国家科技支撑计划(2008BADB2B02-06)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：张冬杰汪亮别墅孙洪涛更多>>
- 相关机构：东北农业大学黑龙江省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 民猪ZFAND5基因的克隆与真核表达载体构建被引量：1
- 2011年
- 根据NCBI上已公布野猪的ZFAND5序列,设计上下游引物,PCR扩增,构建真核表达载体,酶切鉴定并测序。克隆并分析ZFAND5(Zinc finger,AN1-type domain5)基因序列,构建ZFAND5基因的真核表达载体,为转染细胞提供基础。通过研究首次获得了民猪的ZFAND5基因的全序列及其完整的cDNA序列,对测序结果比对后发现,ZFAND5基因的2个外显子中共发现4个点突变,其中643点碱基突变造成HhaⅡ酶切位点的缺失,对所构建的真核表达载体pcDNA3.1(-)-ZFAND5酶切鉴定并测序,证明插入片段长度为262bp,与预期结果一致。初步研究了ZFAND5基因功能及多态性,成功构建pcDNA3.1(-)-ZFAND5真核表达载体,为细胞水平上的表达和功能研究奠定了基础。
- 孙洪涛别墅张冬杰汪亮刘娣
- 关键词：民猪多态性真核表达载体
- 猪TPST1基因的克隆、序列分析及真核表达载体的构建被引量：1
- 2011年
- 酪氨酸硫化转移酶(Tyrosylrotein sulfotransferase,TPST)在酪氨酸硫化修饰过程中起调节作用。试验参照人、鼠、牛等动物的TPST1 mRNA全长序列设计引物,通过电子克隆结合RT-RCR的方法首次克隆获得包括完整CDS区的猪TPST1基因cDNA序列(HQ439987),分析其核苷酸序列及其编码蛋白质分子结构特征。结果表明,猪TPST1序列全长1 543 bp,包含1 113 bp的完整开放阅读框,编码370个氨基酸。多序列比对和系统进化分析表明,该基因编码蛋白质与牛(97.6%)、小鼠(96.8%)、大鼠(97%)、人(97.03%)等物种TPST1蛋白质具有较高的一致性。蛋白质序列预测分析发现,猪TPST1氨基酸序列理论等电点(pI)为9.0,相对分子质量(MW)为42.13 ku。
- 别墅孙洪涛张冬杰汪亮刘娣
- 关键词：民猪
