国家重点基础研究发展计划(2010CB529505)
- 作品数：11 被引量：58H指数：5
- 相关作者：田杰孙慧超吕铁伟朱静吴晓云更多>>
- 相关机构：重庆医科大学复旦大学中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家大学生创新性实验计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 先天性心脏病危险因素1:1配对病例对照研究被引量：3
- 2013年
- 目的：探讨先天性心脏病（congenital heart disease,CHD）发生的危险因素,为研究CHD的病因及其科学的预防措施提供参考依据。方法：采用以医院为基础的1∶1配对病例对照研究,对CHD组和对照组儿童的父母进行统一的问卷调查。对所有研究因素经单因素分析和多因素条件Logistic回归分析,筛选出与CHD发生相关的危险因素。结果：研究分析了260对CHD患儿和对照的资料,按α=0.05水准,用单因素Logistic回归分析对研究因素进行单因素分析,初步筛选出21个可疑危险因素,用多因素条件Logistic回归模型进行多因素综合分析,最终筛选出与CHD发生相关的5个因素,包括3个危险因素：母亲年龄（〉35岁：OR=3.075,P=0.010;〈20岁：OR=5.084,P=0.012）、被动吸烟（少量：OR=1.728,P=0.040;经常：OR=3.903,P=0.000）、孕早期感冒（OR=1.787,P=0.023）,2个保护因素：规律服用叶酸（OR=0.447,P=0.004）、食用肉类（≥4次/周：OR=0.293,P=0.001;1~3次/周：OR=0.372,P=0.008）。结论：孕早期是胎儿心脏发育的关键时期,母亲高龄或低龄、接触烟草、孕早期感冒会增加胎儿发生CHD的风险,而规律服用叶酸、多食用肉类则对胎儿有保护作用。
- 许春华田杰吕铁伟
- 关键词：先天性心脏病病例对照研究
- 分泌型簇蛋白在肺动脉高压大鼠中的表达变化被引量：6
- 2014年
- 目的探讨分泌型簇蛋白(secretory clusterin,sCLU)在野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)大鼠肺组织和血浆中的表达变化。方法 30只♂Sprague Dawley(SD)大鼠随机分为对照组(n=6)和MCT组(n=24),MCT组给予腹腔注射60 mg·kg-1MCT,对照组(n=6)注射同体积的生理盐水。分别检测注射MCT后1、2、3、4周大鼠肺组织中sCLU的mRNA和蛋白质水平的表达变化、sCLU在肺血管中的定位情况及血浆中sCLU浓度的变化。结果 sCLU的mRNA和蛋白表达在MCT组大鼠肺组织中呈时间依赖性的明显升高,并且其主要定位于重构肺小动脉的胞质及细胞外基质中;sCLU的血浆浓度随PAH的进展而逐渐升高,且其与肺血流动力学指标及右室肥厚指数均呈正相关。结论 sCLU在MCT诱导PAH大鼠的肺组织和血浆中表达明显升高,它可能在肺血管重构过程中发挥着重要的作用,并可能是反应PAH严重程度的生物标志物。
- 刘晓艳孟刘坤李君魏英杰
- 关键词：肺动脉高压肺血管重构野百合碱增殖
