国家自然科学基金(30972866)
- 作品数：6 被引量：9H指数：1
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- 缺血再灌注处理对乳鼠心肌细胞钠电流的影响被引量：9
- 2011年
- 目的研究缺血再灌注(I/R)处理对乳鼠心肌细胞钠电流的影响。方法实验分为两组:对照组为体外培养乳鼠心室肌细胞;I/R组为相同的细胞,缺血3 h,再灌注1 h,采用膜片钳全细胞模式记录仪分别记录并比较对照组和I/R组的钠电流。结果和对照组相比,I/R组在每一指令电压上都增大钠电流;在测试电压为-20 mV的条件下,钠电流峰值电流密度从(-159.74±63.80)pA/pF增至(-397.25±82.99)pA/pF(n=7,P(0.05);通道稳态激活V1/2分别为(-58.77±3.83)mV和(-51.51±5.34)mV(n=5,P(0.05);稳态失活V1/2分别为(-58.77±3.83)mV和(-51.51±5.34)mV(n=5,P(0.05);通道失活后恢复τ分别为(8.57±1.50)ms和(6.30±0.57)ms(n=5,P(0.05)。结论 I/R处理可以增大钠电流的峰值电流,并使电压电流曲线下移;减慢通道的时间依赖性激活,促进通道的电压依赖性失活,失活后恢复变快。钠通道的这些改变可能是引起心肌细胞缺血再灌注损伤的重要原因。
- 孙亮龙村黑飞龙吴蓓秦春妮
- 关键词：钠电流全细胞膜片钳
- 阜外极化液对缺血再灌注乳鼠心肌细胞快钠通道电流的影响
- 2012年
- 目的探讨阜外极化液(Fuwai polarizing solution,FW)对缺血再灌注心肌细胞快钠通道(INa)的影响。方法实验分为缺血再灌注组(I/R)、Histidine-tryptophan-ke toglutarat液组(HTK)和阜外极化液组(FW)。选择培养至18-48h的SD乳鼠心肌细胞用于实验。I/R组细胞经模拟缺血缺氧3h、再灌1h处理;HTK组和FW组在模拟I/R过程中,分别加HTK液和FW液于细胞培养基中进行干预。用全细胞膜片钳技术检测INa的电流强度和门控特性。结果与I/R组和HTK组相比,FW组的INa的峰值电流密度明显降低(-305.9±64.1pA/pFvs-617.2±74.2pA/pF和-547.3±20.8,P<0.05),I-V曲线上移。HTK组较I/R组峰值电流密度降低,但两者没有统计学差异。与I/R组和FW组相比,HTK组的稳态激活曲线和失活曲线左移。各组半激活电压、激活曲线斜率、半失活电压、失活曲线斜率、失活后恢复曲线时间常数均无显著性差异。结论 FW液可抑制乳鼠心肌细胞I/R损伤后的INa通道电流,但不影响快钠通道的门控特性,这有利于减少细胞内钠钙超载,减轻I/R导致的心肌损伤。
- 黑飞龙吴蓓陈蒙蒙杨胜男龙村
- 关键词：缺血再灌注心肌细胞全细胞膜片钳技术
- 钙激活钾通道在EDHF介导的血管内皮源性舒张中的作用
- 2014年
- 目的探索猪的冠状动脉中,钙激活钾通道(Calcium-activated potassium channels,K_Ca)在内皮源性超极化因子(Endothelium-Derived Hyperpolarizing Factor,EDHF)介导的血管舒张中的作用。方法 K_Ca通常分为三类:大电导K_Ca(Large-Conductance K_Ca,BK_Ca),中电导K_Ca(Intermediate-Conductance K_Ca,IK_Ca)和小电导K_Ca(Small-Conductance K_Ca,SK_Ca),因此根据加入K_Ca阻滞剂的不同,将血管环分为对照组(不加入K_Ca阻滞剂),Charybodotoxin(BK_Ca和IK_Ca通道阻断剂)组,Apamin(SK_Ca通道阻断剂)组,Charybodotoxin+Apamin组,Iberiotoxin(BK_Ca通道阻断剂)组,每组血管环n=6。采用器官槽法,所有血管环平衡1h后,对照组加入7umol/L环加氧酶阻滞剂吲哚美辛(Indomethacin,Indo)和300 umol/L一氧化氮合酶阻滞剂N-硝基-L-精氨酸(N-nitro-L-arginine,L-NNA),实验组在加入Indo和L-NNA的基础上分别或联合应用BK_Ca、IK_Ca和SK_Ca的阻断剂,水浴30min后,记录由前列腺素F2α(Prostaglandin F2α,U46619)及缓激肽(Bradykinin,BK)引起的血管收缩和舒张反应。结果 Charybodotoxin组,Charybodotoxin+Apamin组和Iberiotoxin组中EDHF介导的内皮依赖性血管最大舒张百分比与对照组相比显著下降,且Charybodotoxin组的最大舒张百分比较Charybodotoxin+Apamin组更低,但Apamin组血管环最大舒张百分比与对照组相比无统计学意义。结论研究证明BK_Ca和SK_Ca通道均在EDHF介导的舒张功能中发挥一定作用,且以协同的方式作用于血管,IK_Ca通道也可能发挥了一定的作用。
