国家重点基础研究发展计划(2009CB521800)
- 作品数：15 被引量：50H指数：4
- 相关作者：王世宣卢运萍马丁周婷周志刚更多>>
- 相关机构：华中科技大学天津医科大学武汉市中心医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金海外青年学者合作研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 心脏瓣膜置换术后妇科手术的围手术期处理被引量：6
- 2009年
- 目的探讨心脏瓣膜置换术后患者行妇科手术的安全性。方法回顾性分析2004年4月～2009年4月同济医院收治的10例心脏瓣膜置换术后因妇科疾病行妇科手术患者的临床资料。患者心功能Ⅰ～Ⅱ级。其中,9例择期手术,1例急诊手术,均口服华法林进行抗凝治疗。择期手术者术前停用华法林2～5d,急诊手术者术前2～4h静脉点滴维生素K110～20mg,术前凝血酶原时间(PT)平均值为13.2s,凝血酶原国际标准化比值(INR)平均值为1.19。结果10例患者手术时间8min～210min,术中出血量10～1000ml,其中1例术中出血1000ml,行输血治疗。术后未发生大出血、血栓、感染性心内膜炎,心力衰竭等并发症。结论心脏瓣膜置换术后的患者术前停用华法林或应用维生素K1并将PT、INR分别控制在15s和1.20左右,结合术中细致操作,加强围手术期管理,进行妇科手术是安全的。
- 马衣努尔.买提托合提罗爱月周婷李双董虹王世宣
- 关键词：心脏瓣膜置换术妇科手术围手术期处理
- 短发卡状RNA抑制人Bub1基因表达及其对人卵巢癌A2780细胞药物敏感性和周期的影响被引量：2
- 2010年
- 背景与目的:既往研究提示,紫杉醇类药物作用的发挥有赖于功能完整的纺锤体检查点,而Bub1是纺锤体检查点的重要组成部分。本研究旨在探讨Bub1短发卡状RNA真核表达载体稳定转染对人卵巢癌A2780细胞紫杉醇敏感性及细胞周期的影响。方法:构建Bub1基因短发卡状RNA真核表达载体pEGFP-Bub1-shRNA,以脂质体LipofectamineTM2000包裹空质粒转染体外培养的人卵巢癌细胞株A2780后进行稳定筛选。应用RT-PCR、Western印迹法分析目的基因mRNA及其蛋白水平的表达情况;MTT法、流式细胞术等方法检测转染前后,A2780细胞对紫杉醇敏感性及其细胞周期的变化;Hoechst33342染色法检测细胞分裂指数。结果:与对照组pEGFP-C1/A2780及A2780组相比,pEGFP-Bub1-ShRNA/A2780组细胞中mRNA和蛋白水平的表达均明显下降,其差异具有统计学意义(P<0.05);MTT检测结果提示,转染pEGFP-Bub1-shRNA质粒后细胞对紫杉醇的敏感性明显降低,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,紫杉醇1μmol/L处理细胞24及48h后,与pEGFP-C1/A2780及A2780组相比,该组细胞凋亡率明显降低(P<0.05),G2/M期细胞比例下降,差异具有统计学意义(P<0.05);Hoechst33342染色提示,与对照组相比,pEGFP-Bub1-shRNA/A2780组的分裂指数(MI)明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Bub1基因的下调可导致人卵巢癌A2780细胞对紫杉醇敏感性及G2/M期细胞比例下降。pEGFP-C1-shBub1质粒的成功构建,为研究Bub1基因的功能及定位的研究提供了进一步的实验条件。
- 周婷翁丹卉王世宣卢运萍马丁
- 关键词：卵巢癌紫杉醇
- B、T淋巴细胞弱化因子胞外段联合热休克蛋白70-子宫颈癌TC-1细胞抗原肽复合物治疗小鼠子宫颈癌模型的效果被引量：3
- 2010年
- 目的探讨B、T淋巴细胞弱化因子（BTLA）胞外段联合热休克蛋白（HSP）70-宫颈癌TC-1细胞（HSP70-TC-1）抗原肽复合物治疗小鼠宫颈癌模型的效果。方法（1）将TC-1细胞接种于C57BL／6小鼠成瘤后，实时荧光定量PCR技术检测小鼠肿瘤组织中BTLA、疱疹病毒侵入介质（HVEM）mRNA的表达，流式细胞仪检测肿瘤组织中浸润的淋巴细胞细胞膜表面BTLA、HVEM的表达（以荧光强度表示）。（2）小鼠接种TC-1细胞后，根据处理方法的不同分为5组，即pcDNA3．1（注射空载体pcDNA3．1质粒，作为对照）、psBTLA（注射表达BTLA胞外段的真核表达载体psBTLA质粒）、HSP70（注射HSP70-TC-1抗原肽复合物）、HSP70＋pcDNA3．1（注射HSP70-TC-1抗原肽复合物和pcDNA3．1质粒）、HSP70’psBTLA（注射HSP70-TC-1抗原肽复合物和psBTLA质粒）组，观察各组小鼠体内肿瘤的生长情况；并采用实时荧光定量PCR技术检测各组肿瘤组织中相关免疫基因包括．