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教育部留学回国人员科研启动基金(2007XG47)
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
相关作者:
王英杰
张世昌
刘卫生
刘涛
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相关机构:
第三军医大学西南医院
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发文基金:
教育部留学回国人员科研启动基金
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刘卫生
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张世昌
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王英杰
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第三军医大学...
年份
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2008
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模拟微重力条件下小鼠拟胚体形成及分化的初步观察
被引量:4
2008年
目的研究模拟微重力条件下小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESc)拟胚体(embryoid bodies,EBs)的形成及分化。方法胰酶消化普通培养的小鼠胚胎干细胞,调整细胞数为1×10^6·ml^-1,移入可模拟微重力的旋转型生物反应器内进行培养,显微镜动态观察鼠EBs的形成,苏木精-伊红染色观察ESc的组织细胞分化情况,检测培养过程中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的漏出量。取不同时相的EBs,接种6孔培养板培养3~5d,倒置相差显微镜观察EBs来源细胞的分化。结果生物反应器旋转培养24h即可肉眼观察到大量多细胞聚集体形成,相差显微镜和立体显微镜下发现,72h后细胞聚集体进一步形成均一的EBs。随培养时间延长EBs体积不断增大,并不断有新的EBs出现。HE染色显示,EBs中的ESc呈现多组织多细胞分化特征,培养后期(12d以后)较大EBs中心有不同程度的坏死,伴LDH漏出量的明显升高。接种EBs于6孔培养板后,镜下观察到不同类型的细胞,如内皮样细胞、成纤维样细胞、肝细胞样细胞、血管样结构以及可自发性搏动的心肌样细胞。结论ESc在模拟微重力条件下可大量快速形成EBs,伴有不同类型的组织细胞分化。旋转型生物反应器可作为ESc研究的有用工具。
刘卫生
王英杰
刘涛
张世昌
关键词:
胚胎干细胞
拟胚体
分化
生物反应器
微重力
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