上海市卫生局科研基金(2009218)
- 作品数：9 被引量：55H指数：5
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- 地塞米松对骨关节炎软骨细胞增殖、活力影响及乳铁蛋白的干预作用
- 2014年
- 目的 观察地塞米松（Dex）对人骨关节炎软骨细胞（HACs）增殖力和活力的影响以及乳铁蛋白（LF）的干预作用.方法 体外培养HACs,在浓度为25 mg/L的Dex和不同浓度LF（12.5、25.0、50.0、100.0、200.0 mg/L）的培养基中培养72 h,采用噻唑蓝（MTT）法测定HACs的增殖力,LIVE/DEAD染色法检测HACs存活力,实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和免疫细胞化学染色法检测磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）/ERK基因的表达.结果 Dex显著抑制HACs的增殖力及活力（P＜0.01）,并伴随着ERK mRNA和p-ERK/ERK蛋白表达明显下调（P＜0.05）.单纯Dex及各浓度LF组均能以浓度依赖方式显著抑制Dex诱发的HACs增殖力下降,各组分别为（38.9±1.3）％、（55.6±3.1）％、（94.4±1.4）％、（111.1±3.2）％、（127.8±2.5）％和（150.0±4.3）％（P＜0.01）.12.5 mg/L的LF并未明显促进软骨细胞的存活力（P＞0.05）,而25.0～ 200.0 mg/L的LF可以抑制Dex诱发的HACs的存活力下降,各组分别为（73.2±3.7）％、（82.1±5.1）％、（89.1±4.5）％和（95.5±2.9）％（P＜0.01）,呈明显的浓度依赖性,同时ERK基因mRNA和p-ERK/ERK蛋白表达的下调得到显著改善（P＜0.05）.结论 LF可阻止Dex诱导的HACs增殖力及活力抑制,其作用机制可能与明显上调增殖基因ERK的mRNA和蛋白水平的表达有关.
- 薛华明涂意辉马童文涛夏志道梅炯
- 关键词：软骨细胞增殖地塞米松乳铁蛋白
- 非股骨髓腔定位法牛津单髁膝关节置换可行性研究被引量：3
- 2012年
- 牛津单髁膝关节置换术（Oxfordunicompartmentalkneearthroplasty，OUKA）在治疗膝关节内侧间室骨关节炎中取得了巨大的成功。在手术中，推荐采用股骨髓内定位法指示股骨假体的放置，但切口小、髌骨过大或股骨内髁过小等原因常导致无法进行髓内定位，且该方法亦存在定位不准的问题。因此，我们采用非股骨髓腔定位法辅以影像监视进行股骨假体的放置。
- 涂意辉马童薛华明蔡珉巍刘晓东
- 关键词：膝关节置换术股骨髓腔单髁股骨假体内侧间室
- 膝关节外侧间室单髁置换术临床应用进展被引量：23
- 2012年
- 膝关节单问室骨性关节炎（isolatedfemorotibialosteoarthritis）是临床比较常见的一类退变性疾病，其中内侧问室的发病率明显高于外侧间室，后者占所有单室胫股关节炎的1／8。在开展的所有单髁置换术（unicondylarkneearthroplasty，UKA）中，外侧UKA仅占5％-10％。
- 薛华明蔡珉巍涂意辉
- 关键词：置换术膝关节单髁退变性疾病
