广西壮族自治区科学研究与技术开发计划(0630006-5E)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 相关作者：何敏臧宁李刚廖明张钦乐更多>>
- 相关机构：广西医科大学广西山区综合技术开发中心广西医科大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划国家自然科学基金广西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 巴马长寿人群血清长寿标记蛋白的鉴定及血脂分析被引量：2
- 2011年
- 目的筛选广西巴马长寿老人的血清特异蛋白,并进行分离及鉴定,探讨相关脂蛋白与长寿的关系。方法以巴马长寿区长寿老人62例为长寿组,巴马非长寿区无长寿家族史的健康对照者41例为对照组,用表面加强激光解析电离化飞行-时间质谱检测2组人群的血清蛋白表达谱,并分析差异蛋白;一维电泳液相色谱-质谱技术分离并鉴定目的差异蛋白;再选择包括长寿组的入选者257例长寿老人为长寿老人组,包括对照组的入选者123例非长寿老人为非长寿对照组,检测2组HDL-C和TG水平。结果分子量在1000～10 000,共检测长寿组与对照组表达差异的蛋白有25个(P<0.05),在长寿组高表达的4个蛋白的相对表达量比值>2;对蛋白5336.81进行分离鉴定,其可能与血脂代谢密切相关的载脂蛋白(apo)C-Ⅱ酶解片段;长寿老人组的HDLC水平高于非长寿对照组(P<0.01),2组的TG水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论巴马长寿老人与巴马非长寿区对照人群的血清蛋白图谱存在差异;apoC-Ⅱ蛋白在巴马长寿老人中的适度高表达,可能是其出现动脉粥样硬化、冠心病、脑血栓等心脑血管疾病发生较少的原因之一。
- 容敏华张志勇臧宁廖明覃健农清清吕泽平黄和明何敏
- 关键词：脂蛋白类质谱分析法血脂异常
- 基于质谱鉴定的肝癌标志物的血清iTRAQ分析被引量：7
- 2011年
- 目的:采用核素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)技术分析已报道的基于质谱鉴定的肝癌标志物在血清中的表达水平。方法:通过PubMed查阅2003年1月-2010年8月发表的,采用差异蛋白筛选结合基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱技术(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-fight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)鉴定的有关肝癌生物标志物的文献;同时运用iTRAQ标记技术结合MALDI-TOF-MS串联质谱技术,对20例肝癌患者与20例健康对照的血清进行差异蛋白组学分析。将文献报道的肝癌标志物数据与肝癌血清差异蛋白组学数据进行比对。结果:通过文献检索共获得符合要求的文献22篇,涉及肝癌相关标志物262个。肝癌血清差异蛋白组筛选出表达有显著差异的蛋白51个,其中在肝癌血清中高表达差异蛋白23个,低表达差异蛋白28个;与文献报道吻合的标志物8个,其中与文献报道表达水平一致的差异蛋白为6个[α-1-抗胰蛋白酶(alpha-1-antitrypsin,AAT)、载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)、蛋白血浆铜蓝蛋白(ceruloplasmin,CP)、甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)、补体C3(complement C3,C3)和血清淀粉状蛋白P片段(serum amyloid P-component,APCS)]。结论:血清中鉴定获得的6个与文献报道一致的差异蛋白可能是潜在肝癌标志物,值得进一步深入探讨研究。
- 张钦乐杨小丽李刚何晓臧宁胡艳玲张学荣何敏
- 关键词：生物标志物核素标记串联质谱
- 利用亲和层析法检测乙酰化蛋白的研究
- 2012年
- 目的建立一种快速、相对定量检测乙酰化蛋白方法，并初步应用其检测药物作用后Jurkat细胞乙酰化总蛋白水平。方法用不同浓度的曲古菌素A（TSA）诱导Jurkat细胞蛋白高乙酰化后，利用抗乙酰化赖氨酸抗体亲和层析柱富集纯化乙酰化总蛋白，经酸洗脱后固定于酶标板，ELISA法检测乙酰化蛋白相对总量，并用基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱仪（MALDI—TOF／TOF）分析验证其成分；同法检测不同浓度的没食子酸、大黄素、单乙酰化大黄素A三种药物作用Jurkat细胞后乙酰化总蛋白水平的变化，筛查诱导Jurkat细胞蛋白乙酰化药物。结果1μmol／LTSA作用于4×10^5Jurkat细胞24h，乙酰化总蛋白相对水平最高。MALDI—TOF／TOF分析显示，TSA诱导Jurkat细胞产生的乙酰化蛋白共有22种，其中15种为乙酰化组蛋白。没食子酸、大黄素、单乙酰化大黄素A作用Jut-kat细胞后所导致的乙酰化程度不同，以1μmol／L浓度TSA为阳性对照组，无药物为空白对照组，35．09μmol／L和17．54μmol／L大黄素处理的Jurkat细胞乙酰化蛋白相对水平分别为4．3％和14．2％；1．47μmol／L和2．94μmol／L没食子酸处理组乙酰化蛋白相对水平分别为28．7％和11．5％；152．91μmol／L和30．58μmol／L单乙酰化大黄素组分别为22．O％和3．6％；其中1．47μmol／L没食子酸所诱导的乙酰化蛋白水平最高。结论初步建立了活细胞基础上纯化富集并检测乙酰化总蛋白水平的方法，该法可快速、简便的筛选以组蛋白去乙酰化酶为靶点的抗癌药物。
- 郑力钟艳平萧浩周怡罗蓉李洪涛李刚廖明何敏
- 关键词：组蛋白类曲古菌素A色谱法亲和JURKAT
- Glypican-3在肝细胞癌中的表达及其临床的意义被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨肝癌患者组织和血清中Glypican-3基因的表达及其在肝癌诊断中的意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法检测Glypican-3基因在70例人肝癌组织及癌旁肝组织中的表达,并用ELISA法对60例肝癌患者、14例正常人、13例肝炎及肝硬化患者的血清标本进行Glypican-3蛋白检测。分析血清Glypican-3水平与肝癌患者的血清AFP水平、肿瘤个数、肿瘤直径、临床分期、有无术后复发、有无肝外转移、有无门静脉癌栓、病理分级等指标的关系。结果:Glypican-3 mRNA在肝癌组织中的阳性率为82.85%(58/70),明显高于癌旁组织的阳性率34.28%(24/70)(P<0.01);Glyp-ican-3蛋白在肝癌组织中的阳性率为74.03%(52/70),明显高于癌旁组织的阳性率54.03%(38/70)(P<0.05);血清中Glyp-ican-3阳性临界水平定为60pg/mL时,在肝癌患者血清中的阳性率为66.67%(40/60);在肝炎、肝硬化组血清中的阳性率为15.38%(2/13);在14例正常人血清中不表达。Glypican-3在肝癌血清中的阳性率明显高于在肝炎、肝硬化组,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。Glypican-3在肝癌患者血清中的表达与临床分期、肝外转移、术后复发及血清AFP水平相关(P<0.05),而与门静脉癌栓、肿瘤个数、肿瘤大小、HBsAg及肿瘤分化程度无明显关系(P>0.05)。同时检测血清中的Glypi-can-3和AFP,所得阳性率明显高于单独检测一种的阳性率(P<0.05)。结论:Glypican-3在肝癌组织和血清中高表达,可作为肝癌血清标志物;其与AFP联合检测可有效的提高肝癌的诊断率;有可能作为监测肝癌愈后及预防复发的指标。
- 曹骥杨春余彬彬苏建家班克臣欧超段小娴李瑗朱波
- 关键词：肝细胞癌GLYPICAN-3ELISART-PCR免疫组织化学