y干扰素（IFN-γ）、白细胞介素（IL）2、IL-10、转化生长因子B（TGF—β）和人叉头型基因P3（FoxP3）mRNA的表达；免疫组化法计数各组瘤旁组织中CD8＋T淋巴细胞；7-氨基放线菌素D／羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯双标法检测各组脾淋巴细胞的杀伤效应（以杀伤率表示）；氚标记胸腺嘧啶核苷掺入法测定各组脾淋巴细胞的增殖活性，酶联免疫吸附试验测定各组脾淋巴细胞培养上清液中IL-2和IFN-γ的浓度。结果（1）小鼠接种TC-1细胞后第7、14、21、28天，其肿瘤组织中BTLAmRNA的表达水平逐渐上调，第14天达最高，为2．83±0．35，与第7天的1．66±0．25比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；而HVEMmRNA的表达水平无明显变化（P〉0．05）。接种TC-1细胞后第7、14天，肿瘤组织中浸润的淋巴细胞细胞膜表面BTLA的平均荧光强度分别为33．5和51．8，两者比较，差异有统计学意义（P〈0
- 韩凌斐邱伟民胡程王玲姚红霞熊诗诣孟梦方勇马丁
- 关键词：HSP70热休克蛋白质类疱疹病毒科
- RNA干扰下调RhoA表达对卵巢癌细胞SKOV-3恶性表型的影响被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨RNA干扰(RNAi)下调RhoA表达对卵巢癌细胞SKOV-3恶性表型的影响。方法:构建RhoA基因特异性短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体,以脂质体介导转染卵巢癌细胞SKOV-3,RT-PCR和蛋白质印迹法检测RNAi后SKOV-3中RhoA的mRNA及蛋白表达水平变化;Boyden小室体外侵袭和划痕实验观察细胞侵袭和迁移能力,MTT比色法测定转染前后细胞增殖及粘附能力的变化。结果:转染RhoA shRNA的实验组细胞与转染空载体的对照组细胞比较,RhoA mRNA的表达分别为(5.46±2.02)%和(56.37±17.42)%,蛋白质的表达分别为(6.03±2.04)%和(59.03±19.94)%,细胞平均侵袭百分比为(15.84±4.17)%和(33.64±4.64)%,愈合百分比为(44.79±6.21)%和(68.36±4.46)%,增殖能力(A值)分别为0.726±0.166和1.703±0.340,P<0.05(n=3);而粘附能力(A值)分别为0.833±0.137和0.894±0.189,P>0.05(n=3)。结论:通过RNAi降低RhoA的表达能降低卵巢癌细胞SKOV-3体外侵袭、迁移和增殖能力。
- 赵良平王薇娜张庆华石晓燕梁逢奇吴汝芳马丁冯玲
- 关键词：RNA干扰RHO因子表型
- 人卵巢癌肿瘤干细胞样细胞——侧群细胞中不同亚群的干性分析被引量：1
- 2019年
- 目的研究卵巢癌细胞系中的肿瘤干细胞(CSC)样细胞一侧群细胞(SP)中不同亚群细胞的干性是否有差异,分析CSC的异质性。方法选择人浆液性卵巢癌顺铂耐药细胞株C13,采用双苯酰亚胺H0chest33342染色,应用流式细胞仪荧光激活分选法获得高度排斥染色的侧群细胞(LSP)、低度排斥染色的侧群细胞(USP)及能被双苯酰亚胺HocheSt33342染色的非侧群细胞(NSP),体外试验检测3个不同亚群的细胞体外成球能力、表达干细胞标志物、对高浓度顺铂的耐药性是否有差异。结果人卵巢癌细胞C13存在具有干性特征的SP,其亚群LSP比USP表达更高水平干细胞标志物,具有更高的体外成球能力,对顺铂具有更高的耐药性,差异有统计学意义。NSP不具有干性特征。结论体外试验证明卵巢癌细胞的SP不同亚群细胞具有不同的干性特征,CSC具有异质性。
- 翁艳洁张筱筱武雪郭立丽王常玉
- 关键词：卵巢癌肿瘤干细胞侧群细胞
- 携带小鼠HVEM的重组腺相关病毒载体的构建及鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的克隆小鼠疱疹病毒侵入介体(HVEM)基因,构建其重组腺相关病毒载体,鉴定目的基因在真核细胞中表达。方法用RT-PCR法从小鼠脾脏淋巴细胞克隆出全长HVEM基因,构建携带HVEM基因的穿梭质粒pAAV-IRES-HVEM-hrGFP和辅助质粒pAAV-RC及pAAV-Helper,利用磷酸钙共沉淀法将穿梭质粒共转染入AAV-293细胞中,采用细胞内质粒DNA同源重组法构建重组腺相关病毒rAAV-HVEM。用氯仿-PEG8000法纯化病毒,实时荧光定量PCR测病毒滴度。RT-PCR检测rAAV-HVEM在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中的表达情况。结果成功构建组装重组小鼠HVEM腺相关病毒,纯化后病毒滴度为5×1010v.g/mL,且在CHO转导细胞中能有效表达目的基因。结论构建的重组腺相关病毒载体rAAV-HVEM为组织工程相关细胞转基因构建及临床应用提供先进的载体系统,为今后进一步研究HVEM的功能及其在部分疾病基因免疫治疗中的应用奠定基础。
- 马衣努尔.买提托合提韩凌斐廖术杰周志刚董红马丁王世宣
- 关键词：腺相关病毒基因治疗
