国家重点基础研究发展计划(2003CB515507)
- 作品数：25 被引量：108H指数：6
- 相关作者：陈规划杨扬蔡常洁陆敏强李华更多>>
- 相关机构：中山大学附属第三医院中山大学广东省人民医院更多>>
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- 冬凌草甲素对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用被引量：7
- 2006年
- 目的研究冬凌草甲素对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用。方法以人急性早幼粒细胞白血病(APL)患者的骨髓原代细胞为研究对象,以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的白血病细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪、台盼蓝染色及Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡。结果冬凌草甲素体外可明显地抑制白血病原代细胞的增殖,并能诱导细胞发生凋亡,而且呈现出明显的量-效与时-效关系。结论冬凌草甲素能有效地抑制APL细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,是一种潜在的抗白血病药物。
- 张俊峰刘加军陈规划刘培庆林东军肖若芝李旭东黄仁魏
- 关键词：冬凌草甲素白血病原代细胞细胞凋亡
- 建立符合肝癌肝移植术后肝癌复发规律的大鼠模型被引量：10
- 2006年
- 【目的】建立能反映肝癌肝移植特点的肝癌复发动物模型。【方法】选用Wistar大鼠,实验组大鼠给予肝移植术后常规联合免疫抑制方案(MP+CSA),对照组仅同法使用生理盐水,两组均接受经门静脉系统接种walker-256肿瘤细胞株手术,观察60d,死后剖腹探查取病理检查。【结果】实验组手术时间为(22.6±0.6)min,对照组为(22.1±0.7)min,两组间差异无统计学意义(P>0.05);实验组生存时间为(14.8±2.3)d,对照组为(40.9±5.3)d,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。实验组大鼠体质量减轻量(53.5±2.6)g,较对照组体质量减轻量(34.6±5.8)g差异有统计学意义(P<0.05);实验组大鼠肿瘤复发率为95%(19/20),对照组为40%(8/20),实验组大鼠肿瘤的复发率明显高于对照组大鼠(P<0.05)。【结论】该模型能够有效模拟肝癌肝移植术后肿瘤复发的主要特征,可以作为研究肝癌肝移植术后肿瘤复发的理想大鼠模型。
- 陈颖华蔡常洁陆敏强郭中敏杨扬陈规划
- 关键词：肝癌肝移植复发
- 雷帕霉素对肝癌肝移植术后复发影响的实验研究被引量：2
- 2008年
- 【目的】探讨雷帕霉素对肝癌肝移植术后复发影响。【方法】应用MTT细胞增殖实验观察雷帕霉素对walker-256肿瘤细胞增殖的影响;应用流式细胞仪观察雷帕霉素对walker-256肿瘤细胞周期的影响;应用荧光定量RT-PCR观察雷帕霉素walker-256肿瘤细胞VEGFmRNA表达的影响。观察雷帕霉素对免疫抑制肝转移癌大鼠模型肿瘤生长情况、肿瘤组织PCNA指数、肿瘤复发率及生存情况的影响。【结果】MTT细胞增殖实验示雷帕霉素对walker-256肿瘤细胞有抑制作用,IC50为9.60ng/mL;细胞周期检测示雷帕霉素组G1/G0期比例为55.2%±0.1%较对照组(45.2%±0.4%)高(P<0.05);雷帕霉素组VEGFmRNA表达为(4.50±0.13)×10-2较对照组[(70.8±1.3)×10-2]低(P<0.05)。雷帕霉素组荷瘤大鼠荷瘤肝重为(12.5±0.2)g,较对照组[(14.4±0.3)g]轻,两组间差别有统计学意义(P<0.05);雷帕霉素组荷瘤大鼠荷瘤肝质量比为(61.3±0.6)×10-3,较对照组[(70.8±1.3)×10-3]小,两组间差别有统计学意义(P<0.05);雷帕霉素组大鼠肿瘤复发率为90%,对照组为95%,两组比较差异无统计学意义;雷帕霉素组生存时间为(26.5±2.5)d,对照组为(14.8±2.3)d,两组间差别有统计学意义(P<0.05)。雷帕霉素组大鼠PCNA指数为64.1%±2.1%,较对照组(80.8%±1.0%)低,差别有统计学意义(P<0.05)。【结论】虽然雷帕霉素对降低免疫抑制下的肿瘤复发率作用不明显,但能明显抑制肿瘤生长速度,延长带瘤生存时间。
