农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室开放课题(LFBCU0714)
- 作品数：1 被引量：7H指数：1
- 相关作者：石存斌刘永奎曾伟伟曾令兵吴淑勤更多>>
- 相关机构：中国水产科学研究院长江水产研究所中国水产科学研究院珠江水产研究所更多>>
- 发文基金：农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室开放课题更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 草鱼呼肠孤病毒HZ08株VP4蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备被引量：7
- 2011年
- 目的原核表达、纯化草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)HZ08株VP4蛋白,并制备其多克隆抗体。方法采用PCR法扩增GCRV HZ08株S6基因部分节段,插入原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达质粒pET-32a-S6,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达。表达的重组蛋白纯化后免疫新西兰白兔,制备多克隆抗体,采用间接ELISA法测定其效价,Western blot鉴定其特异性。结果重组表达质粒经双酶切及测序证实构建正确;表达的目的蛋白相对分子质量约为51 000,表达量占菌体总蛋白的73%,主要以包涵体形式表达,反应原性良好;制备的多克隆抗体效价约为1∶8 000,且具有较高的特异性。结论成功制备了GCRV HZ08株VP4蛋白高效价多克隆抗体,为VP4蛋白功能的深入研究、抗原表位分析、草鱼出血病诊断方法的建立及相关基因工程疫苗的研发奠定了基础。
- 曾伟伟王庆张乐生刘宝芹刘永奎石存斌曾令兵吴淑勤
- 关键词：呼肠孤病毒草鱼多克隆抗体
