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河南省教育厅自然科学基金(2006210007): 作品数：13 被引量：50H指数：5; 相关作者：康国章郭天财朱云集刘超沈丙权更多>>; 相关机构：河南农业大学湖南农业大学河南科技大学更多>>; 发文基金：河南省教育厅自然科学基金中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>; 相关领域：生物学农业科学更多>>

小麦叶片内几个抗冷相关基因cDNA片段的克隆被引量：2: 2009年; 运用RT-PCR法,从小麦叶片中克隆出SOD、CAT、APX、GR、CBF、GI等几个抗冷相关基因的cDNA片段,序列比对结果显示,这些基因与GenBank上已登录的大麦、小麦、玉米、水稻等相关基因的同源性较高,表明克隆出了上述几个小麦抗冷相关基因,其中的APX和GR为普通小麦中首次报道。; 康国章岳彩凤沈丙权刘超王永华郭天财; 关键词：小麦克隆

小麦AGPase胞质型小亚基SSUI的克隆及过表达反义表达与RNAi干扰载体的构建被引量：2: 2008年; 采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号的发育籽粒中克隆出小麦淀粉合成关键酶AGPase胞质型小亚基(AGPase plastic small subunit,SSU I)的cDNA全长,并构建了此基因的过表达、反义表达和RNAi干扰载体.SSUI的cDNA全长为1465 bp(GenBank No.EF405961),编码域长度为1 422 bp,位于EF405961的2～1 423 bp.同源性比较结果表明:与GenBank上已报道的SSU I基因(X66080,AF244 997,Z48562)同源性达98%～99%.以pWM101质粒为基础,构建了由35 S启动子调控的SSU I基因的过表达载体pWM101SSU I S;将该基因反向置于pBI121质粒的CaMV35S启动子之后,构建了SSU I的反义表达载体pBI121SSU I A.同时还克隆出SSU I基因的一段260 bp高保守序列,以pFGC5941质粒为基础,构建了RNAi干扰载体pFGC5941SSU I.; 康国章张孟琴官春云郭天财朱云集; 关键词：普通小麦

小麦淀粉合酶基因Ⅱ克隆及反义和RNAi载体构建被引量：3: 2008年; 采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号的籽粒中克隆出淀粉合酶Ⅱ基因(Starch synthaseⅡ,SSⅡ)部分cDNA片段(600bp)(GenBank No.EF221761),同源性比较结果显示,它与GenBank上已报道的SSⅡ基因有高度同源性。以pCMBIA1301质粒为基础,构建了由35S启动子调控的SSⅡ基因的反义表达载体pCMBIA1301SSIIA;另外,还以pFGC5941质粒为基础,构建了SSⅡ基因的RNAi载体pFGC5941SSIIsa,这些载体的构建为研究此基因的功能奠定了基础。; 康国章岳彩凤官春云韩巧霞郭天财朱云集王永华; 关键词：普通小麦

小麦籽粒内AGPase质体型小亚基的克隆和序列分析被引量：4: 2008年; 文章从小麦籽粒中克隆了淀粉合成关键酶AGPase的质体型小亚基(SSU Ⅱ)的cDNA序列。其中间部分与3'端序列与大麦SSU Ⅱ(Z48563)的同源性高达97%,但在5'端特异的转移肽切割位点却比Z48563缺失一段113bp序列。本文克隆的SSU Ⅱ其特异5'端序列与已报道的大麦(Z48563)、小麦(536819)、玉米(AF334960)进行多序列比对和同源性比较显示,它们的亲缘关系较远,表明这可能是一个新的SSU Ⅱ基因。另外,在检测的22个现今推广面积较大的小麦品种中,SSU Ⅱ 5'端缺失序列的现象都普遍存在。; 康国章沈丙权王永华刘超郭天财朱云集; 关键词：小麦淀粉 AGPASE

小麦AGPase胞质型大亚基基因的克隆与表达分析被引量：4: 2008年; 从大粒型小麦品种豫教2号中克隆出调控小麦ADPG焦磷酸化酶(AGPase)胞质型大亚基基因(LSUI)cDNA全长。在花后15d的小麦植株中,通过半定量PCR法,发现LSUI基因在叶、籽粒、叶鞘和颖壳中表达量较高,但在根和茎中表达量较低,表明在绿色光合功能器官和淀粉合成器官中,LSUI基因量表达较高。比较了LSUI基因在千粒重不同的豫教2号和兰考矮早八两小麦品种籽粒发育过程中的表达差异后,发现在籽粒形成期,LSUI基因在两品种籽粒内表达相似,但在籽粒灌浆期和成熟期间,LSUI基因在千粒重较高的豫教2号内表达量明显高于千粒重较低的兰考矮早八,这个表达差异与两品种间淀粉积累差异趋势相似,表明LSUI基因的表达量可能与淀粉的积累量密切相关。; 康国章王永华刘超沈丙权郭天财朱云集; 关键词：小麦基因克隆 RT-PCR 基因表达