- PI3K/AKT特异性抑制剂LY294002对卯巢癌化疗增敏作用的研究被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)抑制剂LY294002对卵巢癌化疗效果的影响,方法:将LY294002单独或与顺铂、紫杉醇联合作用于卵巢癌A2780、SKOV3细胞,MTT法检测DDP、顺铂单独或联合LY294002处理后对A2780、SKOV3细胞的抑制率;采用流式细胞技术检测药物单独或联合作用对A2780和SKOV3细胞凋亡的影响;应用Western blot检测A2780和SKOV3细胞中AKT及磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达的变化。结果:联合应用LY294002能够显著提高DDP、paelitaxel对A2780和SKOV3细胞抑制率;LY294002与DDP、paclitaxel的协同治疗指数小于1,二者起协同治疗作用;联合LY294002能够增加A2780和SKOV3细胞的凋亡水平。LY294002干预组与对照组相比p-AKT蛋白的表达降低,差异有统计学意义(P<0.01)结论:LY294002能够有效提高卵巢癌A2780和SKOV3细胞对化疗药物DDP和paclitaxel的敏感性,抑制PI3K/AKT介导的信号传导通路,可明显提高卵巢癌细胞的化疗效果。
- 吴卉娟王珂陈颖郝权刘文欣卢运萍马丁
- 关键词：LY294002卵巢癌PI3K/AKT顺铂紫杉醇
- 腔隙性脑梗死患者妇科手术的围术期处理被引量：1
- 2009年
- 目的研究腔隙性脑梗死患者妇科手术的围术期处理。方法通过回顾性分析同济医院妇产科在2001～2009年对11例隙性脑梗死患者实施妇科手术前、术中、术后的处理,总结治疗效果。结果实施妇科手术的11例合并有腔隙性脑梗死的患者术后未出现并发症,治疗效果较满意。结论对有腔隙性脑梗死实施妇科手术的患者针对其疾病的特点,做好围手术期处理,可有效减少并发症的发生。
- 周志刚马衣努尔.买提托合提董虹王世宣
- 关键词：腔隙性脑梗死妇科手术围手术期
- 合并肾功能不全妇科患者围手术期处理被引量：1
- 2009年
- 目的探讨合并肾功能不全的妇科患者围手术期处理措施。方法回顾性分析1997年1月～2009月4月在华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科进行手术的7例合并肾功能不全的患者的临床资料。结果7例患者中4例给予内科保守治疗,2例分别术前、术后给予血液透析,2例术前行右肾造瘘术,所有患者均安全度过围手术期,血肌酐、尿素氮手术后较术前差别无统计学意义。结论合并肾功能不全并非手术禁忌证,给予合理的处理措施可使患者安全度过围手术期,保护患者肾脏功能,防止肾功能不全继续恶化及相关并发症发生。
- 董虹马衣努尔.买提托合提周志刚李双罗爱月王世宣
- 关键词：妇科手术肾功能不全围手术期
- 第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因对人卵巢癌A2780细胞侵袭和迁移能力的影响及相关机制被引量：8
- 2011年
- 目的探讨第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因（PTEN）对人卵巢癌A2780细胞侵袭和迁移能力的影响及相关机制。方法将携带外源性人PTEN基因的野生型质粒（WT—PTEN）和磷酸酶域突变型质粒（C124A—PTEN）转入人卵巢癌细胞株A2780中，利用Transwell小室法和划痕愈合实验检测转染前后细胞侵袭和迁移能力的变化，应用Western blot检测各组细胞PTEN及其下游相关蛋白表达的变化。以空载体质粒和未转染细胞作为对照。结果细胞侵袭实验显示，WT-PTEN／A2780、C124A—PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞穿透Matrigel胶的细胞数，分别为（24．3±2．5）个、（43．7±3．8）个、（44．7±2．1）个和（45．0±3．0）个，WT-PTEN／A2780细胞的穿膜数明显少于其他各组（P〈0．05）。划痕愈合实验显示，WT—PTEN／A2780、C124A-PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞的迁移距离分别为（54．1±3．7）μm、（78．7±3．4）μm、（78．1±3．1）μm和（76．8±3．5）μm，WT-PTEN／A2780细胞的迁移速度明显慢于C124A—PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞（P〈0．05）。WT-PTEN／A2780细胞中基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白的表达明显低于C124A．PTEN／A2780、GFP／A2780和A2780细胞（P〈0．05）。结论野生型PTEN可有效抑制A2780细胞的侵袭和迁移，该抑制作用与A2780细胞中MMP-9表达下调有关。
- 吴卉娟郝权王珂刘文欣马丁
- 关键词：卵巢肿瘤基质金属蛋白酶9迁移