- 组蛋白H3高乙酰化对心脏相关转录因子Islet-1的调控作用被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨组蛋白H3乙酰化修饰对心脏发育早期相关转录因子胰岛素基因增强结合蛋白1(Insulin gene enhancerprotein 1,Islet-1)的调控作用。方法:体外培养心肌祖细胞,分别用不同浓度组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(Suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)干预(0、0.5、1.0、2.0、4.0μmol/L),噻唑蓝(Methyl thiazoyl tetrazolium,MTT)比色实验检测SAHA对细胞增殖的影响,筛选出SAHA的合适干预浓度,用Western blot技术检测心肌祖细胞组蛋白H3乙酰化状态,Real-time PCR检测Islet-1的mRNA表达水平变化,染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)Real-timePCR技术检测Islet-1启动子区组蛋白H3的乙酰化水平。结果:SAHA 0.5、1.0μmol/L处理组较对照组细胞增殖率有所提高,但差异没有统计学意义(P>0.05),SAHA 2.0μmol/L处理组与对照组细胞增殖率相当(P>0.05)。SAHA 4.0μmol/L处理组与对照组比较,细胞增殖受到抑制(P<0.05)。SAHA 2.0μmol/L处理48 h后心肌祖细胞H3乙酰化水平与对照组比升高7.23倍(P<0.05)。Islet-1的mRNA表达与对照组比提高了4.68倍(P<0.05),Islet-1启动子区组蛋白H3乙酰化水平是对照组的2.08倍(P<0.05)。结论:在心肌祖细胞中,组蛋白H3高乙酰化水平促进Islet-1表达,Islet-1受到组蛋白H3乙酰化调控。
- 余仲苏孔娟娟孙慧超朱静田杰
- 关键词：组蛋白H3乙酰化表观遗传
- 姜黄素干预乙醇对心肌祖细胞H3K9的高乙酰化失衡及心脏发育相关基因表达异常被引量：5
- 2011年
- 目的:探讨乙醇对心肌祖细胞毒性作用的表观遗传机制。方法:以心肌祖细胞株为研究对象,用200mmol/L乙醇和溶解于该浓度乙醇的不同浓度姜黄素(5μmol/L,15μmol/L,25μmol/L)处理。Western blot检测组蛋白H3K9乙酰化水平,筛选出姜黄素的有效干预浓度,实时定量PCR检测心脏发育相关基因GATA4,Mef2c,Tbx5mRNA表达量的变化。结果:200mmol/L乙醇使组蛋白H3K9乙酰化水平升高2.76倍(P<0.05),同时使心脏发育相关基因GATA4,Mef2c,Tbx5表达均增加,其中GATA4,Mef2c较对照组有统计学差异(P<0.05)。5μmol/L、15μmol/L姜黄素分别使组蛋白H3K9乙酰化水平升高2.22、1.58倍(P<0.05);25μmol/L姜黄素使组蛋白H3K9乙酰化水平降至对照组水平,同时使心脏发育相关基因GATA4,Mef2c,Tbx5表达较乙醇组均下降,且与对照组无差异(P>0.05)。结论:姜黄素可干预乙醇对心肌祖细胞的高乙酰化失衡以及进而发生的相关基因的表达异常,可为了解乙醇致畸的机制以及临床预防先天性心脏病提供新的思路。
- 王琳轶田杰钟立霖吕铁伟吴晓云朱静
- 关键词：乙醇
- 双酚A与复发性流产的相关性被引量：15
- 2011年
- 目的探讨双酚A与不明原因复发性流产的关系，为预防复发性流产提供科学依据。方法采用以医院为基础的1：1匹配病例-对照，对60例不明原因复发性流产者按年龄±2岁、同一地区、同一孕周进行匹配。用柱前荧光-高效液相色谱法检测60例不明原因复发性流产者（患者组）和60名正常怀孕妇女（对照组）尿液中双酚A的含量。按文化程度、职业分布和吸烟状况进行分组比较。统计分析采用Wilcoxon秩和检验、秩转换方差分析SNK法、单因素和多因素条件logistic回归模型分析。统计软件为SAS9．1．3。结果患者组和对照组尿液双酚A含量分别是（0．10±0．21）、（0．