广东省科技计划工业攻关项目(2006B36008001)
- 作品数:7 被引量:5H指数:2
- 相关作者:曾爱华朱家勇金小宝徐建华杨小蓉更多>>
- 相关机构:广东药学院广东省中医院广东检验检疫技术中心更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目广东省农业攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 贝类GⅠ型扎幌样病毒荧光定量PCR检测
- 2009年
- 目的建立贝类中GⅠ型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法。方法通过用聚乙二醇6000(PEG6000)对贝类中扎幌样病毒进行浓缩,用序列比对软件设计出针对GⅠ型扎幌样病毒保守序列的通用引物与探针,建立GⅠ型扎幌样病毒荧光定量PCR检测方法。结果浓度为10^6-10^4,10^3,10^2-10^1拷贝/μL的GⅠ扎幌样病毒检出率分别为3/3,1/3,0/3,因此,常规逆转聚合酶链反应(RT-PCR)最低检出限为10^3拷贝/μL。此荧光定量PCR方法对贝类中GⅠ型扎幌样病毒检测高度特异,最低检出限可达10^2拷贝/μL,比常规RT-PCR的低1个数量级,即灵敏度高10倍,线性范围为10^2-10^6拷贝/μL,标准曲线的相关系数为0.998 8。结论本研究建立了GⅠ型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法,可用于贝类中GⅠ型扎幌样病毒污染状况及其突发事件的快速定量检测。
- 曾爱华梅寒芳杨小蓉金小宝朱家勇
- 关键词:贝类荧光定量PCR
- 广州水体中人类杯状病毒污染状况检测分析被引量:2
- 2012年
- 目的调查研究广东省广州地区水体中人类杯状病毒(HuCV)的污染情况。方法收集广州地区268份自来水、715份矿泉水、119份生活污水和53份池塘水,用荧光定量PCR方法检测样本中的HuCV及GⅠ、GⅡ型的诺瓦克样病毒(NLVs)和扎幌样病毒(SLVs)。结果生活污水、池塘水、自来水、矿泉水中HuCV总检出率分别为9.24%、11.32%、0、0;生活污水中的GⅠ、GⅡ型的NLVs和SLVs检出率分别为2.52%、7.56%和0;池塘水中的GⅠ、GⅡ型的NLVs和SLVs检出率分别为1.89%、9.43%、0、1.89%;在1例生活污水中检测出GⅠ、GⅡ型NLVs,1例池塘水里同时检测出GⅡ型NLVs、SLVs。结论广州地区生活用水是安全的,但环境水体中存在着HuCV不同基因型的混合污染。
- 曾爱华金小宝朱家勇
- 关键词:基因型污染
- 广州地区贝类中人类杯状病毒感染调查研究
- 2011年
- 从2007年10月-2009年9月,在广州市水产品市场收集127个牡蛎、94个毛蚶、342个花蛤、265个带子,采用荧光定量PCR方法检测人类杯状病毒HuCV的感染,旨在为贝类的安全监控提供基础研究资料。研究结果表明:牡蛎的HuCV阳性检出率最高,为24.4l%(31/127);毛蚶和带子样品中HuCV,4-阳性率分别为11.70%(11/94)和1.89%(5/265);而花蛤中未检出HuCV。牡蛎中存在着人类杯状病毒不同基因型的混合感染。结果还显示贝类中的HuCV感染一般在秋冬季节流行:在2007年10月~2008年2月和2008年10月-2009年2月期间,牡蛎中HuCV总检出率分别为23.08%(12/52)和35.85%(19/53);而在2008、2009年的3月~9月间,牡蛎中均未发现HuCV感染。
- 曾爱华金小宝朱家勇
- 关键词:贝类人类杯状病毒
- 人类杯状病毒医院感染调查研究被引量:1
- 2012年
- 目的调查研究广州地区人类杯状病毒(HuCV)的感染流行特征。方法收集广东省中医院病毒性腹泻粪便标本380份,用荧光定量PCR方法检测样本中的HuCV[包括诺瓦克样病毒(NLVs)和扎幌样病毒(SLVs)]核酸。结果人类杯状病毒总检出率为28.68%,其中NLVs和SLVs检出率分别为22.89%、7.11%;HuCV在4个季度的感染率分别为46.29%、10.09%、6.42%和36.70%;另外,1例样本同时感染了GⅡ型NLVs和GⅡ型SLVs,有4例样本同时感染了GⅠ、GⅡ型NLVs。结论 HuCV是导致广州地区病毒性腹泻的重要病原体之一,高发期集中在第一、四季度,诺瓦克样病毒在HuCV感染中占主导作用;广州地区存在着HuCV不同基因型的混合感染。
- 曾爱华金小宝朱家勇
- 关键词:人类杯状病毒基因型
- 实时荧光定量PCR检测GI型诺瓦克样病毒方法的建立被引量:2
- 2009年
- 目的建立临床粪便中GI型诺瓦克样病毒的实时荧光定量PCR检测方法。方法针对诺瓦克样病毒GI型保守序列,用序列比对软件设计特异性引物与探针,建立诺瓦克样病毒实时荧光定量PCR检测方法。并用常规RT-PCR和本文建立的实时荧光定量PCR对137份临床腹泻标本进行检测。结果该方法对诺瓦克样病毒检测准确,重复性好,标准曲线的线性范围为102~107拷贝,相关系数为0.9991。并且对临床标本的检出率显著高于普通RT-PCR。结论本研究建立的实时荧光定量PCR方法可用于检测临床腹泻粪便标本中的GI型诺瓦克样病毒,从而有效预防和控制该病毒的传染。
- 曾爱华金小宝朱家勇徐建华
- 关键词:实时荧光定量PCR诺瓦克样病毒
- 荧光定量PCR与常规PCR法检测GⅡ型札幌样病毒的比较
- 2012年
- 目的比较荧光定量PCR与常规RT-PCR法检测牡蛎中GⅡ型札幌样病毒的灵敏度与准确性,为该病毒检测提供适用的方法。方法采用荧光定量PCR和RT-PCR方法,分别检测牡蛎样品中的GⅡ型札幌样病毒。结果荧光定量PCR检测的灵敏度可达102拷贝/μl,札幌样病毒呈阳性的牡蛎有6例,阳性率为4.72%(6/127);RT-PCR的灵敏度为103拷贝/μl,札幌样病毒呈阳性的牡蛎有1例,阳性率为0.79%(1/127)。结论与RT-PCR方法比较,荧光定量PCR是更为敏感准确的方法,更适用于牡蛎中GⅡ型札幌样病毒的检测。
- 曾爱华金小宝朱家勇
- 关键词:牡蛎荧光定量PCR