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广东省科技计划工业攻关项目(2006B36008002)

作品数:1 被引量:4H指数:1
相关作者:岳彩峰狄飚丘立文车小燕潘玉先更多>>
相关机构:广州市疾病预防控制中心南方医科大学南方医院南方医科大学更多>>
发文基金:广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇登革病毒
  • 1篇登革热
  • 1篇登革热病毒
  • 1篇酶联
  • 1篇酶联免疫
  • 1篇酶联免疫吸附
  • 1篇酶联免疫吸附...
  • 1篇酶联免疫吸附...
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫吸附
  • 1篇膜蛋白质类
  • 1篇结构蛋白
  • 1篇非结构蛋白
  • 1篇包膜蛋白
  • 1篇病毒
  • 1篇病毒包膜蛋白
  • 1篇病毒包膜蛋白...
  • 1篇病毒非结构蛋...

机构

  • 1篇广州市疾病预...
  • 1篇南方医科大学
  • 1篇南方医科大学...

作者

  • 1篇丁彦青
  • 1篇蔡建飘
  • 1篇温坤
  • 1篇潘玉先
  • 1篇车小燕
  • 1篇丘立文
  • 1篇狄飚
  • 1篇岳彩峰

传媒

  • 1篇中华预防医学...

年份

  • 1篇2009
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
非结构蛋白1抗原捕获酶联免疫吸附法评价登革病毒抗体中和活性被引量:4
2009年
目的在获得具有中和活性的针对Ⅰ型登革病毒(dengue virus serotype Ⅰ,DENV-1)的抗体基础上,评价已建立的非结构蛋白Ⅰ(nonstructural protein 1,NS1)抗原捕获酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分析抗体中和活性的可行性,为中和抗体的筛选和疫苗效果的评价提供一个更为快速、简便的检测方法。方法使用重组DENV-1包膜蛋白Ⅲ区(envelope protein domain Ⅲ,EDⅢ)免疫5只BALB/c小鼠制备单克隆抗体(简称单抗),采用间接ELISA、间接免疫荧光法(immunofluorescence assay,IFA)和免疫印迹法(Western Blot)对单抗进行筛选及鉴定;同时用该重组蛋白免疫1只新西兰兔,制备多克隆抗体血清;以传统噬斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test,PRNT)作为参比方法,采用NS1抗原捕获ELISA对所获抗体进行中和活性检测。结果获得4株针对DENV-1 EDⅢ单抗和1份兔多抗血清,且被PRNT试验证明均具有中和活性,四株单抗腹水(1A1、1B3、3D3、9D6)和兔多抗血清中和效价分别为1:1024、1:512、1:256、1:4096和1:4096。使用NS1抗原捕获EHSA法检测不到PRNT中和效价最低的3D3抗体对DENV-1有中和能力,而检测其余3株单抗(1A1、1B3、9D6)和多抗兔血清中和效价均远低于PRNT测定结果,分别为1:32、1:32、1:128和1:128。结论简单、快速的NS1抗原捕获ELISA可用于评价DENV抗体的中和活性,该方法适合于高效价中和抗体的筛选,有望成为评价疫苗效果的方法之一。
温坤丁彦青丘立文潘玉先蔡建飘岳彩峰狄飚车小燕
关键词:登革热病毒病毒包膜蛋白质类酶联免疫吸附测定病毒非结构蛋白质类
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