国家自然科学基金(81273771)
- 作品数：3 被引量：27H指数：2
- 相关作者：何帮剑李桂锦姚新苗朱胤晟应建伟更多>>
- 相关机构：浙江中医药大学附属第三医院浙江中医药大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省科技厅创新团队建设与人才培养项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 骨质疏松药物靶向治疗的研究进展被引量：5
- 2013年
- [目的]综述近10年来骨质疏松药物靶向治疗的研究进展。[方法]通过检索国内外对成骨细胞Wnt/β-catenin信号通路认识及研究的文献,对骨质疏松药物靶向治疗不同作用机制进行总结。[结果]DKK1、GSK-3β、骨硬化蛋白的过度表达会抑制成骨细胞的活性及功能,而通过药物抑制通路中因子的表达对骨质疏松的治疗具有积极的意义。[结论]骨质疏松药物靶向治疗具有良好的前景。
- 应建伟李桂锦朱胤晟何帮剑姚新苗
- 关键词：骨质疏松症WNTΒ-CATENIN药物靶向治疗信号通路
- 益骨汤含药血清通过经典Wnt信号通路促进成骨细胞增殖分化的研究被引量：20
- 2017年
- 目的:在经典wnt信号通路抑制剂大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)的干预下,观察益骨汤含药血清对成骨细胞的经典Wnt信号通路的影响,探究益骨汤治疗骨质疏松的作用机制,为临床使用补肾活血中药防治骨质疏松症提供实验依据。方法:将40只雌性SD大鼠随机分成2组,益骨汤水提液组和空白对照组,连续灌胃10天,获取含药血清。从乳鼠颅盖骨中分离培养成骨细胞,实验分为4组,即A组(益骨汤含药血清组)、B组(DKK1组)、C组(DKK1+益骨汤含药血清组)、D组(空白血清对照组)。进行细胞增殖MTT检测、碱性磷酸酶活性检测,RT-PCR检测经典Wnt/β-catenin通路中β-链蛋白(β-catenin)、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP-5)、DKK1基因的表达情况。结果:根据MTT法动态观察各组成骨细胞增殖,发现成骨细胞增殖呈规律性:48 h至72 h成骨细胞呈对数增长期,96 h后细胞增殖逐渐受到抑制。同一时间点与B组比较,A、C、D各组成骨细胞的增殖和ALP活性显著较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。同一时间点与D组比较,A组成骨细胞的增殖和ALP活性显著较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与B组比较,A、C、D组β-catenin mRNA、LRP-5 mRNA、TCF mRNA的表达均明显升高,DKK1 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与D组比较,A组β-catenin mRNA、LRP-5 mRNA、TCF mRNA的表达均明显升高,DKK1 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益骨汤含药血清可能是通过抑制DKK1的高表达,从而上调经典Wnt/β-catenin信号中β-catenin、LRP-5、TCF基因的表达,达到促进成骨细胞增殖,起到抗骨质疏松作用。
- 何帮剑朱胤晟应建伟李桂锦吕一姚新苗童培建
- 关键词：益骨汤成骨细胞
- 大鼠脂肪干细胞的分离培养鉴定及多向诱导分化研究被引量：2
- 2017年
- 目的:通过体外分离培养脂肪干细胞,并进行传代、表型鉴定及多向诱导分化,进一步了解其生物学特性,为临床运用奠定实验基础。方法:取SD大鼠附睾近心端,肾周及腹股沟韧带皮下脂肪组织,采用密度梯度离心和贴壁培养相结合方法,对脂肪干细胞进行分离、体外培养及扩增、表型鉴定及成骨成脂诱导分化,在倒置显微镜下观察原代及传代细胞形态变化,并采用MTT法检测第3、5、7、9代细胞增殖能力,用流式细胞仪检测细胞表面抗原标记,取第3代细胞进行成骨成脂诱导分化,并采用茜素红染色、油红O染色方法进行鉴定。结果:采用密度梯度离心和贴壁培养相结合方法得到的脂肪干细胞,其细胞形态较为均一,基本呈长梭形,旋涡状生长,并形成集落样生长。MTT法检测第3、5、7、9代ADSCs呈典型的"S"形增殖曲线,符合干细胞的特性,脂肪干细胞表型鉴定结果显示CD29阳性高表达,CD34阴性表达,CD45低表达,CD105弱阳性表达,脂肪干细胞能向成骨细胞及脂肪细胞分化。结论:脂肪干细胞取材较方便,含量丰富、并能够在体外分离培养,其稳定表达特异性的表面抗原,并且经过相应诱导培养后可向成骨及成脂多向分化,可作为优良的骨组织工程的种子细胞来源。
- 何帮剑董正超成锋李桂锦吕一姚新苗
- 关键词：脂肪干细胞生物学特性表型鉴定