- 陈颖华蔡常洁陆敏强郭中敏陈规划
- 关键词：雷帕霉素肝癌肝移植复发
- 西罗莫司对肝癌肝移植术后肿瘤复发的抑制作用被引量：1
- 2007年
- 目的探讨联合西罗莫司的联合免疫抑制方案对肝癌肝移植术后肿瘤复发的抑制作用。方法选用Wistar大鼠40只，建立大鼠肝癌肝移植术后肿瘤复发模型，实验组予（SRL＋MP＋CSA），对照组（MP＋CSA），观察60d，死后剖腹探查取病理检查。对比结果。结果实验组荷瘤大鼠荷瘤肝重为（12．5±0．2）g，较对照组（14．4±0．3）g轻，差异有统计学意义（P〈0．05）；实验组荷瘤大鼠荷瘤肝重比为（0．0613±0．0006），较对照组（0．0708±0．0013）小，差异有统计学意义（P〈0．05）；实验组复发率为90％，对照组为95％，差异无统计学意义（P〉0．05）；实验组生存时间为（25．0±1．9）d，对照组为（14．8±2．3）d，差异有统计学意义（P〈0．05）。实验组大鼠PCNA指数为（64．1±2．1）％，较对照组（80．8±1．0）％低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论采用联合西罗莫司的联合免疫抑制方案虽然对肿瘤复发率改善不明显，但能够有效抑制肿瘤的生长速度、延长带瘤生存时间。
- 陈颖华蔡常洁陆敏强郭芬芬杨扬陈规划
- 关键词：西罗莫司肝移植复发
- 稳定大鼠肝移植模型的规范及移植肝灌注方式比较被引量：4
- 2006年
- 目的总结建立大鼠原位肝移植稳定模型的规范和提高成功率的措施,比较经门静脉灌注和经腹主动脉灌注对移植肝功能的影响。方法手术显微镜下,用改良的二袖套法进行100例大鼠原位肝移植,并依据灌注方式分组:经门静脉灌注和经腹主动脉灌注组(n=50)。检测术后肝功能,观察组织病理学改变、术后生存率以及手术并发症。结果两组组织病理学表现相同。手术成功率分别为98%(49/50)和96%(48/50),3月存活率分别为93.5%(29/31)和93.3%(28/30),术后肝功能、手术成功率和3月存活率差异无显著性(P>0.05)。结论供肝经门静脉灌注和经腹主动脉灌注均可采用,应根据研究目的选择适当肝移植模型。熟练的显微外科技术、规范细致的手术操作、缩短无肝期时间是提高成功率、减少术后并发症的关键。
- 许赤杨扬易述红李玺张琪陈规划
- 关键词：肝移植动物模型显微外科手术灌注方式
- 环孢素A对阿霉素治疗肝癌影响的实验研究被引量：2
- 2006年
- 目的探讨环孢素A（Cyclosporine A，CsA）对阿霉素（Adriamycin，ADM）治疗肝癌的影响。方法培养HepG2肝癌细胞，分成对照、CsA、ADM、CsA＋ADM组，分别处理24V～48h，采用MTT法检测细胞增殖、流式细胞术测定细胞周期及细胞凋亡。结果肝癌细胞增殖能力48h明显受到抑制，CsA在5～1000μg／L随浓度增加，凋亡率逐渐增加，超过该浓度时，则出现凋亡率减低。CsA、及ADM均使G2期显著延长；CsA对HepG-2肝癌细胞有促进细胞凋亡作用．与ADM有协同促调亡作用。结论环孢素A对肝癌增殖有抑制作用，使G2期阻滞，促凋亡。环孢素A联合阿霉素对肝癌治疗有协同作用。
- 张俊峰陈规划陆敏强李华蔡常洁杨扬陈伟
- 关键词：肝细胞癌环孢菌素阿霉素细胞增殖
- 小鼠端粒酶蛋白亚单位真核表达载体的构建和序列测定
- 2006年
