江苏省自然科学基金(BK20082096)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- p62增加HBsAg^+ HepG2细胞DRibbles中HBsAg含量的研究
- 2010年
- 目的:探讨过表达p62能否提高自噬小体中泛素化蛋白的水平。方法:构建pIRES2-EGFP-HBsAg重组质粒和pIRES2-EGFP-Ub-HBsAg重组质粒;脂质体法分HBsAg、Ub-HBsAg、Ub-HBsAg+p62组3组转染HepG2细胞,在相同细胞数量和转染效率下,经万珂、雷帕霉素和氯化铵处理转染细胞并提取DRibbles,ELISA法检测其中HBsAg含量。结果:万珂、雷帕霉素和氯化铵处理后,Ub-HBsAg+p62组HepG2细胞DRibbles中HBsAg显著增高,而且明显高于药物处理的其他两组。结论:当蛋白酶体被抑制时,过表达p62蛋白促进泛素化蛋白(HBsAg)进入自噬小体,阻断自噬降解途径提取的DRibbles能够募集到更多的泛素化蛋白(HBsAg)。
- 唐明薛萌丁磊曹萌王立新
- 关键词：HEPG2细胞乙型肝炎表面抗原泛素
- 联合输注Flt3-L和GM-CSF表达质粒体内诱导小鼠DC的研究被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨联合输注Flt3-L和GM-CSF真核表达质粒体内诱导小鼠DC的方法并检测其抗原提呈功能。方法:采用尾静脉注射法分别输注Flt3-L及GM-CSF质粒,15d后收获小鼠脾脏;采用流式细胞术检测小鼠脾细胞CD11c、CD11b、B220、CD8α和NK1.1等表面标志以鉴定DC的比例及亚型;将体内诱导DC与HBsAg共孵育,然后刺激HBsAg预免疫小鼠的脾细胞并检测其分泌IFN-的水平。结果:联合输注Flt3-L和GM-CSF质粒小鼠的脾细胞达到4×108个细胞/脾脏、其中CD11c+细胞占20%以上,CD11c+细胞中CD11b+、CD11b-、B220+、CD8+、NK1.1+细胞的比例分别达17%、10%、26%、16%、7%左右;体内诱导DC负载HB-sAg后刺激HBsAg特异性淋巴细胞分泌IFN-γ的水平明显高于HBsAg单独刺激组。结论:采用小鼠尾静脉注射技术输注Flt3-L及GM-CSF质粒能够诱导CD11c+ DC的产生并包含多种亚型,体内诱导DC具备有效的抗原提呈功能。
- 苏舒薛萌曹萌王立新
- 关键词：GM-CSF真核表达质粒小鼠
- 自噬、衰老与肿瘤免疫被引量：4
- 2010年
- 王立新
- 关键词：细胞自噬肿瘤免疫细胞衰老真核细胞生命现象病理过程
