国家自然科学基金(81273976)
- 作品数：18 被引量：97H指数：7
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- 利用偏光影像技术定量观察大鼠胸主动脉中纤维结构被引量：3
- 2014年
- 目的:本实验选取大鼠胸主动脉为研究对象,探讨定量偏光影像技术对双折光性物质的成像特点与适用研究领域。方法:采用Abrio液晶偏光影像系统在未经染色条件下对青年和衰老大鼠胸主动脉纤维结构进行观察,然后对主动脉切片进行苦味酸天狼猩红染色,对比Abrio和传统偏振光技术成像的差别。结果:较传统偏振光显微镜不同,Abrio可以对纤维双折射的方位角和光程差进行定量分析。在未经染色的条件下,Abrio可对大鼠胸主动脉中具有双折光性的纤维结构清晰成像,而传统偏光显微镜在未经染色条件下不能给出有意义的信息。经苦味酸天狼猩红染色后,对比传统偏振光技术,Abrio使成像不受纤维排列方向和人为因素的影响,较为完整地反映主动脉中纤维的结构及分布情况。结论:Abrio液晶偏光影像技术能够实现对样本双折光的强弱及方向的定性和定量分析,在未经染色的条件下给出微观结构信息,适合于心血管疾病的检测与评估,可拓展应用面宽,将在未来生物医药领域中体现更大的价值。
- 陈睿陈辉雷燕马淑骅王毅
- 关键词：双折射偏振光纤维
- 人参三七川芎提取物对复制性衰老内皮细胞微丝形态学的影响被引量：7
- 2015年
- 目的探讨人参三七川芎提取物延缓内皮衰老的可能作用机制。方法通过细胞体外传代,将人心脏微血管内皮细胞（HCMEC）培养至第8代方法建立内皮细胞复制性衰老模型,结合β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色、CCK-8检测细胞增殖能力、流式细胞仪分析细胞周期方法进行衰老细胞鉴定。96孔板按照6×103~8×103/孔接种细胞,分为青年组、衰老组、白藜芦醇组和中药低、中、高剂量组,每组3个复孔。青年组为5代青年细胞,其余各组为8代复制性衰老细胞,白藜芦醇组加浓度为10μmol/L白藜芦醇溶液100μl,中药低、中、高剂量组分别加浓度为50、100、200 mg/L的人参三七川芎提取物100μl。观察各组24 h、48 h、72 h后纤维状肌动蛋白（F-actin）、单体肌动蛋白（G-actin）的形态学改变。结果衰老组细胞SA-β-gal染色阳性明显高于青年组（P〈0.01）;衰老组较青年组细胞表现为G0/G1期细胞比例上升,S期和G2/M期细胞比例下降,细胞增殖能力降低（P〈0.01）。衰老组F-actin出现断裂、应力纤维,G-actin表现为向细胞周边区域伸展移位,而细胞中央区域染色变弱;白藜芦醇组和中药低、中、高剂量组可以维持复制性衰老HCMEC微丝的结构,减少G-actin向F-actin的转变,减少应力纤维的形成,并且干预效果随着干预时间延长表现更加明显。结论人参三七川芎提取物能够保持复制性衰老HCMEC微丝的正常形态,这可能是其延缓内皮衰老的重要机制。
- 王强雷燕欧阳竞锋修成奎高永红赵明镜王毅
- 关键词：人参川芎细胞衰老纤维状肌动蛋白
- 热休克蛋白27与心血管疾病的关系及研究进展被引量：5
- 2014年
- 热休克蛋白27(HSP27)属于哺乳动物普遍存在的小休克蛋白家族,分子量大约为27 kDa,是ATP依赖型的分子伴侣。文章主要从热HSP27的影响因素和调控过程,阐述其具体的改变机制和表现形式,并且从导致动脉粥样硬化的炎症、免疫等角度论述了HSP27的作用,并认为HSP27可能是动脉粥样硬化进程和冠心病事件的重要标记物。此外从心衰、心肌缺血缺氧、房颤、心肌病等方面论述其与心血管疾病的关系。最后结合中医药干预心血管疾病从热休克蛋白方面的研究进展,说明了中医药干预心血管疾病与HSP27的意义。
- 王强雷燕李敏王洋
- 关键词：HSP27心血管疾病中医药
- 人参三七川芎提取物对自然衰老大鼠血管外膜重构的干预机制被引量：9
- 2015年