- 乳铁蛋白对骨关节炎软骨细胞增殖活力及细胞外调节蛋白激酶表达的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察人乳铁蛋白（hLF）对人骨关节炎软骨细胞（HACs）增殖活力及细胞外调节蛋白激酶（ERK）基因表达的影响。方法噻唑蓝（MYr）比色法检测HACs的增殖力，并选择hLF最佳工作浓度：LIVE／DEAD染色检测HACs的活力；实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）和免疫细胞化学染色检测磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）／ERK的表达。结果MTT检测显示hLF对HACs的增殖促进作用呈剂量一效应关系（P〈0．05），以200mg／L为最佳药物浓度。LIVE／DEAD染色显示hLF可以显著促进HACs的活力，与空白对照组和无血清培养组比较，差异有统计学意义f（98．53±2．76）％比（89．12±6．98）％比（65．37±2．08）％，P〈0．05]。Real-timePCR检测显示，hLF作用48h后ERKmRNA相对表达量为（1．589±0．113），与对照组（1．024±0．026）比较差异有统计学意义（P〈0．05）。INCellAnalyzer2000定量检测，hLF能够显著促进P—ERK／ERK蛋白的表达，较对照组明显增高，差异有统计学意义[（0．887±0．003）比（0．637±0．002），P〈0．05]。结论hLF可明显促进HACs增殖力和活力，其作用机制可能与上调增殖基因p-ERK／ERK表达有关。
- 涂意辉薛华明夏志道马童刘晓东杜靖远
- 关键词：乳铁蛋白软骨细胞增殖细胞外调节蛋白激酶
- 微创膝关节单髁置换术治疗合并骨质疏松的内侧间室骨关节炎被引量：7
- 2012年
- 目的探讨骨质疏松对膝关节单髁置换术操作和临床效果的影响。方法回顾性分析2007年1月～2010年12月采用膝关节单髁置换术治疗老年女性膝关节内侧间室骨性关节炎患者47例,其中骨质疏松患者21例,非骨质疏松患者26例。观察切口大小、手术时间、引流量和并发症。采用HSS评分法对术前、术后膝关节功能进行评估,采用X线摄片对股骨假体力线进行分析。结果两组患者在切口大小、术后引流量、假体力线上无统计学差异,所有股骨假体大小与股骨髁匹配,骨质疏松组中1例术后X线摄片发现内侧胫骨平台轻度劈裂,但骨折无明显移位,其余患者无感染、脂肪栓塞或下肢深静脉血栓,无假体位置不良。所有患者均获得了完整的随访,术后平均随访24个月(12～60月)。末次随访患者膝关节内侧间室疼痛明显减轻,HSS评分和膝关节活动度明显增加,无假体位置不良、脱位及假体松动等并发症。结论老年绝经后女性骨关节炎患者中合并骨质疏松十分常见,通过注意手术技巧术中操作避免使用暴力,术后正规抗骨质疏松治疗,单髁膝关节置换术可获得满意的临床效果和股骨假体力线。
- 涂意辉马童蔡珉巍薛华明刘晓东
- 关键词：骨质疏松微创单髁置换术骨性关节炎
- 单髁置换术治疗膝内侧间室关节炎合并前交叉韧带缺陷被引量：5
- 2012年
- 膝关节前交叉韧带（ACL）损伤是一类临床常见的疾病，Johnson DL等报道ACL撕裂伤的年发病例数超过25万。关节镜下ACL重建术是一种较好的办法，患者能够获得较快，较好的功能恢复。然而，ACL缺陷并不常常单独存在，较多情况同时合并膝关节骨关节炎（OA），患者常表现为膝关节疼痛和（或）膝关节不稳定。尤其是对于相对年轻以及偏好运动的患者，采取何种治疗以获得疼痛的长期缓解，同时尽可能恢复较高的活动水平，一直以来争议不断。
- 薛华明涂意辉蔡珉巍马童刘晓东
- 关键词：单髁置换术前交叉韧带重建术
- 股骨髓外定位法微创单髁置换术治疗膝内侧间室骨关节炎被引量：11
- 2011年
- 目的探讨股骨髓外定位微创单髁置换术的可行性及初步疗效。方法回顾性分析2009年1月～2010年1月采用MI-UKA治疗膝关节内侧间室骨性关节炎的患者11例(15膝),男8例,女3例;单侧7例,双侧4例;年龄为60～72岁,平均年龄65.2岁。观察切口大小、手术时间、出血量、引流量和并发症。采用HSS评分法对术前、术后膝关节功能进行评估,分析比较膝关节活动度,观察比较术前,术后下肢的力线(髋膝踝角)。结果切口大小平均7.2cm(6～8cm),术中出血平均50.8ml(50～80ml),手术时间平均115.0min(90～125min),术后引流量平均25.5ml(20～30ml)。所有患者均获得了完整的随访,11例(15膝)术后平均随访15个月(10～22个月)。末次随访患者膝关节内侧间室疼痛明显减轻,HSS评分和膝关节活动度明显增加,下肢力线内翻畸形明显减少。无感染、脂肪栓塞或下肢深静脉血栓,假体位置不良,脱位,假体松动等并发症。结论采用EFA行MI-UKA是一种可供选择的较好的办法,但中远期疗效尚需进一步随访。
