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人类精子高质量RNA提取方案的优化被引量：7: 2013年; 目的:人类精子所含RNA极少量,且由于精子中圆形细胞存在,使得分离精子RNA具有一定的挑战性。本研究旨在优化人类精子RNA的提取方案。方法:利用40%的单层梯度液及精子洗涤液纯化精子,使用TRIzol试剂和RNeasy Mini Kit提取RNA,反转录精子RNA,以cDNA为模板扩增PRM2、c-Kit、CD45、CDH1基因来确定所提精子RNA中是否存在基因组DNA或体细胞RNA的污染。结果:利用3倍体积的40%单层梯度液及精子洗涤液可以完全去除精液中体细胞的污染,利用TRIzol试剂提取RNA比RNeasy Mini Kit更有效。结论:人类精子中含有微量RNA,此方法既经济又有效,可以提取高质量的精子RNA,为人类男性生殖的功能基因组研究奠定基础。; 于艳管群张斌闻姬杨丽霞菅福琴杨伟娜孙伟; 关键词：精子 RNA 男性不育功能基因

卵丘细胞分泌的趋化因子5与辅助生育结局的相关性: 2014年; 目的探讨卵丘细胞分泌的趋化因子5能否预测卵母细胞质量和辅助生育妊娠结局。方法收集75个体外受精周期中获得的562枚卵母细胞的卵泡液、受精液和其后的胚胎培养液,根据卵母细胞的发育命运进行分组:A组为未受精卵母细胞;B组受精后发育为非优质胚胎;C组受精后发育为优质胚胎;D组受精后发育为妊娠胚胎。ELISA方法测定4组卵泡液、受精液和胚胎培养液中CCL5的含量,并将结果进行比较。并分析卵母细胞成熟与CCL5水平的关系。结果 A组卵泡液和受精液中CCL5的含量最低。C组与B组卵泡液和受精液中CCL5的含量比较有显著差异,但与D组比较无明显差别。B、C、D 3组胚胎培养液中CCL5含量比较无明显差异。MII期卵子卵泡液中CCL5含量明显高于MI期和GV期卵子。结论卵丘细胞分泌的CCL5水平与卵母细胞的成熟和妊娠结局相关,可为选择移植胚胎和预测妊娠结局提供新的参考标准。; 孔风云张琪瑶于艳管群菅福琴杨丽霞孙伟; 关键词：卵丘细胞卵母细胞

钙黏蛋白1在少弱精子症精子中的表达被引量：1: 2015年; 目的:通过检测钙黏蛋白1(CIB1)在少弱精子症患者精子中的表达,探讨其与少弱精子症发病机制的关系。方法:收集25例少弱精子症患者精液标本,其中少弱精子组13例和弱精子组12例,另同期收集正常对照组19例。分别采用半定量PCR(RT-PCR)及荧光定量PCR(qRT-PCR)方法和Western印迹检测,并比较各组精子中CIB1和周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)的mRNA及蛋白表达量。结果:1RT-PCR和qRT-PCR检测表明:在少弱精子组、弱精子组和正常对照组的CIB1mRNA的相对表达量均呈上升趋势,而CDK1 mRNA的相对表达量均呈下降趋势,CIB1 mRNA与CDK1 mRNA在3组间两两比较,除qRT-PCR检测中少弱精子组与弱精子组差异无统计学意义(P>0.05),其余组间比较差异均有统计学意义(P<0.01)。2CIB1蛋白的相对表达量在少弱精子组、弱精子组和正常对照组中呈上升趋势,3组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05;P<0.01);而CDK1蛋白的相对表达量呈下降趋势,其中少弱精子组与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CIB1可能通过CDK1通路参与少弱精子症的发病机制。; 于艳孙伟菅福琴杨丽霞于庆孔风云管群; 关键词：男性不育少弱精子症精子

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山东省自然科学基金(ZR2012HL21)