03±0．08）μg／ml（中位数±四分位数间距），差异有统计学意义（Z=3．988，P〈0．0001）。在文化程度为高中者，患者组双酚A水平明显高于对照组（中位数分别为0．10、0．06μg/ml，Z=1．996，P=0．0459）；文化程度为大专者，患者组双酚A水平明显高于对照组（含量分别为0．14、0．03μg／ml，Z=2．586，P=0．0097）。在职业为工人或农民者，患者组双酚A水平明显高于对照组（含量分别为0．08、0．03μg／ml，Z=2．265，P=0．0235）；职业为商业者，患者组双酚A水平明显高于对照组（含量分别为0．10、0．03μg/ml，Z=2．544，P=0．0109）。在无被动吸烟者中，患者组双酚A水平明显高于对照组（含量分别为0．09、0．03μg／ml，Z=3．767，P=0．0002）。在调整年龄、身体质量指数、婚姻状况等因素后，以双酚A浓度≤0．06μg／ml为参比，双酚A浓度在0．06～0．20μg／ml之间的DR值为4．03，95％CI值为1．67～9．74，双酚A浓度〉0．20μg／ml的OR值为5．46，95％CI值为1．95～15．27，且随着双酚A水平的升高，发生复发性流产的风险也在增加（x^2=13．042，P=0．0003）；经秩转换方差分析SNK法检验发现，正常妊娠者、复发性流产2次与�
- 刘银梅沈月平梁红王燕罗晓明沈宗姬陈昕袁伟
- 关键词：流产双酚A病例-对照研究因果律
- 基因组二代测序数据的自动化分析流程被引量：9
- 2014年
- 二代测序技术的发展对测序数据的处理分析提出了很高的要求。目前二代测序数据分析软件很多,但是绝大多数软件仅能完成单一的分析功能(例如:仅进行序列比对或变异读取或功能注释等),如何能正确高效地选择整合这些软件已成为迫切需求。文章设计了一套基于perl语言和SGE资源管理的自动化处理流程来分析Illumina平台基因组测序数据。该流程以测序原始序列数据作为输入,调用业界标准的数据处理软件(如:BWA,Samtools,GATK,ANNOVAR等),最终生成带有相应功能注释、便于研究者进一步分析的变异位点列表。该流程通过自动化并行脚本控制流程的高效运行,一站式输出分析结果和报告,简化了数据分析过程中的人工操作,大大提高了运行效率。用户只需填写配置文件或使用图形界面输入即可完成全部操作。该工作为广大研究者分析二代测序数据提供了便利的途径。
- 李文轲李丰余张思瑶蔡斌郑娜聂宇周到赵倩
- 姜黄素对小鼠心脏发育相关基因表达的影响及其表观遗传调控机制被引量：8
- 2011年
- 目的阐明姜黄素对心脏发育相关基因GATA4,MEF2C和Nkx2.5表达的影响,探讨其表观调控机制。方法姜黄素处理新生鼠心肌细胞后,分别用ELISA,Western blot,real time RT-PCR和染色质免疫沉淀(ChIP)检测组蛋白乙酰化酶活性,组蛋白H3乙酰化修饰状态,GATA4,MEF2C和Nkx2.5的表达和启动子区域组蛋白乙酰化水平。结果 30μmol/L姜黄素作用24 h能有效降低心肌细胞中组蛋白乙酰化酶活性和组蛋白H3的乙酰化修饰状态,GATA4,MEF2C和Nkx2.5的表达水平明显降低(分别为0.34±0.017,0.26±0.04和1.05±0.12)(P<0.05),启动子区域组蛋白乙酰化修饰水平明显降低(分别为1.75±0.67,2.13±0.99和1.29±0.40)(P<0.05)。结论启动子区域组蛋白乙酰化修饰状态降低导致染色质构型紧密,可能为姜黄素抑制GATA4,MEF2C和Nkx2.5表达的调控机制之一。
- 孙慧超朱静吕铁伟吴晓云黄国英田杰
- 关键词：组蛋白乙酰化姜黄素P300
- 人和大鼠内皮祖细胞培养及其生长特性的比较
- 2012年