- 涂意辉薛华明蔡珉巍刘晓东马童张长青
- 关键词：股骨
- 优化底物酶及冻存剂组成对软骨细胞增殖力及活力的影响
- 2012年
- [目的]本文研究的目的在于找到软骨细胞分离的合适方法及优化冰冻保存软骨组织的配方。[方法]来源于骨关节炎膝关节置换术的软骨标本被用于本次试验,采用300或400 u/ml II型胶原酶(CTII-1或2)进行软骨细胞体外分离,保存在不同组成的冷冻剂中,进行梯度冷却并保存在液氮中48 h,随后进行软骨细胞活力及增殖潜力的测定。[结果]CTII-1较CTII-2更能分离出高活力的软骨细胞(P<0.05),并且300或400 u/ml的底物酶浓度比较合适。10%DMSO+90%FCS是一种比较合适的冰冻保护剂,能够最大程度保留软骨细胞的增殖潜力与活力,并且毒副作用小。[结论]通过相关的优化措施诸如软骨细胞体外分离底物酶以及冰冻保护剂的组成,从关节软骨组织中分离具有高增殖潜力的活力软骨细胞是一种可行的方法。
- 涂意辉Zhidao Xia薛华明马童刘晓东蔡珉巍张长青
- 关键词：冷冻保护剂增殖力
- 不同浓度地塞米松对人骨关节炎软骨细胞凋亡及Fas/FasL基因表达的影响被引量：11
- 2012年
- 目的糖皮质激素会破坏软骨,通过观察地塞米松对人骨关节炎软骨细胞(human articular chondrocytes,HACs)凋亡及Fas/FasL基因表达的影响,探讨其促进HACs凋亡的作用机制。方法取行人工膝关节置换的膝骨关节炎患者自愿捐赠软骨组织,体外分离培养HACs,取第2代细胞进行实验。将HACs分别置于含浓度为0.125、1.25、12.5、25及50μg/mL地塞米松培养液中,培养48 h后采用MTT法选择地塞米松最佳工作浓度进行后续实验。将HACs分别采用最佳工作浓度地塞米松(实验组)及不含地塞米松培养液(对照组)培养,0、24、48 h后行TMRE/Hoechst/Annexin V-FITC/7-AAD四重染色检测细胞凋亡,48 h后行实时定量PCR检测Fas/FasL mRNA表达,0、24、48 h后行免疫组织化学染色检测Fas/FasL蛋白表达。结果 25μg/mL浓度组细胞抑制率显著高于50μg/mL浓度组,差异有统计学意义(P<0.05);与其他浓度组比较,差异亦有统计学意义(P<0.05);选择25μg/mL浓度作为后续实验工作浓度。培养0、24、48 h,实验组HACs凋亡细胞百分比分别为5.8%±0.3%、27.0%±2.6%、36.0%±3.1%,呈明显时间依赖性(P<0.05)。培养48 h后实验组及对照组Fas mRNA相对表达量分别为(8.93±1.12)×10—3及(3.31±0.37)×10—3,FasLmRNA相对表达量分别为(5.92±0.66)×10—3及(2.31±0.35)×10—3,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。随培养时间延长,实验组Fas及FasL蛋白表达逐渐增加,且各时间点均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论地塞米松可促进HACs细胞凋亡及上调凋亡基因Fas/FasL表达,为进一步探讨Fas/FasL信号通路在地塞米松促HACs凋亡中的作用提供了实验依据。
- 涂意辉薛华明夏志道蔡珉巍刘晓东马童张长青
- 关键词：地塞米松骨关节炎人关节软骨细胞细胞凋亡FAS/FASL
