国家自然科学基金(39480022)
- 作品数：10 被引量：38H指数：4
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- 分枝杆菌重组疫苗rBCG-Sj26 GST对小鼠的保护作用被引量：1
- 2003年
- 为了研究分枝杆菌重组疫苗rBCG Sj26GST对小鼠的保护作用,用分枝杆菌重组疫苗rBCG Sj26GST免疫雄性BALB/c,结核杆菌H37Ra进行攻击,检测小鼠淋巴细胞刺激指数(SI),腹腔巨噬细胞培养上清释放NO量,小鼠血清IFN γ、IL 2的含量,并计数小鼠肝、肺活细菌数.rBCG Sj26GST疫苗免疫的小鼠,其脾淋巴细胞刺激指数(SI)为4.12±1.11,与对照组(2.63±0.47)、载体组(1.06±0.08)和BCG组(1.50±0.41)相比,差异具有显著意义(P<0.05);rBCG Sj26GST组巨噬细胞释放的NO量明显高于对照组(P<0.05).小鼠血清IFN γ的浓度较对照组高33%,但差异无显著意义(P>0.05);与载体组相比,差异具有显著意义(P<0.05).血清白介素 2的浓度较对照组高43%,较载体组高38%,但差异无显著意义(P>0.05).经rBCG Sj26GST免疫的小鼠受结核杆菌攻击后其肺、肝脏结核菌数较对照组少.分枝杆菌重组疫苗rBCG Sj26GST免疫小鼠后能提高小鼠淋巴细胞刺激指数,刺激IFN γ、IL 2的分泌,说明此疫苗能诱导CD+4Th1和CD+8CTL的细胞免疫反应,增强小鼠细胞免疫功能,并使小鼠能抵抗结核杆菌的攻击.
- 胡佳杰黄海浪皇甫永穆
- 关键词：结核分枝杆菌
- 日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗对小鼠免疫应答的影响被引量：7
- 2000年
- 采用日本血吸虫重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。免疫８周时，断头取血，取脾脏，取腹腔巨噬细胞。以淋巴细胞刺激指数（ＳＩ）反映细胞增殖能力，以ＮＯ湫得检测巨噬细胞吞噬活性，以ＥＬＩＳＡ试剂盒检测血清及脾淋巴细胞培养上清的白细胞介素２（ＩＬ－２＿和干扰素γ（ＩＦＮ－γ）的含量。结果表明，ｒＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗以１０＾－６ＣＦＵ剂量经皮下免疫小鼠后。
- 戴五星郑波皇甫永穆
- 关键词：日本血吸虫重组BCG疫苗免疫应答疫苗
- 日本血吸虫32ku抗原基因的克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达被引量：12
- 2000年
- 日本血吸虫３２ ｋｕ抗原（简称ｓｊ３２ｋｕ）是血吸虫的一种保护性抗原，为研究其重组疫苗的保护作用，将该抗原基因的全编码序列按正确的阅读框顺序插入到穿梭质粒 ｐＢＣＧ２１００，受控于人结核杆菌热休克蛋白 ７０（Ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏ－ｔｅｉｎ ７０，简称ｈｓｐ７０）启动子，构建成重组表达质粒 ｐＢＣＧ－ｓｊ３２，在大肠杆菌－分枝杆菌两个系统中能稳定复制。重组分枝杆菌于 ４２℃诱导 ２ ｈ或 ４５℃诱导 ３０ ｍｉｎ，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，在 ３２ ｋｕ的位置能见到明显的蛋白条带，表明 ３２ ｋｕ抗原能在分枝杆菌中高效表达。
- 肖红郑波祁学忠皇甫永穆
- 关键词：分枝杆菌日本血吸虫疫苗基因表达
- 新型大肠杆菌-分枝杆菌穿梭载体的构建及卡那霉素抗性基因表达的研究被引量：10
- 1998年
- 用 PCR（polymerase chain reaction）技术克隆了卡介苗（Bacille Calmette-Guerin,BCG）热休克蛋白 65（heat shock Protein 65, hsp65）启动子序列,构建成穿梭载体ME-65。该载体含有分枝杆菌和大肠杆菌的质粒复制基因、BCG的hsp65高效启动子序列以及在分枝杆菌和大肠杆菌中都能表达的卡那霉素抗性基因。将其转化到耻垢分枝杆菌和BCG中均可稳定复制并表达卡那霉素抗性。质粒对宿主菌的生长无明显的影响,未观察到质粒的丢失和突变。该载体具有分子量小、容量大、转化效率高、复制稳定、含有多克隆位点等优点,将外源基因插入到hsp65启动子的下游,可望在BCG中获得高效表达。为BCG和其它分枝杆菌发展成多价重组疫苗开辟了新途径。
