江苏省“青蓝工程”基金(2010[27])
- 作品数：8 被引量：22H指数：2
- 相关作者：陈素娟彭大新刘秀梵管萌娄亚坤更多>>
- 相关机构：扬州大学江苏农牧科技职业学院中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：江苏省“青蓝工程”基金长江学者和创新团队发展计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 多重PCR方法快速鉴别肠炎、鼠伤寒、鸡白痢及鸡伤寒沙门菌被引量：16
- 2014年
- 根据沙门菌属特异性基因hut及型特异性基因SdfⅠ、Spy、glgC和Spec序列,设计5对引物,建立沙门菌多重PCR方法,并用临床样品分离菌株对该方法进行检验。结果显示,该方法能特异性地鉴定肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、鸡白痢沙门菌和鸡伤寒沙门菌,4种细菌检测灵敏度均为3×103 CFU,染色体DNA检测灵敏度分别为162、202、214和178pg·μL-1。55份临床分离株检测的结果显示,与传统血清学方法相比,此多重PCR方法敏感性为100%,符合率最低为96.4%。该法能快速而准确地鉴定上述4种血清型的沙门菌。
- 杨林娄亚坤宿春虎张华管萌许晨旭陈素娟魏荣陈继明彭大新
- 关键词：沙门菌多重PCR血清型
- 鸭疫里氏杆菌双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2012年
- 为快速检测鸭疫里氏杆菌,以纯化的兔抗1型鸭疫里氏杆菌抗体作为捕获抗体,以纯化的鸭疫里氏杆菌单克隆抗体作为检测抗体,建立了双抗体夹心ELISA方法。最佳的方案为用184ng/孔纯化的多抗包被过夜,100mL/L小牛血清37℃封闭2h,检测抗原、单抗、酶标抗体均为37℃作用1h,显色20min后终止反应,D450nm值高于0.330且P/N>2.1判定为阳性。该方法特异性强,与禽源巴氏杆菌、大肠杆菌、沙门菌无交叉反应,最低检测剂量为104 CFU/mL。与传统细菌分离方法相比,该方法的敏感性为100%,符合率为85.2%。本研究首次建立了检测鸭疫里氏杆菌的双抗体夹心ELISA方法,且特异、敏感。
- 陈素娟陈冰李鑫高以明彭大新刘秀梵
- 关键词：鸭疫里氏杆菌单克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 菟丝子提取物对猪精子冷冻效果的影响
- 2014年
- 在猪精液冷冻液中添加不同浓度的菟丝子提取物,研究冻后精子的形态正常率、质膜完整率、SOD活性及MDA含量,探讨菟丝子提取物对猪精液冷冻保存效果。结果表明,冷冻-解冻后,猪精子形态正常率、质膜完整率和SOD活性均显著降低,MDA含量显著高于对照组(P<0.05)。各冷冻组相比,菟丝子中剂量组精子形态正常率、膜完整率和SOD活性均高于其他冷冻组,MDA含量低于各冷冻组,但各指标仅表示与菟丝子低剂量组存在显著差异(P<0.05)。试验表明,适量的菟丝子提取物可对抗冷冻造成的膜损伤,提高精子SOD活性,降低MDA含量。
- 武彩红李玲吴敏秋姚静张斌黄秀明
- 关键词：菟丝子精子冷冻
- 鹅源坦布苏病毒SHYG株E蛋白生物信息学分析被引量：1
- 2013年
- 为了探索坦布苏病毒E蛋白的抗原结构,以鹅源坦布苏病毒SHYG株E蛋白基因组序列为基础,用DNAStar、Antheprot等软件对E蛋白的二级结构、亲水性、表面可能性、抗原性指数、跨膜结构及等电点等进行预测,用I-TASSER分析E蛋白三级结构。结果表明坦布苏病毒E蛋白等电点为7.15;综合分析显示37~39、80~86、124~126、133~134、233~237、276、315~318、398~399位是可能的B细胞抗原表位,其中80~86、233~237、315~318、398~399位形成抗原表位可能性更高。抗原表位的预测为坦布苏病毒E蛋白的抗原表位的鉴定提供理论依据。
- 邹晓艳潘金金宿春虎管萌娄亚坤陈素娟彭大新刘秀梵
- 关键词：E蛋白B细胞表位
