国家教育部博士点基金(20060511002) 作品数:26 被引量:142 H指数:7 相关作者: 刘德立 熊丽 袁永泽 李娜 贲亚琍 更多>> 相关机构: 华中师范大学 华中科技大学 江汉大学 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 国家自然科学基金 湖北省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 生物学 环境科学与工程 农业科学 医药卫生 更多>>
三株沙漠放线菌XJSS-21、XJSS-39和XJSS-58的多相分类及特性研究 被引量:2 2009年 从新疆吐鲁番鄯善县典型沙漠地区采集的样品中分离获得3株放线菌菌株XJSS-21、XJSS-39和XJSS-58,对其形态特征、生理生化特性、反硝化能力、细胞壁化学组分以及16S rRNA基因序列等进行了多相分类研究,发现3株沙漠放线菌均能产生纤维素酶,淀粉酶和蛋白酶,且菌株XJSS-21具有很强的反硝化能力,XJSS-58属于轻度耐盐菌。初步确定XJSS-21、XJSS-39和XJSS-58可能分别属于Streptomyces humidus subsp.antitumoris、Nocardiopsis dassonvillei和Streptomyces mutabilis。 魏艳红 阿不都克里木·热依木 熊鹰 许尚营 邓子厚 袁永泽 刘德立关键词:链霉菌属 镉、汞、锌3种重金属的雌激素样作用 被引量:4 2009年 为探讨镉、汞、锌3种重金属的雌激素样作用,采用双杂交酵母法测定了醋酸镉、氯化汞、醋酸锌单独作用时对重组基因酵母β-半乳糖苷酶诱导活性的EC50值.实验结果表明,醋酸镉浓度为1.0×10-5mol·L-(1实验浓度范围10-7~10-2mol·L-1),氯化汞浓度为5.0×10-7mol·L-(1实验浓度范围10-9~10-5mol·L-1),醋酸锌浓度为1.0×10-4mol·L-(1实验浓度范围10-9~10-2mol·L-1)时对酵母β-半乳糖苷酶诱导活性最大,分别达到1.3、0.95和1.1U.不能求出镉、汞、锌单独作用时对β-半乳糖苷酶诱导活性的EC50值.一味计算EC50值不仅难以评价重金属的雌激素活性,而且限制重组受体基因酵母法的普遍运用.一些重金属通过MCF-7细胞法(E-screen)呈阳性,通过重组hERα酵母法YES检测呈阴性,有可能是重金属通过与ERβ作用而产生效应.若构建出含ERβ基因的双杂交酵母菌株,与现有的方法互补将能完善环境雌激素的体外测评系统. 周巧巧 熊丽 刘德立 牟文 杨雪 张灿关键词:重金属 雌激素活性 重组基因酵母法研究酞酸酯类化合物的类雌激素作用 被引量:2 2011年 为了检测五种酞酸酯类化合物的类雌激素活性,采用重组人雌激受体α、相关效应元件以及β-半乳糖苷酶报告基因酵母分别测定17β-雌二醇(E)2、邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二辛酯(DOP)、邻苯二甲酸丁苄酯(BBP)单独作用时诱导酶活并计算其EC50。通过各化合物与E2的EC50的比以及最大β-半乳糖苷酶活性来比较酞酸酯类化合物的类雌激素活性。五种酞酸酯类化合物的实验浓度范围为1.0×10^-3-1.0×10^-11 mol/L。结果表明,DEP(1×10^-7-1×10^-9 mol/L)、DBP(1×10^-6-1×10^-9 mol/L)、BBP(1×10^-3-1×10^-6 mol/L)具有明显的类雌激素活性,诱导的最大酶活分别为:1.515、0.832 2、1.669,而DMP和DOP并未检出明显的类雌激素活性。DEP、DBP、BBP与E2的EC50的比分别为8.85×10-2、2.54×10^-2、8.82×10^-6。说明DEP、DBP在低浓度就表现出类雌激素活性,而BBP在较高浓度才表现出类雌激素活性。 杨雪 易千慧 周巧巧 牟文 张灿 何桢 胡晓静 熊丽 刘德立关键词:酞酸酯类化合物 新型好氧反硝化菌的分离鉴定及其在人工废水中的应用研究 本文从武汉市某纺织厂排污口采样,通过富集培养法筛选分离到一株高效好氧反硝化细菌HS-043。对该菌株在SC培养基中以及人工废水(AWW)中的反硝化能力进行了研究。研究结果表明:细菌HS-043能在12小时内将人工废水中的... 袁利玲 杨俊忠 许尚营 倪砚 李平 袁永泽 刘德立关键词:好氧反硝化 废水脱氮 文献传递 蜡状芽孢杆菌好氧反硝化特性研究 被引量:38 2008年 从湖北省洪湖、仙桃等地采集的活性污泥和土壤中分离得到32株好氧反硝化细菌,对其进行反硝化能力测定,其中3株菌的反硝化能力较强,能以NaNO3为唯一氮源生长,分别命名为HS-N25,HS-MP12和HS-MP13.