- 目的:克隆小鼠端粒酶蛋白亚单位(mTERT)的cDNA,构建真核表达载体并进行序列测定。方法:从肝癌细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增mTERT的基因编码区序列,将序列定向克隆至真核表达载体pAC,并进行序列测定。结果:获得mTERT编码区3 369 bp的cDNA片段,用PCR和限制性内切酶分析鉴定,表明获得重组质粒pAC-mTERT。通过对mTERT编码区cDNA序列测序证实其与GenBank中的已知序列一致。结论:成功克隆了mTERT编码区序列,并构建了其真核表达载体,为以TERT为基础的肿瘤生物治疗奠定基础。
- 姜楠陈规划陆敏强杨扬蔡常洁李华许赤易述红汪根树易慧敏冯炼强
- 关键词：寡核苷酸序列分析真核表达载体
- HLA-E siRNA沉默肝癌细胞HLA-E基因的表达被引量：3
- 2010年
- 目的针对HLA-EmRNA靶序列不同位点,设计合成多个siRNA链,定量分析其对HLA-E(+)肝癌BEL-7402细胞的基因沉默效率,筛选最佳抑制效果的siRNA。方法用IFN-γ(5×105IU·L-1)诱导BEL-7402细胞表达HLA-E基因,经流式细胞技术纯化后作为靶细胞。设计并合成3条HLA-E siRNA链(A、B、C),将各siRNA(0.1mmol·L-1)经脂质体Lipofectamin 2000转染至靶细胞。采用细胞免疫荧光、流式细胞技术、Western杂交、实时PCR等定量方法,比较48h后各siRNA的基因沉默效果,并观察HLA-E基因沉默对NK肿瘤细胞杀伤的影响。结果与空白对照、非特异组相比,3组(A、B、C组)HLA-E siRNA均明显抑制细胞HLA-E抗原、蛋白产物、mRNA、细胞表面HLA-E分子的表达(P<0.01),B、C组抑制效果接近90%,高于A组(P<0.01)。A、B、C组NK肿瘤杀伤率升高(P<0.01),而B、C组肿瘤杀伤效果高于A组(P<0.01)。结论经筛选的HLA-EsiRNA能特异、高效沉默肝癌细胞HLA-E基因表达,可能抑制其非经典HLA-Ⅰ途径免疫逃避,为肝癌"基因-免疫"治疗提供新的治疗策略。
- 方天翎李华张彤曾宪成陈规划
- 关键词：小分子干扰RNAHLA-ENK靶向性
- 肌注型HBIg预防肝移植术后乙肝病毒再感染的疗效分析被引量：3
- 2006年
- 目的评价小剂量肌肉注射剂型乙肝免疫球蛋白(HBIg)联合核苷类抗病毒药物预防肝移植术后乙肝病毒(HBV)再感染的疗效。方法对2003年9月至2004年12月在中山大学附属第三医院肝移植中心施行肝移植术且符合研究标准的130例病人进行前瞻性研究。采用肌肉注射剂型HBIg联合核苷类抗病毒药物预防术后乙肝病毒再感染,术后监测HBV再感染情况并同国内外研究进行比较。结果130例中128例术后血清HBsAg转为阴性并检测到HBsAb,平均随访12·2个月,HBV再感染率为6·3%(8/128);对照组再感染率为3·1%,两组比较差异无显著性(P>0·05)。结论肌注型HBIg联合核苷类抗病毒药物能有效预防肝移植术后HBV再感染。
- 陆敏强蔡常洁赵辉杨扬许赤李华易述红易慧敏汪根树陈规划
- 关键词：肝移植再感染
- 重组人硫氧化还原蛋白对原代培养肝细胞的影响被引量：1
- 2005年
- 目的探讨重组人硫氧化还原蛋白(rhTrx)对原代培养肝细胞生存生长的影响。方法逆转录聚合酶链反应法扩增出hTrx cDNA,并在原核表达系统中表达。IgM还原实验和胰岛素还原实验测定rhTrx的生物学活性。3H胸腺嘧啶核苷(TdR)掺入试验和细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测rhTrx对SD大鼠原代培养肝细胞生存生长的影响。结果克隆出hTrx开放阅读框cDNA并获得高效表达,可溶性目的蛋白回收率为23．20％,蛋白纯度为96．30％。IgM还原和胰岛素还原实验均显示制备的rhTrx具有较好的生物学活性(t=7．5860,P<0．01)。加入rhTrx培养的肝细胞生长旺盛,并维持了良好的细胞形态。rhTrx可促进原代培养肝细胞的DNA合成,并以剂量依赖方式明显抑制乙醇造成的肝细胞损害。结论制备出具有生物学活性的rhTrx,hTrx对原代培养肝细胞的生存具有促进作用。
- 李华汪根树陈规划陆敏强杨扬蔡常洁许赤易述红
- 关键词：肝细胞基因表达
