重庆市科技攻关计划(CSTC2009AB5197)
- 作品数:2 被引量:5H指数:1
- 相关作者:吴玉章何海洋李晋涛李明薛毅更多>>
- 相关机构:第三军医大学更多>>
- 发文基金:重庆市科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- SA11株轮状病毒VP3基因的克隆表达及致病机制的初步研究被引量:5
- 2011年
- 目的克隆、真核表达SA11株轮状病毒VP3基因,对其致病机制进行了初步研究。方法用RT-PCR从SA11株总RNA中扩增出VP3基因,并克隆到真核表达载体pEGFP-C1上,构建重组表达载体pEGFP-C1/VP3,用荧光显微镜及Western blot检测VP3基因在真核细胞(293T细胞)的表达情况。以重组质粒pEGFP-C1/Rb94为对照,用流式、荧光显微镜、Western blot观察VP3蛋白对GFP基因表达的抑制作用。结果在293T细胞中检测到VP3基因的表达;pEGFP-C1/VP3组的流式荧光强度、Western blot的蛋白条带大小均明显弱于pEGFP-C1/Rb94对照组。结论成功构建了pEGFP-C1/VP3真核穿梭表达载体,在真核细胞中有效表达,实验结果提示VP3蛋白可能对宿主细胞大分子蛋白的表达有抑制作用,可能是轮状病毒的一种新的致病机制。
- 李明何海洋徐广振尹怡薛毅吴玉章李晋涛
- 关键词:轮状病毒VP3基因真核表达致病机制
- MiR-155在断奶期接力miR-146a介导肠上皮固有免疫耐受
- 2015年
- 目的哺乳动物新生期肠上皮高表达mi R-146a介导固有免疫耐受,本研究探讨mi R-146a下降后肠上皮继续保持耐受状态的分子机制。方法定量PCR分析肠上皮mi R-146a与mi R-155表达模式,体外实验比较二者激活的刺激强度差异;转染及免疫印迹实验分析mi R-155在肠上皮免疫耐受中的功能及其可能调控靶标;小鼠提前断奶实验分析影响mi R-155激活的关键因素。结果肠上皮mi R-146a在新生期高表达并在断奶期降至极低水平,mi R-155则在断奶期剧烈上调;肠上皮中mi R-155激活强度显著高于mi R-146a;肠上皮高表达的mi R-155通过靶向抑制TAB2、IKKε、NIK等抑制炎症应答而非促进炎症;肠上皮mi R-155激活表达与哺乳动物断奶时间相关。结论哺乳动物肠道发育中,mi R-146a与mi R-155在断奶期发生功能接力,依次在新生期和成年期介导肠上皮固有免疫耐受。
- 张记田志强申子刚何海洋吴玉章李晋涛
- 关键词:肠上皮细胞MIR-155免疫耐受