河南省教育厅自然科学基金(2009A310007)
- 作品数：7 被引量：25H指数：3
- 相关作者：刘巨源海广范李佳鑫陈永凤夏武更多>>
- 相关机构：新乡医学院新乡医学院第三附属医院更多>>
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- 维甲酸对转化生长因子β1诱导的HFL-I细胞Ⅲ型胶原、STAT3和PIAS3表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-I)中Ⅲ型胶原(collagenⅢ)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)和活化STAT3蛋白抑制剂(PIAS3)表达的影响。方法:体外培养HFL-I细胞,5μg/L TGF-β1诱导0 h、6 h、12 h、24 h、48 h和72 h后,RT-PCR法检测colla-genⅢ、STAT3和PIAS3 mRNA表达,诱导0 d、1 d、3 d和5 d后,Western blotting法检测STAT3和p-STAT3蛋白表达。不同浓度维甲酸干预,24 h后用RT-PCR法检测collagenⅢ、STAT3和PIAS3 mRNA表达,3 d后用Westernblotting法检测STAT3和p-STAT3蛋白表达。结果:TGF-β1诱导后,HFL-I细胞中collagenⅢ和STAT3 mRNA表达明显上调,PIAS3 mRNA表达明显下调,STAT3和p-STAT3蛋白表达明显上调(P<0.05)。各浓度ATRA都下调TGF-β1诱导的HFL-I细胞中collagenⅢ、STAT3 mRNA和STAT3、p-STAT3蛋白的表达,上调PIAS3 mR-NA表达(P<0.05)。结论:ATRA可通过抑制TGF-β1诱导的HFL-I细胞collagenⅢ和STAT3表达、上调PIAS3表达而起到抗肺纤维化作用。
- 夏武杨宇平陈永凤程娜刘巨源
- 关键词：转化生长因子Β全反式维甲酸
- TGF-β_1对HFL-I细胞HSP47和Collagen-Ⅰ表达的影响被引量：3
- 2013年
- 目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)对人胚肺成纤维细胞(HFL-I)中Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ)、热休克蛋白47(HSP47)表达的影响。方法体外培养HFL-I,5 g/L TGF-β1诱导0、1、3、5 d后,Western blot法检测HSP47表达;诱导0、6、12、24、48、72 h后,RT-PCR法检测Collagen-Ⅰ及HSP47 mRNA表达。结果5 g/L TGF-β1诱导后,HFL-I细胞中HSP47蛋白表达持续增高(P<0.05);5 g/L TGF-β1诱导后12 h后,HFL-I细胞中Collagen-Ⅰ、HSP47 mRNA表达开始增加(P<0.05),于24 h时达到峰值,48 h开始下降,至72 h时,仍高于正常对照组。结论 TGF-β1可上调HSP47和Collagen-Ⅰ基因的表达,该作用可能与肺纤维化发生关系密切。
- 海广范李佳鑫贾岩龙夏武陈永凤刘巨源
- 关键词：转化生长因子-Β1热休克蛋白47
- 胰岛素抵抗伴NAFLD小鼠模型肝细胞瘦素表达及其意义被引量：2
- 2014年
- 目的 观察胰岛素抵抗伴非酒精性脂肪肝（NAFLD）小鼠肝脏细胞中瘦素表达量变化及其与血清中胰岛素和游离脂肪酸水平的相关性。方法 80只昆明种小鼠分为高脂组40只和对照组40只,高脂组采用高脂饲料喂养,饮用含1.8%甲硫氨酸的自来水;对照组喂养正常标准饲料,饮用普通自来水。两组分别于15、30、45、60 d分别处死10只小鼠,采集心脏动脉血2 m L,ELISA法检测血清胰岛素和游离脂肪酸水平,半定量RT-PCR法测定肝细胞瘦素基因的相对表达量。结果 15 d时高脂组胰岛素水平高于对照组（P〈0.05）,30 d时血清游离脂肪酸含量明显高于对照组（P〈0.01）;肝脏细胞瘦素基因表达量随饲养时间延长而增高;15-30 d增幅最明显。结论 瘦素抵抗与胰岛素抵抗共同参与了NAFLD的发病过程,瘦素抵抗可能是胰岛素抵抗伴NAFLD发病的重要机制。
- 海广范张慧杨汇娟刘巨源
- 关键词：胰岛素抵抗肝脏细胞瘦素
- 全反式维甲酸对人胚肺成纤维细胞增殖及α-SMA表达的影响被引量：6
- 2011年