- 路艳艳冯作化皇甫永穆郑波
- 关键词：分枝杆菌穿梭质粒卡介苗大肠杆菌
- 人结核分枝杆菌hsp70 DNA疫苗的免疫保护作用研究被引量：3
- 2002年
- 目的研究人结核分枝杆菌hsp70DNA疫苗对小鼠的免疫保护作用。方法用人结核分枝杆菌hsp70DNA疫苗免疫雄性BALB c小鼠 ,8周后 ,用结核杆菌H37Ra进行攻击 8周 ,检测小鼠淋巴细胞刺激指数 (SI)、腹腔巨噬细胞培养上清释放NO量、小鼠血清IFN γ、IL 2的含量 ,并计数小鼠肝、肺活细菌数。结果hsp70DNA疫苗免疫的小鼠 ,其脾淋巴细胞刺激指数 (SI)为 3 2 4± 0 57,与对照组 (2 63± 0 47)比较 ,差异不具有显著意义 ;腹腔巨噬细胞培养释放NO量与对照组比较无显著差异 ,但较对照组高 2 6 %。免疫小鼠其血清IFN γ含量为 981 40pg ml,与对照组 (565 90pg ml)相比 ,差异具有显著意义 (P <0 0 5) ;小鼠血清中IL 2的浓度较对照组明显提高 (P <0 0 5)。经hsp70DNA疫苗免疫的小鼠受结核杆菌攻击后其肺、肝脏结核杆菌数较对照组少。结论人结核分枝杆菌hsp70DNA疫苗免疫小鼠后能提高小鼠腹腔巨噬细胞培养上清释放NO量 ,刺激IFN γ、IL 2的分泌 ,说明此疫苗能诱导CD+4 Th1和CD+8CTL的细胞免疫反应 ,增强小鼠细胞免疫功能 。
- 胡佳杰文学明肖爱清黄海浪
- 关键词：结核分枝杆菌免疫保护动物实验
- 重组耻垢分枝杆菌-Sj26GST疫苗有关毒性实验研究被引量：2
- 2002年
- 目的初步研究重组耻垢分枝杆菌-Sj26GST疫苗对小鼠的有关毒性作用。方法 用重组耻垢分枝杆菌-Sj26GST疫苗免疫雄性BALB/c小鼠,16周后,称小鼠体重,摘眼球取血,测定小鼠的淋巴细胞、血红蛋白、白细胞及血小板含量;剩余血离心得到血清,测定小鼠肌酐及ALT;处死小鼠,分离出肺、肾、肝,并分别测定其重量。结果重组耻垢分枝杆菌-Sj26GST疫苗免疫的小鼠,其淋巴细胞数较对照组高(P<0.05),且在正常范围之内;小鼠体重、各脏器重量、各血象指标及血清肌酐和ALT含量与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论重组耻垢分枝杆菌-Sj26GST疫苗免疫小鼠后对小鼠无系统毒性作用。
- 胡佳杰文学明肖爱清皇甫永穆
- 关键词：重组耻垢分枝杆菌毒性作用结核病
- 血吸虫重组卡介苗-Sj26GST疫苗的构建及免疫原性的研究被引量：7
- 2000年
- 目的 构建含日本血吸虫相对分子质量为 2 6 0 0 0的抗原 (Sj2 6GST)基因的重组卡介菌(rBCG)疫苗 ,观察其对BALB/c小鼠的免疫保护作用。方法 采用分子生物学技术 ,将Sj2 6GSTcDNA克隆到人结核杆菌热休克蛋白 (HSP) 70启动子下游 ,构成融合基因 ,再将此融合基因亚克隆到E .coli 分枝杆菌穿梭质粒pBCG 2 0 0 0中 ,构成重组质粒pBCG Sj2 6 ,然后转化卡介苗 (BCG) ,构成血吸虫重组BCG Sj2 6GST(rBCG Sj2 6GST)疫苗 ,经热诱导 ,在BCG中表达Sj2 6GST抗原。用rBCG Sj2 6GST疫苗皮下免疫BALB/c小鼠 ,以淋巴细胞刺激指数 (SI)反映细胞增殖能力 ,以NO释放量检测巨噬细胞吞噬活性 ,以ELISA试剂盒检测血清及脾淋巴细胞培养上清的白细胞介素 (IL) 2和干扰素 (IFN) γ的含量。结果 HSP70启动子与Sj2 6GSTcDNA融合基因已被克隆到pBCG 2 0 0 0穿梭表达质粒中 ,相对分子质量为 2 6 0 0 0处可见明显的表达蛋白带 ,其表达量占菌体总蛋白量的 15 %。rBCG Sj2 6GST疫苗以 10 6菌落形成单位 (CFU)经皮下免疫小鼠后 ,其脾SI为 2 .2 6± 0 .43,与对照组 (1.6 1± 0 .2 8) ,载体组(1.48± 0 .30 )和BCG组 (1.42± 0 .2 6 )比较 ,P <0 .0 5 ;巨噬细胞NO的含量为 35 7nmol/ml± 84nmol/ml,与对照组 (183nmol/ml± 33nmol/ml)和?
