中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0302012011)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 相关作者：赵世华郭巍田志革相文华潘佳亮更多>>
- 相关机构：东北农业大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所新疆农业大学更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项“十二五”国家科技计划农村领域公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 抗马动脉炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及B细胞抗原表位的鉴定
- 2013年
- 为鉴定马动脉炎病毒(EAV)N蛋白的抗原表位,利用原核表达系统表达N蛋白,用其免疫6周龄BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合获得杂交瘤细胞,通过以重组N蛋白为包被抗原的间接ELISA方法筛选出2株能稳定分泌抗N蛋白的单克隆抗体(MAb),分别将其命名为2B3和2B9,其重链属于IgG1,轻链属于κ链。Western-blot证明,2株MAbs均能识别重组N蛋白。间接免疫荧光(IFA)试验证明,2株MAbs均与EAV呈阳性反应。用肽扫描法将N基因截短为具有相互部分重叠的11段,表达带HIS标签的重组蛋白,与MAb 2B3和MAb 2B9进行Western-blot和ELISA反应后,针对表位序列11 ASFRNGRRRQPTSYND26,进一步通过合成短肽对2株MAbs进行精确定位;结果表明,2B3识别的抗原表位为18 RRQPTSYND26,2B9针对的抗原表位为18 RRQPTSYND26。本研究结果为建立EVA的血清学检测方法及研究N蛋白的结构和功能奠定了基础。
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- 关键词：马动脉炎病毒单克隆抗体表位
- 检测马疱疹病毒4型抗体间接ELISA方法的建立及应用被引量：1
- 2014年
- 为建立检测马疱疹病毒4型(EHV4)抗体的间接ELISA方法,本研究以原核表达的具有型特异性抗原表位的gG蛋白为检测抗原,经条件优化,成功建立检测EHV4抗体的间接ELISA方法,对该方法进行特异性及重复性试验。结果表明,重组4型gG蛋白仅与EHV4阳性血清发生反应,不与马疱疹病毒1型(EHV1)阳性血清发生反应;组内及组间变异系数均小于10%。采用建立的方法与进口试剂盒对不同省份送检的马血清进行检测比较,两者阳性和阴性符合率均在90%以上。本研究建立的间接ELISA方法为检测EHV4抗体及流行病学调查奠定基础。
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- 关键词：间接ELISA
- 马疱疹病毒1型抗体间接ELISA检测方法的建立
- 2013年
- 以原核表达的具有型特异性抗原表位的马疱疹病毒1型(EHV1)gG蛋白作为检测抗原,经条件优化,成功建立了检测EHV1抗体的间接ELISA方法,并对该方法进行了特异性及重复性试验。结果表明:重组EHV1gG蛋白仅与EHV1阳性血清发生反应,不与EHV4阳性血清发生反应;组内及组间变异系数均小于10%。采用建立的方法与进口试剂盒对不同省份送检的马血清进行检测结果比较,两者的阳性和阴性符合率均达到90%以上。表明,建立的间接ELISA方法可以用于检测EHV1抗体。
- 田志革郭巍赵世华潘佳亮冉多良相文华曲娟娟
- 关键词：间接ELISA
