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抑制小鼠低氧诱导因子-1α基因的小干扰RNA腺病毒载体的构建和功能鉴定被引量：1: 2011年; 目的构建针对小鼠低氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible transcription factor-1α，HIF-1α）基因的小干扰RNA（small interference RNA，siRNA）腺病毒载体AdHIF-1α-shRNA也GFP，鉴定AdHIF-1α-shRNA-FGFP在培养的小鼠胚胎神经干细胞中对HIF-1α表达的影响，为研究HIF-1α信号途径在神经干细胞生物学中的作用提供基础。方法采用生物信息学方法设计合成针对HIF-1α的siRNA靶DNA序列，通过DNA重组技术构建小鼠HIF-1α-shRNA-EGFP腺病毒载体，PCR和测序鉴定。体外转染培养的小鼠前脑皮质神经干细胞，流式细胞仪检测转染效率，对AdHIF-1α-shRNA-EGFP转染的细胞进行低氧处理，双重免疫荧光检测小鼠胚胎神经干细胞中HIF-1α表达，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Westernblot定量HIF-1α基因和蛋白水平。结果所克隆的序列和已知序列一致；AdHIF-1α-shRNA-EGFP可高效转染小鼠前脑皮质神经干细胞；RT-PCR和Westernblot结果显示，AdHIF-1α-shRNA-EGFP转染小鼠前脑皮质神经干细胞后，低氧条件下小鼠前脑皮质神经千细胞中HIF-1α的基因和蛋白表达分别降低52．05％和67．27％。结论构建的AdHIF-1α-shRNA也GFP能够成功抑制低氧条件下小鼠前脑皮质神经干细胞中HIF-1α的表达。; 张蓬勃李卫松李旭郑娟李玲王妮雷珊陈新林吕海侠刘勇; 关键词：神经干细胞小鼠低氧诱导因子-1Α 小干扰RNA 腺病毒载体

小容量高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液对小鼠局灶性脑缺血／再灌注损伤的影响: 2011年; 目的研究高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液（hypertomic sodiam chloride hydroxyethyl starch 40 injection，HSH）对小鼠局灶性脑缺血，再灌注损伤（ischemia／reperfusion injury，I/RI）的影响。方法30只昆明种小鼠，应用随机排列表进行随机分组，分成3组，每组10只：高渗氯化钠羟乙基淀粉40组（HSH组）、羟乙基淀粉（hydroxyetylstarch，HES）130／0．4组（HES组）、对照组（Control组）。于缺血后即刻经尾静脉注射不同药物：HSH组给予4ml／kHSH；HES组给予4ml／kg羟乙基淀粉130／0．4氯化钠注射液；Control组给予4ml／kg的生理盐水。缺血后12、24、72h行神经行为学评分；24h进行TYC染色，计算脑梗塞面积百分率；72h甲苯胺蓝染色，检测半暗带内存活神经元密度。结果缺血后12、24、72h的神经行为学评分，HSH组为10．0±2．0，11．4±1．8，10．4±1．8；HES组为12．8±1．8，10．2±1．9，10．6±2．7；Control组为12．0±2．1，10．2±2．4，10．0±2．5。缺血后24h的梗塞面积，HSH组为（34．0±7．8）％，HES组为（38．8±2．9）％，Control组为（35．6±6．5）％。缺血后72h的半暗带内存活神经元密度，HSH组为（264±57）个／mm2，HES组为（302±49）个／mm2，Control组为（288±69）个／mm2。3组小鼠的神经行为学评分、梗塞面积百分率以及半暗带内存活神经原元密度组间比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论HSH对小鼠局灶性脑I／RI无改善作用。; 张蓬勃王妮高明李玲李卫松雷珊李旭郑娟刘鹏斌; 关键词：羟乙基淀粉130/0.4氯化钠注射液高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液半暗带

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国家自然科学基金(30772081)

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