国家自然科学基金(30872476)
- 作品数：5 被引量：11H指数：3
- 相关作者：刘炳亚李建芳朱正纲陈雪华瞿颖更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院上海交通大学第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金上海市科学技术委员会基础研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胃癌中高表达的miR-21对胃癌细胞生物学行为的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:研究miR-21在胃癌中的表达情况及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法:通过实时荧光定量PCR检测30例胃癌手术切除组织和周围正常组织中以及10株胃癌细胞中miR-21的表达情况。通过CCK8法、Annexin-Ⅴ+PI、流式细胞仪检测、划痕实验,观察过表达miR-21对胃癌细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移等生物学行为的影响。结果:定量real-time PCR结果显示miR-21在胃癌组织中高表达(P<0.01),流式细胞仪检测发现,miR-21过表达对细胞凋亡和细胞周期影响不明显(P>0.05),miR-21过表达细胞株增殖能力增强,与阴性对照组和空白对照组对比差别具有统计学意义(P<0.01),miR-21转染细胞划痕愈合速度较对照组快。结论:miR-21在胃癌中呈高表达,过表达miR-21可以促进BGC-823胃癌细胞的增殖能力和迁移能力,但对凋亡和细胞周期影响不明显。
- 张磊李建芳蔡劬陈雪华刘炳亚朱正纲燕敏
- 关键词：增殖迁移
- 结肠癌多药耐药性相关基因筛选与鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的筛选结肠癌多药耐药相关基因，探讨结肠癌多药耐药的机制。方法通过逐步递增氟尿嘧啶（5-FU）浓度孵育结肠癌Lovo细胞，建立耐药细胞株Lovo／5-FU。M1Tr法检测Lovo／5-FU细胞对5-FU和顺铂（CDDP）的敏感性。采用二维电泳-质谱联用技（2DE—MS）术比较Lovo和Lovo／5-FU两株细胞间差异表达蛋白，并采用Western blot法鉴定筛选蛋白。结果与Lovo相比，Lovo／5-FU细胞对5-Fu和CDDP的IC。值分别升高31倍和3倍（均P〈0.01）。通过2DE—MS筛选得到。在耐药株中CAP—G和RhoGD12表达上调，6-PGL、DCI、Prdx-6和Maspin表达下调。Western blot检测显示．Lovo／5-FU细胞中RhoGD12和CAP-G较Lovo增高6．14倍和2．98倍（均P〈0．01）．而Maspin则明显下降至Lovo中的5．2％（P〈0．01）。结论结肠癌耐药性的产生是多基因、多通路改变的结果。CAP—G、RhoGD12、Masoin是潜在的结肠癌多药耐药相关基因。
- 李建芳郑重俞焙秦瞿颖朱正纲刘炳亚
- 关键词：结肠肿瘤多药耐药氟尿嘧啶蛋白组学
- Hedgehog信号通路在胃癌细胞中活化并通过GLI1促进MKN28细胞增殖被引量：3
- 2009年
- 目的研究Hedgehog：（HH）信号通路在胃癌细胞中的活化形式及其转录因子GLI1对胃癌细胞增殖和体外成瘤能力的影响。方法通过反转录PCR分析HH通路相关组成分子在7株细胞系中的表达情况．化学合成针对HH信号通路转录因子GLI1的siRNA并转染胃癌MKN28细胞。通过CCK8法和体外克隆形成实验．观察GLII siRNA转染胃癌MKN28细胞后的细胞增殖能力和克隆形成能力的变化。结果在不同胃癌细胞株中．HH信号通路各相关基因的表达情况存在差异，SHH在6株胃癌细胞系中均表达上调．PTCH在KATOⅢ细胞系、SUFU在MKN28和KATOⅢ表达下调。转染GLI1 siRNA后，MKN28细胞中GLI1 mRNA表达受到明显抑制；经GLI1 siRNA作用的MKN28细胞生长明显缓于阴性对照和未处理组（P=0．014），克隆形成数目及体外克隆形成能力降低（P〈0．001）。结论HH信号通路在胃癌细胞系中被普遍激活，HH信号通路活化后可通过转录因子GLI1促进MKN28细胞增殖．
- 李晓伟李建芳瞿颖蔡劬计骏聂辉陈雪华朱正纲刘炳亚
- 关键词：胃肿瘤HEDGEHOG信号通路RNA干扰
- 冬凌草甲素诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡及机制被引量：3
- 2010年
- 目的探讨冬凌草甲素体外诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡和细胞周期阻滞的作用及其机制。方法10～80μmol／L冬凌草甲素分别处理SGC-7901细胞后，CCK8法检测冬凌草甲素体外对SGC-7901细胞抑制生长的作用；用流式细胞仪分别观察冬凌草甲素诱导凋亡及细胞周期阻滞。Westernblot测定凋亡相关蛋白的表达。结果冬凌草甲素对SGC-7901细胞有明显的生长抑制作用，并随着药物浓度的增加（10～80μmol／L）而逐渐增强，呈浓度、时间依赖关系。此外，流式细胞术检测发现，冬凌草甲素浓度为0、10、40、60、80μmol／L，作用24h后，G2／M期细胞数分别是（9．90±1．17）％、（9．94±0．27）％、（11．76±0．16）％、（15．64±1．48）％和（22．59±1．01）％；而S期细胞比例分别为（31．79±1．03）％、（30．90±0．47）％、（29．25±0．80）％、（21．46±1．61）％、（18．81±0．61）％，冬凌草甲素能够使得SGC-7901细胞周期呈剂量依赖性阻滞于G2／M期；冬凌草甲素浓度为80μmol／L，作用12、24h后，凋亡率分别为（12．78±1．54）％、（20．62±2．39）％，明显高于对照组的（9．92±0．55）％，其能使SGC-7901细胞发生凋亡。随着冬凌草甲素作用时间延长，SGC-7901细胞的bcl-2蛋白表达逐渐减弱，前体Caspase-3被激活。结论冬凌草甲素能够诱导SGC-7901细胞产生凋亡，并使细胞周期阻滞在G2／M期。其凋亡机制可能与下调bcl-2蛋白表达及Caspase-3的激活相关。
- 刘家云顾琴龙杨忠印李建芳陈雪华刘炳亚朱正纲
- 关键词：冬凌草甲素胃癌细胞周期脱噬作用CASPASES
- 小干扰RNA下调GLI1基因的表达对MKN28细胞转移侵袭行为的影响
- 2014年
- 目的利用siRNA技术下调GLI1基因的表达,在体外研究GLI1对MKN28胃癌细胞侵袭转移能力的影响。方法脂质体法将GLI1 siRNA转染MKN28胃癌细胞,采用RT-PCR观察GLI1 siRNA转染前后GLI1在mRNA水平的变化情况。培养MKN28胃癌细胞,将细胞分为转染GLI1 siRNA组、阴性siRNA组和对照组后,分别采用Transwell小室法检测各组细胞的侵袭和转移能力。结果转染GLI1 siRNA后GLI1基因表达在24 h和48 h明显下调。侵袭和转移实验显示:GLI1 siRNA组侵袭和转移细胞数目均低于阴性siRNA组和对照组(P<0.05),而阴性siRNA组和对照组间的差异均无统计学意义。结论转染GLI1 siRNA特异下调GLI1基因表达,在体外抑制胃癌MKN28细胞的侵袭和转移,可能是胃癌靶向治疗的靶点。
- 李晓伟瞿颖李建芳蔡劬计骏刘炳亚
- 关键词：肿瘤浸润小干扰
