国家高技术研究发展计划(2006AAOZA401)
- 作品数：6 被引量：26H指数：3
- 相关作者：周清华吴志浩罗猛孙丽亚朱大兴更多>>
- 相关机构：天津医科大学总医院天津市肺癌转移与肿瘤微环境重点实验室天津医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株转移相关microRNAs的筛选研究被引量：2
- 2011年
- 背景与目的微小RNA(microRNAs,miRNAs)参与调节肿瘤发生发展的多个过程,包括细胞的分裂增殖、细胞周期、凋亡、血管形成、侵袭和转移等。本研究应用miRNA芯片检测具有高低不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株L9981和NL9980的miRNA表达谱,从中筛选出与大细胞肺癌转移相关的miRNAs。方法收集L9981和NL9980细胞,抽提总RNA进行CY3标记,将标记RNA在miRNA芯片上进行杂交反应。通过数据统计分析,筛选出表达明显差异的miRNAs。应用Real-timePCR验证芯片结果,并应用生物信息学方法预测靶基因。结果在不同转移潜能人大细胞肺癌L9981和NL9980细胞株中共筛选到22个表达明显差异的miRNAs。与NL9980相比,在L9981中有13个miRNAs表达上调,9个表达下调。Real-timePCR验证miR-125a-3p在细胞中的表达水平与芯片结果趋势一致,预测其靶基因可能为胰岛素样生长因子2。结论筛选得到与大细胞肺癌转移相关的miRNA表达谱。
- 鲁为山李书军刘彬李洋罗猛孙丽亚尤嘉琮周清华
- 关键词：肺肿瘤细胞系微小RNA
- 上皮间质转化与肿瘤耐药被引量：5
- 2013年
- 肿瘤药物治疗过程中常常要面临肿瘤细胞耐药的问题。上皮间质转化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)在肿瘤耐药方面的作用为解决该问题提供了可能。该文围绕EMT基本特征、EMT与肿瘤耐药的关系、EMT在肿瘤耐药过程中机制的研究进展进行详细综述。
- 张琳琳吴志浩周清华
- 关键词：上皮间质转化肿瘤耐药
- 上皮细胞间质化与肿瘤的转移被引量：10
- 2011年
- 恶性肿瘤的转移是指肿瘤从原发部位转移到远隔器官,是恶性肿瘤患者致死的常见原因。肿瘤细胞侵润周围组织,侵润血管,在转移部位侵出血管并形成新的转移灶,这一过程需要很多的分子机制参与。上皮细胞间质化在胚胎发育以及成人的损伤修复、组织再生、器官纤维化以及肿瘤进展等方面发挥重要作用。上皮细胞间质化是恶性肿瘤侵润转移的首要步骤。随着我们对于上皮细胞间质化分子机制了解的深入,使得我们更好地知晓肿瘤及其进展的过程,并为恶性肿瘤的治疗干预提供有效的方法。
- 赵荣志吴志浩周清华
- 关键词：肿瘤侵润
- 慢病毒介导的稳定沉默nm23-H1基因的肺癌细胞株的建立及生物学行为改变被引量：6
- 2012年
- 背景与目的 nm23-H1基因是重要的肿瘤转移抑制基因。前期研究发现利用化学合成的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制nm23-H1基因的表达可明显增强肺癌细胞的侵袭力。为了进一步研究nm23-H1基因沉默后的分子生物学机制,本研究利用慢病毒介导的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)建立nm23-H1基因稳定沉默的肺癌细胞株。方法将表达特异性抑制nm23-H1基因shRNA的慢病毒转染人大细胞肺癌细胞株NL9980和肺腺癌细胞株A549,通过嘌呤霉素筛选出稳定转染细胞株。逆转录PCR、定量PCR及Western blot法检测nm23-H1基因表达,并通过shRNA抵抗的nm23-H1基因重组质粒转染拯救实验验证,侵袭小室实验检测侵袭力改变。结果逆转录PCR、定量PCR和Western blot法检测稳定转染细胞株NL9980-99和A549-99中nm23-H1基因在mRNA和蛋白水平表达均明显降低;shRNA抵抗的nm23-H1基因重组质粒转染拯救实验重现nm23-H1的正常表达;侵袭小室实验显示NL9980-99和A549-99细胞侵袭力明显增强。结论成功建立nm23-H1基因稳定沉默的人大细胞肺癌细胞株NL9980-99和人肺腺癌细胞株A549-99,nm23-H1基因沉默后使NL9980-99和A549-99细胞的侵袭力明显增强。
- 罗猛朱大兴弓磊邱小明祖玲玲孙丽亚吴志浩周清华
- 关键词：肺肿瘤慢病毒RNA基因
- 稳定表达荧光素酶的nm23-H1表达缺失人肺腺癌细胞株的构建及其体内外活性检测被引量：2
- 2012年
- 背景与目的在实验动物存活条件下,通过活体成像技术能探测到标记有萤火虫荧光素酶(luc)基因的肿瘤细胞在体内的分布情况。本研究旨在稳定表达nm23-H1 shRNA的人肺腺癌细胞株A549中,建立能稳定表达萤火虫荧光素酶的发光细胞株A549/nm23-H1-shRNA-luc,并检测其体内外发光情况,为下一步相关的体内实验提供实验材料。方法通过浓度梯度法测定A549/nm23-H1-shRNA细胞的潮霉素最佳筛选浓度,将带有萤火虫荧光素酶基因的PGL4.50质粒转入A549/nm23-H1-shRNA细胞中,利用潮霉素筛选单克隆细胞株A549/nm23-H1-shRNA-luc,并采用生物发光技术对单克隆细胞株进行阳性鉴定并挑选发光最强的1个克隆分析其表达荧光素酶的稳定性。为检测A549/nm23-H1-shRNA-luc细胞在体内发光的稳定性,将A549/nm23-H1-shRNA-luc细胞接种于10只裸鼠右后腹股沟皮下之后,并随机分为两组,每组5只裸鼠,运用活体成像系统观察成像情况。结果 A549/nm23-H1-shRNA-luc细胞的潮霉素最佳筛选浓度为300 g/mL。经过潮霉素筛选所建立的A549/nm23-H1-shRNA-luc细胞株能在体外稳定表达荧光素酶,细胞数(x)和生物发光值(y)呈直线相关,回归方程是:y=3,699.9x+992,237,R2=0.975,1。为评估此细胞株在体内生物发光的稳定性,将细胞种植进入10只裸鼠并随机分成两组,结果显示体内生物发光值差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论成功建立了能持续、稳定表达荧光素酶的A549/nm23-H1-shRNA-luc细胞株。
- 王红明朱大兴吴志浩周清华
- 关键词：荧光素酶肺腺癌生物发光成像NM23-H1
- 电视胸腔镜手术在非小细胞肺癌诊治中的应用被引量：2
- 2012年
- 肺癌是当今世界上对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤,其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)占所有肺癌的75%～80%,严重威胁人类健康。近年来随着微创外科的发展,电视胸腔镜手术(video-assisted thoracoscopic surgery,VATS)越来越多的应用于非小细胞肺癌的诊断和治疗。
- 董明李昕周清华陈军
- 关键词：肺肿瘤电视胸腔镜