- 五株基因缺失的肠炎沙门菌免疫原性的研究被引量：2
- 2014年
- 为了探讨ompR、spiA、rpoS、ompR-spiA、ompR-rpoS基因缺失株成为肠炎沙门菌减毒候选活疫苗的可能性,构建了3株rpoS、ompR-spiA、ompR-rpoS基因缺失株,通过口服方式把5株ompR、spiA、rpoS、ompR-spiA、ompR-rpoS基因缺失株接种BALB/c小鼠进行毒力测定和免疫保护性测定。结晶紫染色定量法显示,这5株基因缺失株生物被膜的形成能力显著降低;毒力测定显示,它们的半数致死量比野生株的高10 000倍,双基因缺失株的毒力更弱。血清抗体水平测定表明,各基因缺失株可诱导机体产生较高的IgG抗体,并于注射后第3周达到高峰;攻毒后ompR、spiA、rpoS、ompR-spiA和ompR-rpoS基因缺失株的免疫保护率分别为62.5%、50.0%、50.0%、50.0%和37.5%。结果表明,ompR基因缺失株可作为肠炎沙门菌减毒活疫苗的候选株。
- 董洪燕彭大新焦新安陈素娟孙化露王小波刘秀梵
- 关键词：肠炎沙门菌毒力免疫应答
- 伪狂犬病病毒gN基因缺失株的构建及其在小鼠上的免疫效力分析
- 2014年
- 为了确定伪狂犬病病毒(PRV)gN基因的功能,以PRV-JSZ双基因缺失株rPRV-gE^-/TK^-和疫苗株Bartha K61为亲本株,通过同源重组技术构建这两种病毒的gN缺失株。PCR扩增鉴定和序列分析结果显示成功获得了gN缺失株rPRV-gE^-/TK^-/gN^-和rPRV-Ba-gN^-。与亲本株相比,rPRV-gE^-/TK^-/gN^-在PK15细胞上早期增殖速度较慢,但效价无明显变化;rPRV-Ba-gN^-在PK15细胞上的增殖速度和效价显著降低。rPRVgE^-/TK^-/gN^-和rPRV-gE^-/TK^-的LD_50均大于1×10~6 TCID_50,rPRV-Ba-gN^-的毒力低于Bartha K61。与亲本株相比,gN缺失株免疫小鼠可提供较好的抗体水平和攻毒保护率。PRV gN基因的缺失可进一步降低病毒的毒力,提高免疫保护力。
- 胡艳芬管萌刘开春陈素娟彭大新刘秀梵
- 关键词：伪狂犬病病毒毒力免疫保护
- H5N1亚型禽流感病毒缺失跨膜区M2基因的原核表达及其单克隆抗体的制备
- 2014年
- 为制备针对H5N1亚型禽流感病毒(AIV)M2蛋白的单克隆抗体,将H5N1亚型AIV缺失跨膜区的M2基因(sM2)克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,通过IPTG诱导表达,获得可溶性的36ku sM2融合蛋白。以100μg纯化的sM2融合蛋白免疫8周龄BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合。以sM2融合蛋白作为包被抗原,通过ELISA方法检测,将M2融合蛋白抗原检测阳性、GST抗原检测阴性的杂交瘤细胞进行克隆筛选,获得4株单克隆抗体,分别被命名为1A9、2D4、3E6和4E7,亚类分别为IgG2b、IgG1、IgG2a、IgG2a。间接免疫荧光试验显示,单克隆抗体与不同clade的H5亚型AIV感染的MDCK细胞均产生特异性荧光反应,可用于H5亚型AIV的检测。
- 柴茂许晨旭管萌刘开春陈素娟彭大新刘秀梵
- 关键词：H5N1亚型禽流感病毒单克隆抗体
- 超低温保存对猪精子膜完整性及氧化应激水平的影响被引量：2
- 2013年
- 以姜曲海猪精液为研究对象,分析冷冻—解冻后猪精子膜完整性及氧化应激水平,结果表明,新鲜精子经冷冻—解冻后,形态正常率、头部质膜完整率、尾部质膜完整率及SOD活性均显著降低,MDA含量显著升高。冷冻1组(未添加维生素C)与冷冻2组(添加维生素C)相比,前者精子形态正常率、头部质膜完整率、尾部质膜完整率及SOD活性分别为71.2%、57.2%、49.2%和85.3 IU/10-8,均显著低于后者,MDA含量则显著高于后者。冷冻—解冻造成了精子膜损伤,维生素C在一定程度上可有效提高精子的抗氧化能力,抵抗膜损伤。
- 武彩红黄秀明周春宝李玲姚静张斌
- 关键词：超低温精子氧化应激
