北京市教委科技计划面上项目(KM200810020001)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：李焕荣张春叶沈红吴国娟孙英健更多>>
- 相关机构：北京农学院北京市农林科学院畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：北京市教委科技计划面上项目北京市重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- TGEV S基因A和B/C抗原位点间接ELISA方法的建立及血清学的初步调查
- 为建立猪传染性胃肠炎病毒与猪呼吸道冠状病毒的鉴别诊断方法,分别利用构建的基因工程重组菌表达了TGEVS基因A和B/C位点蛋白。以纯化的蛋白作为包被原分别建立了间接ELISA方法,确定了方法的最佳反应条件,并用所建立的方法...
- 聂晓华李焕荣沈红高冉王鑫崔德凤
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒S基因间接ELISA方法
- 文献传递
- 猪传染性胃肠炎病毒S基因A位点蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
- 2011年
- 猪传染性胃肠炎（TGE）是由传染性胃肠炎病毒（TGEV）引起的高度接触传染性疾病,以仔猪呕吐、严重腹泻、脱水和高死亡率为临床特征。该病毒主要编码纤突蛋白（S）、膜结合蛋白（M）、核蛋白（N）和小膜蛋白（s M）4种结构蛋白[1-2]。其中S蛋白是惟一能诱导机体产生中和抗体的结构蛋白[3]。
- 聂晓华李建东李焕荣崔德凤张莉
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白单克隆抗体S基因
- 猪传染性胃肠炎病毒S基因抗原位点B与C之间片段的克隆与原核表达被引量：3
- 2008年
- 将RT-PCR扩增的猪传染性胃肠炎病毒S基因抗原位点B与C之间的目的片段经克隆、双酶切后连接于表达载体,经酶切、PCR和测序鉴定的阳性重组质粒转化BL21(DE3),用IPTG诱导重组菌株表达其融合蛋白。结果显示,目的片段的大小为357bp,序列分析表明,S基因与其他猪传染性胃肠炎病毒相应基因具有很高的同源性;Western-blotting检测表明,分子质量约34ku的融合蛋白具有良好的反应原性。
- 张春叶孙英健沈红李焕荣吴国娟于同泉
- 关键词：传染性胃肠炎病毒S基因原核表达
- 猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C位点的克隆及原核表达载体的构建被引量：1
- 2008年
- 参考GenBank上公布的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因B、C抗原位点序列,应用Prim-er6.0设计一对含酶切位点的引物,用于RT-PCR扩增B、C抗原位点目的片段,将扩增产物连接于peasy-T克隆载体上,构建克隆载体,用EcoRⅠ和XhoⅠ对表达载体PET-32a(+)和重组质粒进行酶切,将酶切产物亚克隆至PET-32a(+)多克隆位点上,连接、转化至BL21(DE3),构建B、C位点的原核表达载体,并对阳性重组质粒进行酶切、PCR和测序鉴定。所扩增的目的片段的大小为357 bp,与原核表达载体连接后,经核苷酸及推导的氨基酸序列分析表明,该基因与其他猪传染性胃肠炎病毒相应基因具有很高的同源性,说明成功地构建了TGEV S基因B、C抗原位点的原核表达载体。TGEV S基因B、C抗原位点原核表达载体的成功构建,为TGEV诊断方法的建立提供良好的技术基础。
- 张春叶沈红李焕荣路苹
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒原核表达载体
