广东省医学科学技术研究基金(A2010222)
- 作品数:2 被引量:4H指数:1
- 相关作者:魏桂芬孔令平张惠爱刘妍李艳玲更多>>
- 相关机构:广州医学院中山大学更多>>
- 发文基金:广东省医学科学技术研究基金广东省中医药局建设中医药强省科研课题更多>>
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- 人端粒酶反转录酶对人胚胎皮质神经元损伤的保护被引量:1
- 2013年
- 背景:端粒酶可维持端粒长度,避免细胞复制性衰老和凋亡,其催化亚基端粒酶反转录酶还具有抗凋亡和调节细胞生存的作用。目的:观察人端粒酶反转录酶对β淀粉样蛋白1-40引起的人胚胎皮质神经元损伤的影响。方法:分离和培养12-16周龄人胚胎皮质神经元,将人端粒酶反转录酶基因重组腺病毒转染至神经元。免疫细胞化学法检测人端粒酶反转录酶基的表达,端粒重复序列扩增酶联免疫吸附法检测端粒酶活性。转染后第3天,给予10μmol/Lβ淀粉样蛋白1-40作用24h后,应用MTT检测细胞活力。荧光探针2’7’-二乙酰二氯荧光素标记检测细胞内活性氧水平,比色法测定细胞匀浆中谷胱甘肽含量。结果与结论:转染后第3天,人端粒酶反转录酶的表达最高,并重建了其端粒酶活性;10μmol/Lβ淀粉样蛋白1-40显著降低神经元的细胞活力和谷胱甘肽的含量(P<0.05和P<0.01),升高活性氧水平(P<0.05)。转染了人端粒酶反转录酶基因的神经元能显著对抗β淀粉样蛋白1-40的毒性作用,增加细胞的活力和谷胱甘肽含量(P<0.05和P<0.01),降低活性氧水平(P<0.05)。结果表明,人端粒酶反转录酶对β淀粉样蛋白1-40引起的人胚胎皮质神经元的损伤有明显保护作用。
- 魏桂芬刘妍李艳玲张惠爱孔令平
- 关键词:端粒酶人端粒酶反转录酶皮质神经元
- 阿尔茨海默病胞质杂交细胞的构建与其线粒体的结构功能变化被引量:3
- 2013年
- 目的:探讨AD胞质杂交细胞的构建方法及其线粒体形态功能变化情况,为后续研究提供细胞模型。方法:利用融合剂将AD患者及健康老人血小板分别与线粒体DNA缺失细胞(ρ^0细胞)进行融合,建立AD和对照细胞质杂交细胞,透射电镜及PCR法鉴定;透射电镜观察胞质杂交细胞线粒体结构;MTT检测细胞活力;荧光探针DCFH—DA检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果:ρ^0细胞与血小板融合后重新出现线粒体和mtDNA与同期对照组胞质杂交细胞比较,到培养晚期,AD胞质杂交细胞中异常线粒体显著增多,细胞活力明显降低,ROS水平明显增高。结论:成功构建出AD胞质杂交细胞和对照组胞质杂交细胞,为下一步的研究奠定了细胞模型基础。
- 孔令平刘妍魏桂芬李艳玲张惠爱汪华侨
- 关键词:阿尔茨海默病线粒体