- 陈蒙蒙黑飞龙吴蓓王世磊秦春妮杨胜男王晨龙村
- 关键词：血管环内皮源性超极化因子钙激活钾通道
- 非去极化心脏停搏液短时常温保存对猪冠状动脉内皮依赖性舒张功能的影响
- 2013年
- 目的探讨短时常温(1h,37℃)条件下,非去极化心脏停搏液(NDP)对猪冠脉内皮源性超极化因子(EDHF)介导的血管舒张功能的影响。方法根据保存液的不同,将血管环分成四组,分别为对照(CON)组、St.Thomas(ST)组、HTK组、NDP组。采用器官槽法,将血管环分别置于Krebs-Hensleit(KH)液、ST液、HTK液、NDP液中,37℃条件下保存1 h,加入一氧化氮合酶阻滞剂N-硝基-L-精氨酸(L-NNA)和环加氧酶阻滞剂(Indomethacin),记录由前列腺素F2α(U46619)及缓激肽(Bradykinin)引起的血管收缩和舒张反应。结果 NDP组中EDHF介导的内皮依赖性血管舒张百分比最大,为(74.79±6.40)%,其余依次为HTK组(51.32±21.92)%、CON组(24.03±8.01)%、ST组(16.20±6.39)%。结论短时常温(1 h,37℃)条件下,NDP液对冠脉内皮的舒张功能具有保护作用,且优于HTK组、CON组和ST组。
- 陈蒙蒙黑飞龙吴蓓王世磊秦春妮杨胜男王晨龙村
- 关键词：血管环内皮源性超极化因子
- NDP液对猪冠状动脉内皮长时间离体低温保存研究
- 2012年
- 目的探讨非去极化停跳液(non-depolarizing solution,NDP)对长时间低温(8h,4℃)保存猪冠状动脉内皮舒缩功能的影响。方法实验分为对照(Con)组、St.Thomas(ST)液组、Histidine-tryptophan-ketoglutarat(HTK)液组、非去极化停跳(NDP)液组。取冠状动脉的左前降支中下1/3段,截成长度为3mm的血管环,连接于血管张力模型上。平衡1h后,在相应的停跳液中、经4℃缺氧条件下保存8h,加入环加氧酶阻滞剂和一氧化氮合成酶阻断剂,记录由U46619及A23187引发的EDHF介导的血管收缩舒张反应。结果各种不同的停跳液4℃条件下保存8h后,ST组和HTK组血管环静息张力较对照组和NDP组显著上升。加入A23187后,HTK组和NDP组的最大舒张百分比分别为67.62%±19.06%和71.82%±12.22%,显著高于对照组(9.77%±5.28%)和ST组(14.46%±9.54%)。结论 NDP液对低温保存8h的冠脉血管内皮功能具有保护作用,其保护作用优于HTK液和St.Thomas液。
- 吴蓓黑飞龙陈蒙蒙王世磊于坤龙村
- 关键词：血管内皮保护心脏保存心脏保存液内皮依赖性超极化因子
- 非去极化停搏液对缺血再灌注心肌细胞L-型钙通道的影响
- 2012年
- 目的探讨非去极化停搏液(non-depolarizing solution,NDP)对缺血再灌注心肌细胞L-型钙通道(ICa-L)的影响。方法实验分为对照(Con)组、缺血再灌注(I/R)组和非去极化停搏液(NDP)组。选择培养18～48 h的SD乳鼠心肌细胞用于实验。Con组细胞不经过缺血再灌注处理;I/R组细胞经模拟缺血缺氧3 h、再灌注1 h处理;NDP组在模拟I/R过程中,加NDP液于细胞培养基中进行干预。用全细胞膜片钳技术检测ICa-L的电流强度和门控特性。结果与对照组相比,I/R组ICa-L的峰值电流密度明显降低[(-9.0±3.8)pA/pF vs(-15.1±8.8)pA/pF,P<0.05],电流-电压曲线(I-V曲线)上移,翻转电位绝对值减小,稳态激活曲线和失活曲线左移,恢复曲线右移。与I/R组相比,NDP组ICa-L的峰值电流密度升高[(-11.4±6.7)pA/pF vs(-9.0±3.8)pA/pF,P<0.05],I-V曲线下移,翻转电位绝对值增大,稳态激活曲线和失活曲线右移,恢复曲线左移。结论 NDP液可减轻心肌细胞I/R损伤对ICa-L通道的抑制作用和门控特性的改变,有利于保护心肌收缩和舒张功能、减少心律失常的发生。
- 吴蓓黑飞龙孙亮陈蒙蒙于坤龙村
- 关键词：缺血再灌注L-型钙通道心肌细胞全细胞膜片钳技术