- 目的观察自然衰老大鼠血管外膜的重构特点,并探讨人参三七川芎提取物的干预作用。方法将85只20月龄的自然衰老Wistar大鼠按体重水平分层后随机分为衰老组、人参三七川芎醇提物低、中、高剂量组(下称中药低、中、高剂量组)及氯沙坦对照组(Losartan组),每组17只,另选14只2月龄青年Wistar大鼠作为青年组。中药高、中、低剂量组分别给予不同剂量的人参三七川芎醇提物[1493.4、746.7、373.4mg/(kg·d)]灌胃给药,Losartan组给予氯沙坦钾混悬液[10 mg/(kg·d)]灌胃,衰老组及青年组给予同体积蒸馏水灌胃,均每日1次。干预15周后,采用HE染色法观察各组大鼠胸主动脉壁形态;采用苦味酸天狼猩红染色法观测血管壁胶原种类、分布和含量;放射免疫分析法检测血浆肾素活性(plasma renin activity,PRA)、血浆血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)浓度及外膜组织AngⅡ含量;生物化学分析法检测外膜组织羟脯氨酸水平;实时荧光定量多聚酶链式反应(real-time PCR,RT-PCR)检测外膜组织血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensinⅡreceptor 1,AT_1R)、血管紧张素Ⅱ2型受体(angiotensinⅡreceptor 2,AT_2R)mRNA水平;Western blot法检测外膜组织AT_1R、AT_2R蛋白表达水平。结果与青年组比较,衰老组血管外膜增厚,外膜厚度/管径增高,胶原纤维堆积,Ⅰ型胶原面积增加,Ⅲ型胶原面积减少,Ⅲ型胶原/Ⅰ型胶原降低(P<0.05),血浆PRA及AngⅡ降低(P<0.01,P<0.05),外膜组织AngⅡ及羟脯氨酸含量增高,AT_1R mRNA及蛋白表达下调,AT_2R mRNA及蛋白表达上调(P<0.01,P<0.05)。与衰老组比较,中药低、中、高剂量组均可改善衰老血管形态学改变;中药中、高剂量组及Losartan组外膜厚度/管径均减小,中药高剂量组及Losartan组Ⅰ型胶原面积减少,Ⅲ型胶原面积增加,Ⅲ型胶原/Ⅰ型胶原明显升高,血管外膜羟脯氨酸含量明显降低(P<0.05,P<0.01);中药中、高剂量及Losartan组外膜组织中Ang
- 王洋雷燕杨静刘剑刚
- 关键词：血管衰老血管外膜益气活血
- 人参三七川芎提取物对复制性衰老血管平滑肌细胞SM22α蛋白的影响被引量：4
- 2016年
- 目的:观察人参三七川芎提取物对复制性衰老血管平滑肌细胞及其骨架蛋白相关蛋白平滑肌22α(SM22α)的影响。方法:以人主动脉平滑肌细胞作为研究对象,复制性衰老9代细胞作为衰老模型,实验分为青年组(5代细胞),模型组(9代细胞),人参三七川芎提取物低、中、高(100,200,400 mg·L-1)剂量组及白藜芦醇组(10μmol·L-1),药物干预时间为48 h。采用β-半乳糖苷酶特异染色法计算蓝染细胞比率,流式细胞技术分析细胞周期,免疫荧光染色观察细胞SM22α形态的改变,实时荧光定量-聚合酶链式反应(q PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测SM22α的mRNA及蛋白表达情况。结果:与青年组比较,模型组细胞体积增大,形态不规则,G0/G1期数量增多,S期数量减少,且β-半乳糖苷酶染色蓝染数量减少(P<0.01),符合衰老模型特点,且SM22α染色模糊暗淡,边缘不显,荧光强度明显减弱,SM22αmRNA及蛋白表达均下降(P<0.01)。与模型组比较,药物干预后,可以有效的增加β-半乳糖苷酶染色蓝染细胞数量,减少G0/G1期的细胞数量,同时增加S期的细胞数量,增强SM22α荧光染色强度,使得SM22αmRNA及蛋白表达均增加,并具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:复制性衰老的血管平滑肌细胞可以作为衰老研究的模型;骨架蛋白相关蛋白SM22α的形态、基因表达和蛋白表达在细胞衰老过程中改变明显,其可能与骨架蛋白一同参与了平滑肌细胞衰老的进程;人参三七川芎提取物一定程度上延缓了血管平滑肌细胞的老化,且对于SM22α有明显干预作用,并可能通过此作用及对骨架蛋白的作用一同延缓血管老化的进程。
- 修成奎雷燕王强景晓杨姜明
- 关键词：衰老血管老化细胞骨架
- 白藜芦醇延缓心肌微血管内皮细胞衰老的作用机制被引量：7
- 2018年