小麦GAPDH基因克隆及序列分析被引量：18: 2008年; 采用Trizol法提取高质量小麦总RNA,并运用RT-PCR方法克隆了小麦GAPDH(甘油醛三磷酸脱氢酶)基因的部分序列(EU022331),长度为604bp,核苷酸序列比对结果表明,该序列与大麦(M36650)、玉米(AY109397)、番茄(BT012693)GAPDH核苷酸序列的同源性分别为95%、86%和84%。GAPDH基因的克隆为在禾谷类作物研究的应用提供了一个较好的对照基因。; 岳彩凤康国章刘超郭天财朱云集沈丙权; 关键词：小麦

小麦淀粉合酶基因Ⅲ片段的克隆及反义和RNA干扰载体的构建被引量：6: 2007年; 采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号的发育籽粒中克隆出淀粉合酶III基因(starchsynthase III,SSIII)部分cDNA片段(509bp)(GenBank No.EF466009),同源性比较结果显示,它与GenBank上已报道的SSIII基因有高度同源性。以pWM101质粒为基础,构建了由35S启动子调控的SSIII基因的反义表达载体pWM101SSIIIA;另外,还以pFGC5941质粒为基础,构建了SSIII基因的RNAi干扰载体pFGC5941SSIIIsa,这些载体的构建为研究此基因的功能打下了很好的基础。; 康国章官春云肖向红郭天财朱云集刘锋; 关键词：普通小麦

小麦AGPase胞质型基因LSUI的克隆及正义、反义与RNAi干扰载体的构建被引量：5: 2007年; 采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号的发育籽粒中克隆出AGPase胞质型大亚基基因(large subunit,LSU I)的cDNA全长(1947 bp,GenBank No.DQ839506),同源性比较结果表明,与GenBank上已报道的LSU I基因同源性达99%,虽与其有2处碱基不同(与Z21969相比,分别在851 bp处的T变为C和926 bp处的G变为A),但他们的氨基酸序列相同,故不影响其功能.以pBI121质粒为基础,通过中间载体pBSK,构建了由35S启动子调控的LSU I基因的正义表达载体pBI121LSUⅠS;将该基因反向置于pBI121质粒的CaMV35S启动子之后,构建了LSU I的反义表达载体pBI121LSUⅠA.同时还克隆出LSU I基因的250 bp片段,以pFGC5941质粒为基础,构建了RNAi干扰载体pFGCLsuⅠ,这为研究该基因的功能打下了很好的基础.; 康国章张孟琴官春云郭天财朱云集; 关键词：普通小麦

小麦淀粉GBSSII基因的克隆、反义和RNAi载体的构建被引量：7: 2008年; 采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号籽粒中克隆出颗粒型淀粉合成酶II基因(Granule bound starch syn-thase,GBSSII)部分cDNA片段(1 069 bp)(GenBank登录号:EF221764),同源性比较结果显示,它与GenBank上已报道的GBSSII基因有高度的同源性。以pWM101质粒为基础,构建了由35 S启动子调控的GBSSII基因的反义表达载体pWM101GBSSIIA;另外,还以pFGC5941质粒为基础,构建了GBSSII基因的RNAi载体pFGC5941GBSSIIsa,这些载体的构建为研究GBSSII基因的功能打下了很好的基础。; 康国章肖向红王永华郭天财朱云集官春云; 关键词：普通小麦

小麦AGPase4个亚基的克隆及其组织特异性表达被引量：7: 2009年; 采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号发育籽粒中克隆出小麦淀粉合成关键酶—AGPase的胞质型小亚基(cytosolic small subunit,SSUⅠ)、质体型小亚基(plastidial small subunit,SSUⅡ)、胞质型大亚基(cy-tosolic large subunit,LSUⅠ)和质体型大亚基(plastidial large subunit,LSUⅡ)的cDNA序列。所克隆的基因cDNA序列长度分别为1 4651、6311、941和535 bp。序列比对结果显示SSUⅠ、LSUⅠ和LSUⅡ与已往报道的大麦、小麦、玉米、水稻等相关基因的同源性较高,而SSUⅡ的cDNA序列为首次克隆,与大麦SSUⅡ相比,5'端缺失编码转移肽的一段序列,表明其可能对质体AGPase活性产生一定影响。通过半定量PCR法发现SSUⅠ与LSUⅠ在籽粒中表达量较高,而SSUⅡ和LSUⅡ在叶片中丰富表达。; 康国章刘超沈丙权肖向丽郭天财; 关键词：小麦克隆组织特异性表达

河南省教育厅自然科学基金(2006210007)

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