河北省自然科学基金(C2007000967)
- 作品数：6 被引量：72H指数：4
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- 相关机构：沈阳农业大学中国农业大学河北省农林科学院更多>>
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- 相关领域：农业科学理学更多>>
- 苹果叶片蛋白质双向电泳样品制备方法的比较被引量：21
- 2008年
- 为探索适用于苹果叶片蛋白质组学研究的样品制备方法,比较了三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA)、酚-甲醇/醋酸铵沉淀法和Tris-HCl提取法等3种总蛋白质的提取方法。制备的样品经双向电泳分离采用银染显色。结果3种方法分别得到450、374和1032个蛋白质点。认为Tris-HCl提取法为最适方法,所得图谱背景清晰,蛋白质信息量最大。
- 曾广娟李春敏张新忠滕云龙董文轩
- 关键词：苹果蛋白质组双向电泳
- 苹果实生树韧皮部中阶段转变特异蛋白质的SDS-PAGE分析被引量：4
- 2009年
- 利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（SDS—PAGE）分析了5株苹果杂种实生树（红玉×金冠）韧皮部中蛋白质含量随节位升高的动态变化。结果表明，随节位升高蛋白质带发生变化，共发现3条阶段转变特异蛋白质带，分子量估算值分别为17．0，21．0，55．0kDa。其中55．0kDa蛋白质表现为定性变化，从46节出现，之后含量保持稳定，到125节后突然消失。21．0kDa蛋白质111～125节以上含量突然降低；17．0kDa蛋白质在在实生树低节位含量低，在51～65节以上含量突然增加并保持稳定，到106～120节含量突然下降。
- 滕云龙李春敏赵永波曾广娟陈东玫董文轩张新忠
- 关键词：苹果蛋白质
- 苹果实生树阶段转变特异蛋白质的SDS-PAGE分析被引量：10
- 2008年
- 利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（SDS—PAGE）分析了6株苹果实生树（‘红玉’ב金冠’）叶片中蛋白质随节位升高的动态变化。结果表明，随节位升高蛋白质带发生变化，共发现了3条阶段转变特异蛋白质带，分子量分别为55kD、19kD和17kD。其中55kD蛋白质表现为定性变化，有5株实生树在36～75节出现，到101～126节消失；19kD蛋白质在实生树低节位含量高，在86—100节之后含量突然降低；17kD蛋白质在实生树低节位含量低，随着植株的发育蛋白质在36—50节含量突然增加并保持稳定，到91～105节后含量突然下降。认为这3种蛋白质是苹果实生树阶段转变的特异蛋白质。
- 曾广娟李春敏张新忠田义陈东玫赵永波董文轩
- 关键词：苹果蛋白质
- 适于SDS-PAGE分析的苹果叶片蛋白质提取方法被引量：24
- 2009年
- 为探索苹果叶片蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析的样品制备方法,比较了三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法、改良的Tris-HCl法、酚-甲醇/醋酸铵沉淀法、二硫苏糖醇(DTT)/丙酮法及Tris-HCl法等5种蛋白质的提取方法。制备的样品经SDS-PAGE分离采用银染显色。结果表明,改良的Tris-HCl法在加大PVPP用量和蛋白质提取缓冲液的基础上,将丙酮沉淀蛋白质的时间由30 min增加到1 h,使蛋白质的得率最高为3.243μg/μL,上样量5μL得到的蛋白质条带数量最多,条带最清晰为41条。利用这一改良方法对苹果实生树不同节位蛋白质的动态变化进行了研究,共发现6条蛋白质差异带,分子量分别为71.9,60.5,52.6,41.1,35.3,18.5 kDa,条带清楚,背景清晰。因此,改良的Tris-HCl法适用于苹果叶片的SDS-PAGE分析。
- 曾广娟李春敏张新忠陈东玫赵永波董文轩
- 关键词：苹果蛋白质提取
- 苹果实生树嫩芽阶段转变相关蛋白质的SDS-PAGE分析被引量：1
- 2009年
- 利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(SDS-PAGE)分析了5株苹果杂种实生树(红玉×金冠)嫩芽中蛋白质含量随节位升高的动态变化。结果表明,随节位升高蛋白质带发生变化,共发现6条阶段转变相关蛋白质带,分子量估算值分别为17.5、19、33、38、51和55 ku。其中55 ku蛋白质表现为定性变化,随着节位的升高,46节出现,之后保持不变,到达125节后又突然消失。17.5、19、33、38和51 ku等5种蛋白质是定量变化。17.5、33、38和51 ku等4种蛋白质在低节位时含量较低,到达一定节位时突然升高,到达较高节位时又突然降低;19 ku蛋白质在5株实生树上的变化趋势不一致,但定量变化的临界点与上述5种蛋白质相同。
- 滕云龙李春敏张新忠陈东玫曾广娟赵永波董文轩
- 关键词：苹果蛋白质
- 适于双向电泳分析的苹果叶片蛋白质提取方法被引量：15
- 2009年
- 为了探索适用于双向电泳（2-DE）分析的苹果叶片蛋白质提取方法,比较了三氯乙酸（TCA）/丙酮沉淀法、二硫苏糖醇（DTT）/丙酮法、Tris-HCl提取法和改良的Tris-HCl提取法等4种蛋白质提取方法。以7cm、pH3-10的线性固相pH梯度（immobilized pH gradient,IPG）胶条作为第一向电泳,以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）（12.5%的分离胶）作为第二向电泳,对提取物进行2-DE分离,采用银染显色。结果表明,上述4种方法在2-DE图谱上分别得到140,215,181和616个蛋白质点。其中以改良的Tris-HCl提取法得到的蛋白质点数最多,且背景清晰、图谱上没有明显的横纵条纹。为了进一步验证改良的Tris-HCl提取法的有效性,用18cm、pH3-10的线性IPG胶条和12.5%的分离胶对提取的苹果叶片蛋白质进行2-DE分离,考马斯亮蓝R-250染色,共检测到455个蛋白质点,其相对分子质量主要分布在14000-66000范围内,图谱背景清晰,再次证明应用该方法制备的样品适用于双向电泳分析,可用于苹果叶片的蛋白质组学分析。
- 曾广娟李春敏张新忠滕云龙董文轩
- 关键词：双向电泳苹果叶片蛋白质组学分析