- 目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对人胚肺成纤维细胞(HFL-I)增殖与分化的影响。方法:体外培养HFL-I,MTT法检测不同浓度ATRA(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)作用3d对HFL-I增殖能力的影响。5μg/L转化生长因子β_1(TGF-β_1)刺激0h、6h、12h、24h、48h、72h后,RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达,刺激0d、1d、3d、5d后,Western blotting法检测α-SMA蛋白表达。不同浓度ATRA干预,24h后RT-PCR方法检测α-SMA mRNA表达,3d后用Western blotting方法检测α-SMA蛋白表达。结果:(1)MTT法检测显示不同浓度ATRA以浓度依赖性方式抑制HFL-I细胞的增殖(P<0.05)。(2)5μg/L TGF-β_1诱导后,HFL-I细胞中α-SMA mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05)。(3)ATRA以浓度依赖性方式下调TGF-β_1诱导的α-SMA mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论:ATRA能够抑制HFL-I细胞的增殖和TGF-β_1诱导的分化,该作用可能是通过下调α-SMA mRNA和蛋白的表达实现的。
- 李佳鑫海广范贾岩龙夏武陈永凤刘巨源
- 关键词：肌成纤维细胞转化生长因子Β全反式维甲酸
- 肺间质纤维化中肌成纤维细胞的来源及调控因素被引量：4
- 2009年
- 肺间质纤维化(PF)的病理生理过程及病因尚不十分清楚。已有研究表明多种细胞因子能够激活成纤维细胞(FB),使之转化为肌成纤维细胞(MB),MB合成释放大量细胞外基质(ECM)等成分,从而导致PF形成。目前对于PF中MB的来源主要有:肺部原有FB转化成为MB、肺泡上皮细胞(AEC)转化为MB、血液中的纤维细胞转化为肺MB等,其转化的主要调控因素包括:转化生长因子-β(TGF-β)、结缔组织生长因子(CTGF)、内皮素(ET)、白介素(IL)、磷酸酶基因(PTEN)、端粒酶等。MB可造成ECM的异常沉积、肺顺应性下降、分泌多种炎性介质加重肺泡上皮损伤。
- 魏锦锦李佳鑫刘巨源
- 关键词：肺间质纤维化成纤维细胞肌成纤维细胞表型转化
- 全反式维甲酸对HFL-Ⅰ细胞α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、热休克蛋白47表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的研究全反式维甲酸(ATRA)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-Ⅰ)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ),热休克蛋白47(HSP47)mRNA和蛋白表达的影响。方法体外培养HFL-Ⅰ细胞,MTT法检测不同浓度TGF-β1和ATRA分别作用3 d对HFL-Ⅰ细胞增殖能力的影响。随后分为6组:对照组、5μg·L-1 TGF-β1组、10μmol·L-1 ATRA组、5μg·L-1TGF-β1+0.1μmol·L-1 ATRA组、5μg·L-1 TGF-β1+1μmol·L-1 ATRA组、5μg·L-1 TGF-β1+10μmol·L-1 AT-RA组,RT-PCR和Western blot方法分别检测各实验组细胞中α-SMA,Collagen-Ⅰ,HSP47 mRNA和蛋白的表达。结果①MTT法检测结果显示不同浓度的TGF-β1可刺激HFL-Ⅰ细胞增殖,呈浓度依赖性(P<0.05);不同浓度的ATRA对HFL-Ⅰ细胞增殖能力均有明显抑制作用,并随药物浓度的增加而增强(P<0.05)。②5μg.L-1 TGF-β1诱导后,HFL-Ⅰ细胞中α-SMA,Collagen-I,HSP47 mRNA和蛋白表达均明显上调(P<0.05)。③ATRA以浓度依赖性方式下调经TGF-β1诱导的HFL-Ⅰ细胞中α-SMA,Collagen-I,HSP47 mR-NA和蛋白的表达(P<0.05)。结论 ATRA能够抑制TGF-β1诱导的HFL-Ⅰ细胞的分化,其作用机制可能与降低Col-lagen-I、HSP47表达有关。
- 刘巨源李佳鑫海广范陈永凤夏武贾岩龙
- 关键词：肌成纤维细胞全反式维甲酸Α-平滑肌肌动蛋白I型胶原热休克蛋白47
- 胰岛素抵抗伴非酒精性脂肪性肝病动物模型脂肪细胞瘦素的表达规律被引量：7
- 2011年
- 目的观察高脂饲料对小鼠体重、肝脏重量和胰岛素指数的影响以及脂肪细胞瘦素(Leptin)基因在小鼠胰岛素抵抗(IR)伴随非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)形成过程中的表达规律,探讨Leptin基因对IR伴随NAFLD的作用机制。方法小鼠随机分为实验组(饲以高营养饲料,饮用水添加甲硫氨酸)和对照组(喂饲正常标准饲料,饮用水未添加甲硫氨酸),设15、30、45及60 d 4个观察时点。各组小鼠取心血和肝脏,测定小鼠体重、肝脏重量、空腹血糖、血清胰岛素水平及游离脂肪酸含量,并采用半定量RT-PCR对各时点小鼠脂肪组织Leptin基因表达量进行分析。结果实验组小鼠15天后的体重、肝脏重量均高于对照组,胰岛素敏感指数均低于对照组(P<0.01);实验组小鼠脂肪细胞中Leptin基因的表达量随饲养时间逐渐增高;15～30 d增长幅度最大,45 d以后增长幅度减小。结论 IR与Leptin抵抗在小鼠IR伴随NAFLD动物模型中同时存在,共同参与了NAFLD的病理过程。Leptin抵抗可能是诱发IR伴NAFLD发病的重要机制之一。
- 杨汇娟海广范徐保福刘巨源
- 关键词：胰岛素抵抗非酒精性脂肪性肝病瘦素