- 目的建立人内皮祖细胞(hEPCs)离体培养的方法,探讨培养条件,观察细胞生长状态、形态。xd同时行大鼠EPCs(rEPCs)培养。建立hEPCs和rEPCs培养体系,比较两者不同的生长条件和生长状态。方法:取人脐带血80-120ml/袋,先分离单个核细胞,后使用磁珠细胞分选法(MACS),分选出CD133+/VEGFR2+的细胞,进行流式细胞检测,发现双阳性细胞占48.79%。用差速贴壁法培养5-9天,倒置相差显微镜观察细胞形态并照相、免疫荧光染色后荧光显微镜下观察照相。取大鼠骨髓,冲洗骨髓腔,离心沉淀出细胞,差速贴壁培养法培养、观察。结果:(1)hEPCs在普通光镜下呈索条状、卵圆形。(2)细胞吞噬DiI-acLDL、UEA染料后可在荧光显微镜下特异显色,证明细胞有吞噬功能,推断为hEPCs。(3)CD133+/VEGFR2+的hEPCs细胞,占使用MACS筛选后细胞比例为48.79%。(4)从骨髓中分离出的rEPCs生长活力明显优于hEPCs。结论:(1)该方法培养的hEPCs和rEPCs生长活性好,在普通光镜下呈索条状、卵圆形或铺路石样;(2)hEPCs在细胞数量上可不少于rEPCs,从骨髓中培养出的rEPCs增殖力优于脐血来源的hEPCs。此实验比较并完善了两种不同来源内皮祖细胞培养的方法学及其生长特征,有利于根据不同的细胞培养特性来选择应用于内皮祖细胞的实验研究。
- 高永兴沈雳钱菊英葛均波
- 关键词：内皮祖细胞UEA
- 应用低分子肝素钠预防房颤患者住院期间心源性脑栓塞的临床研究被引量：10
- 2013年
- 目的探讨低分子肝素钠预防房颤患者住院期间心源性脑栓塞(CCE)的临床效果。方法选取重庆市丰都县人民医院心内科2001～2011年有华法林抗凝指征但不愿接受华法林抗凝治疗的房颤患者共658例为研究对象,将其分为A组(n=352)和B组(n=306),A组给予低分子肝素钠联合阿司匹林肠溶片,B组单纯服用阿司匹林肠溶片。比较两组患者CCE的发生率。结果 A组CCE发生率为5.1%(18/352),B组CCE发生率为9.8%(30/306),两组CCE发生率比较差异有统计学意义(χ2=5.32,P<0.05)。结论对不愿接受华法林抗凝治疗患者在住院期间使用低分子肝素钠可减少住院期间脑栓塞的发生。
- 易晓淑章丽萍孙慧超
- 关键词：心源性脑栓塞房颤低分子肝素钠
- 信号转导及转录激活因子3对心肌细胞基质金属蛋白酶-10活性的影响
- 2011年
- 目的:探讨信号转导及转录激活因子3(STAT3)对心肌细胞基质金属蛋白酶-10(MMP-10)活性的影响。方法:以炎症细胞因子C反应蛋白(CPP)诱导基质金属蛋白酶-10上调的原代乳鼠心肌细胞为研究对象。使用STAT3的特异磷酸化抗体,用蛋白免疫印迹杂交技术检查STAT3的磷酸化水平。提取细胞核蛋白,应用滤板法检测核内转录因子STAT3的脱氧核糖核酸(DNA)结合活性,并转染STAT3小分子干扰核糖核酸(siRNA),进一步分析转录因子STAT3对基质金属蛋白酶-10的调节作用。结果:磷酸化的STAT3在C反应蛋白刺激后5 min即可出现高表达,一直持续至2 h,而总的STAT3不随C反应蛋白作用的时间而改变。C反应蛋白作用不同时间,核内STAT3的DNA结合活性均可明显增加,且在12 h达到高峰(P<0.01)。加入STAT3 siRNA后,基质金属蛋白酶-10的活性明显减弱(P<0.01),STAT3的蛋白表达以及核内STAT3的DNA结合活性(P<0.01)也均降低。结论:STAT3作为转录因子能够促进C反应蛋白诱导基质金属蛋白酶-10活性的增加。
- 崔传珏魏英杰张晓玲史强刘晓艳白媛媛
- 关键词：信号转导及转录激活因子3转录因子C反应蛋白基质金属蛋白酶-10心肌细胞
