蚕精巢组织中获得了4条不同长度的Bmotu cDNA片段(GenBank登录号:HQ831341,HQ831342,HQ999998,HQ831343),其中3条由于无义突变导致翻译提前终止;而从卵巢组织中仅获得了1条Bmotu cDNA片段,该片段序列与精巢中扩增的登录号为HQ831343片段序列的5'端相同。结果表明Bmotu基因存在可变剪接,且雌、雄之间的剪接方式可能存在差异。生物信息学分析发现Bmotu基因编码蛋白与果蝇Otu的结构类似,含有半胱氨酸蛋白酶结构域(Otu结构域)、Tudor结构域、脯氨酸基序。研究结果有助于进一步探讨家蚕生殖发育机制。; 薛高旭曹广力张鹏杰张瑶瑶薛仁宇贡成良; 关键词：家蚕生殖发育可变剪接

BmCPV多角体蛋白对异源蛋白的包埋被引量：2: 2011年; 为了解家蚕质型多角体病毒(BmCPV)的多角体蛋白对异源蛋白的包埋作用,将BmCPV的多角体蛋白基因克隆至昆虫细胞表达载体pIZT/V5-His,转染家蚕卵巢培养细胞(BmN)后通过吉欧霉素(zeocin)筛选获得稳定表达多角体蛋白的细胞株。倒置荧光显微镜观察发现,转化BmN细胞有轻度的病理变化,细胞质中有呈绿色荧光的多角体蛋白结晶,但从转化BmN细胞中纯化的多角体无明显的绿色荧光。以修饰型线性化家蚕杆状病毒BmPAK6感染稳定转化BmN细胞,96 h后纯化多角体,回复感染显示多角体裂解液能感染家蚕BmN细胞,表明BmCPV多角体蛋白能包埋BmPAK6。纯化的多角体及多角体裂解液均能用X-gal显色,表明BmPAK6表达的β-半乳糖苷酶也能被BmCPV的多角体蛋白包埋。研究结果可为获得具有多角体的重组杆状病毒以及开发利用质型多角体蛋白包埋异源蛋白的功能提供新的技术途径。; 张轶岭孟祥坤朱越雄曹广力薛仁宇贡成良; 关键词：家蚕质型多角体病毒多角体杆状病毒

JAK/STAT途径对家蚕杆状病毒感染应答的初探被引量：1: 2011年; 为了探讨家蚕抗病毒感染的免疫应答途径,通过非转座子介导将家蚕信号转导子及转录激活因子(STAT)基因表达盒(BmSTAT)导入家蚕卵巢培养细胞(BmN),经吉欧霉素(zeocin)筛选获得过表达BmSTAT的稳定转化BmN细胞。修饰型线性化家蚕杆状病毒Bm-BacPAK6感染结果显示:病毒感染后转化BmN细胞和正常BmN细胞的BmSTAT基因表达水平分别提高了32.70%和14.63%,表明家蚕JAK/STAT途径对杆状病毒感染有应答。比较转化BmN细胞和正常BmN细胞对杆状病毒感染的抵抗性,发现病毒对转化BmN细胞的感染比例低于正常BmN细胞,二者之间的感染率相差8.28～18.02个百分点;在感染病毒的转化BmN细胞中,β-半乳糖苷酶基因的表达水平比病毒感染正常BmN细胞的略低,推测这与转化BmN细胞中的BmSTAT水平(JAK/STAT途径信号)高于正常BmN细胞有关。然而,在BmN细胞中,BmSTAT基因的过表达尚不足以明显提高细胞对病毒感染的抵抗力。研究结果为进一步探讨家蚕JAK/STAT途径在病毒感染应答方面的作用奠定了基础。; 张晓丽马焕艳曹广力薛仁宇贡成良; 关键词：家蚕免疫应答

江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目(2009-D-Ag18)

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