- 目的：探讨白藜芦醇延缓人心脏微血管内皮细胞衰老的作用,从细胞骨架角度分析其作用机制。方法：通过热休克蛋白27（HSP27）shRNA细胞系的建立,将组别为8代复制性衰老模型组（衰老组）,白藜芦醇组（10μmol·L-1）,空载质粒（Mock）组,HSP27shRNA组,HSP27shRNA＋白藜芦醇组（10μmol·L-1）。运用β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老,细胞计数（cell counting kit-8,CCK-8）检测细胞增殖能力,激光免疫共聚焦显微镜观察纤维状肌动蛋白（F-actin）和球型蛋白单体（G-actin）的形态学改变,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测F-actin蛋白的表达情况。结果：与衰老组比较,白藜芦醇组β-半乳糖苷酶染色比例下降（P〈0.01）,细胞增殖能力增加（P〈0.01）,F-actin线条较为完整的分布于细胞边缘,G-actin圆润饱满的分布于细胞中央,蛋白表达减少（P〈0.01）;热休克蛋白27（heat shock protein 27,HSP27）沉默后,与Mock组比较,HSP27shRNA组及HSP27shRNA＋白藜芦醇组β-半乳糖苷酶染色比例增加（P〈0.01）,细胞增殖能力下降（P〈0.01）,F-actin外周致密带边缘变得毛糙不规整,崩解消散,细胞的形状不能清晰的呈现;G-actin表现为边缘变模糊呈絮状向外延伸,而细胞中央区域染色离散,形态不规则,F/G-actin的平均光密度值下降（P〈0.01）,蛋白表达减少（P〈0.01）。结论：白藜芦醇能够延缓内皮衰老,促进增殖,其中HSP27下调F-actin的表达可能是白藜芦醇延缓内皮衰老的重要机制所在。
- 王强修成奎雷燕杨静
- 关键词：白藜芦醇纤维状肌动蛋白
- 血管外膜成纤维细胞及其还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶激活在血管损伤中的作用被引量：5
- 2015年
- 血管外膜是血管壁最复杂的组成部分,血管外膜成纤维细胞(AF)是血管外膜主要的细胞成分,在血管的病理生理过程中发挥着重要作用。AF的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶激活与活性氧生成是多种血管损伤的始发阶段和共同机制。本综述对AF及其NADPH氧化酶、活性氧在血管损伤中的作用进行了总结。
- 王洋雷燕
- 关键词：血管外膜成纤维细胞血管损伤
- 人参三七川芎醇提物对衰老人心脏微血管内皮细胞自噬的影响被引量：11
- 2017年
- 目的观察人参三七川芎醇提物延缓内皮细胞衰老的可能作用机制。方法实验分为衰老细胞组、自噬模型组、白藜芦醇组、人参三七川芎醇提物组,除衰老细胞组外,其余各组的衰老人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)通过饥饿方法建立自噬模型。白藜芦醇组用10μmol/L白藜芦醇溶液培养,人参三七川芎醇提物组用100 mg/L人参三七川芎提取物溶液培养48 h。采用电子显微镜观察细胞中自噬小体的形态学改变,western blot法检测自噬蛋白Beclin1、LC3B表达情况。结果与自噬模型组比较,人参三七川芎醇提物组和白藜芦醇组细胞质中出现较多的独立双层及多层膜结构的自噬体。与自噬模型组比较,人参三七川芎醇提物组和白藜芦醇组Beclin1、LC3B蛋白表达明显增多(P<0.01),且白藜芦醇组Beclin1、LC3B蛋白的表达明显多于人参三七川芎醇提物组(P<0.01)。结论人参三七川芎醇提物可促进衰老内皮细胞自噬体的产生及自噬蛋白的表达,这可能是其延缓内皮衰老的重要机制之一。
- 王强修成奎杨静雷燕
- 关键词：衰老人参心脏微血管内皮细胞
- 非酶糖基化与血管老化的关系被引量：2
- 2014年
- 以非酶糖基化衰老学说为依据,系统回顾了生理及病理状态下,非酶糖基化反应作用于血管,造成血管损伤的相关文献,证实了随着增龄,机体的非酶糖基化程度逐渐加深,并可通过多种途径作用于血管,引起血管与老化相关的一系列形态与功能的改变。文章试通过对非酶糖基化与血管衰老二者关系的初步探讨,为今后延缓血管老化的研究提供相应的理论依据。
- 陈睿雷燕
- 关键词：非酶糖基化血管老化氧化应激交联反应
- 非酶糖基化与血管老化关系的研究进展
- 以非酶糖基化衰老学说为依据，系统回顾了生理及病理状态下，非酶糖基化反应作用于血管，造成血管损伤的相关文献，证实了随着增龄，机体的非酶糖基化程度逐渐加深，并可通过多种途径作用于血管，引起血管与老化相关的一系列形态与功能的改...
- 陈睿雷燕
- 关键词：非酶糖基化血管老化氧化应激交联反应