- 戴五星皇甫永穆郑波程继忠黄翠华黄海浪
- 关键词：日本血吸虫疫苗基因表达免疫原性
- 重组耻垢分枝杆菌-Sj26GST疫苗的免疫保护作用研究被引量：2
- 2003年
- 目的 初步研究重组耻垢分枝杆菌疫苗 r Mc- Sj2 6 GST (recom binant M.smegmatism c2 1 5 5 - Sj2 6 GST)对小鼠的免疫保护作用。方法 用耻垢分枝杆菌重组疫苗 r Mc- Sj2 6 GST免疫雄性 BAL B/ c小鼠 ,检测小鼠淋巴细胞刺激指数 (SI) ,腹腔巨噬细胞培养上清释放 NO量 ,小鼠血清IFN- γ、IL- 2的含量 ,并计数小鼠肝、肺活细菌数。结果 小鼠脾淋巴细胞刺激指数 (SI)为 2 .6 4±1 .37,与 Mc组 (载体组 ) 1 .2 8± 0 .4 1相比 ,差异具有显著性 ;小鼠血清 IFN- γ为 1 96 .4 3pg· ml- 1 ,与 Mc组 1 1 2 .5 7pg· ml- 1相比 ,差异有显著性 ,较对照组高 4 1 % ;小鼠血清中 IL- 2的浓度较对照组高。经 r Mc- Sj2 6 GST疫苗免疫的小鼠受结核杆菌攻击后其肺、肝脏结核杆菌数较对照组少。结论 耻垢分枝杆菌重组疫苗 r Mc- Sj2 6 GST增强了小鼠细胞免疫功能 。
- 胡佳杰肖爱清黄海浪皇甫永穆
- 关键词：耻垢分枝杆菌免疫保护作用结核病传染病
- 人结核分枝杆菌hsp70DNA疫苗有关毒性实验研究被引量：1
- 2002年
- 初步研究了人结核分枝杆菌 hsp70 DNA疫苗对小鼠的有关毒性作用。结果显示 ,人结核分枝杆菌 hsp70 DNA疫苗免疫小鼠后能提高小鼠淋巴细胞数 ,说明该疫苗能提高小鼠的免疫功能 ,对小鼠无系统毒性作用。
- 胡佳杰文学明肖爱清黄海浪
- 关键词：结核分枝杆菌HSP70DNA疫苗毒性作用
- 重组BCG-HSP70疫苗有关毒性实验研究被引量：2
- 2002年
- 目的初步研究分枝杆菌重组疫苗rBCG -HSP70对小鼠的有关毒性作用。方法用分枝杆菌重组疫苗rBCG -HSP70免疫雄性BALB/c小鼠 ,16周后 ,称小鼠体重 ,摘眼球取血 ,测定小鼠的淋巴细胞、血红蛋白、白细胞及血小板含量 ;剩余血离心得到血清 ,测定小鼠肌酐及ALT ;处死小鼠 ,分离出肺、肾、肝并分别测定其重量。结果rBCG -HSP70疫苗免疫的小鼠 ,其淋巴细胞数较对照组高 (P<0.05) ;小鼠体重、各脏器重量、各血象指标、血清肌酐和ALT含量与对照组无差异 (P>0.05)。结论分枝杆菌重组疫苗rBCG -HSP70免疫小鼠后能提高小鼠淋巴细胞数 ,说明此疫苗能提高小鼠的免疫功能 。
- 胡佳杰文学明肖爱清黄海浪
- 关键词：结核分枝杆菌毒性作用结核病