这3株菌可以分别在18,15和12 h内将特定培养基SC中起始浓度为10 mmol/L的NO3-完全降解.通过菌株形态观察、生理生化及16S rDNA分子鉴定,菌株HS-N25,HS-MP12及HS-MP13与蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)亲缘关系最为接近,同源性达99%.初步鉴定这3株菌为蜡状芽孢杆菌. 杨希 刘德立 邓灵福 朱德锐 高强 魏艳红 刘松 邹煜平 熊丽关键词:蜡状芽孢杆菌 好氧反硝化 RDNA 叶蝉散人工抗原中间产物2-异丙基苯甲酰氯的合成 2010年 根据叶蝉散分子结构的特点,对叶蝉散人工抗原的合成进行了3步实验设计,即以叶蝉散为原料,在强碱性(pH>12)下水解生成2-异丙基苯酚,再加入三光气反应生成活性中间体2-异丙基苯甲酰氯,然后再与6-氨基己酸合成2-苯异丙基-N-(5-羧基戍烷)氨基甲酸酯。此研究成功地进行2步化学反应,并获得2步化学反应产物:2-异丙基苯酚和2-异丙基苯甲酰氯,从而为叶蝉散多克隆抗体和单克隆抗体的制备提供帮助。 贲亚琍 陆文昌 刘德立关键词:叶蝉散 人工抗原 肺炎链球菌HMG-CoA合成酶动力学研究 2010年 目的:在克隆表达肺炎链球菌HMG-CoA合成酶(HMGS)的基础上,对HMGS进行动力学研究。方法:采用紫外分光光度法,以乙酰-CoA作为底物,检测乙酰乙酰-CoA在300 nm处吸收值的变化。结果:肺炎链球菌HMGS的最适pH 9.75、最适温度37℃、最适MgCl2浓度为10 mol/L,粗酶提取物的比活为0.76μmol/min.mg-1,分离纯化后的比活为3.24μmol/min.mg-1,比活提高4.26倍。结论:在37℃、pH 9.755、mol/L MgCl2的最适反应条件下,肺炎链球菌HMGS的Vmax和Km值分别为4.69μmol/min.mg-1和213μmol。 贲亚琍 崔古贞 刘德立关键词:肺炎链球菌 1株新型产芽孢的Serratia菌株的分离鉴定及特性研究 2010年 从城市生活垃圾处理场分离到一株产芽孢的菌株HS-1E,该菌为革兰氏阴性杆菌,有荚膜,有运动性,有微弱固氮能力.能在无氮培养基中缓慢生长.在LB、肉汁固体培养基上,菌落为有光泽的红色圆形.对该菌株HS-1E的16S rRNA基因的全序列测序并进行DNA同源性分析,得到系统发育树状图.在此树状图中,它与Serratia属的关系最近,与粘质沙雷氏菌的同源性为99.0%.其主要生理生化特征也与Serratia属相符.但由于产芽孢的Serratia属以前从未报道过,故HS-1E为Serratia属的1个新种. 李娜 许尚营 袁利玲 郑永良 袁永泽 杨江科 刘德立关键词:SERRATIA 玉米黑粉菌CYP51稀有密码子和mRNA二级结构分析及与杀菌剂戊唑醇分子对接 被引量:3 2011年 通过截短玉米黑粉菌CYP51(P450-14DM,UmCYP51)基因(去除编码跨膜区部分)和选取不同的表达载体,构建了9种重组表达质粒,在大肠杆菌中进行UmCYP51基因的表达,发现只有BL21(DE3)/pET32-Um-35重组表达工程菌获得了表达.对稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构进行分析,结果表明稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构对UmCYP51蛋白的表达都有影响.适用于稀有密码子表达的菌株Rosetta(DE3)不利于UmCYP51蛋白的表达;同时只有翻译起始区二级结构自由能值最低的重组载体pET32-Um-35可以表达.为了设计以UmCYP51为靶标的新型抗真菌抑制剂,基于最新解析的真核生物人类的CYP51晶体结构,利用同源模建的方法构建了UmCYP51的三维结构并进行了分子动力学模拟优化.通过与商品化杀菌剂戊唑醇进行分子对接获得了此类抑制剂与UmCYP51的理论结合方式,阐述了戊唑醇分子的杀菌机理,为开发新型的抗真菌抑制剂奠定了基础. 李书祥 韩睿 袁利玲 熊丽 袁永泽 杨江科 闫云君 刘德立关键词:翻译起始区 稀有密码子 同源模建 分子对接 Kinetics and mechanisms of p-nitrophenol biodegradation by Pseudomonas aeruginosa HS-D38 被引量:7 2009年 The kinetics and mechanisms of p-nitrophenol(PNP)biodegradation by Pseudomonas aeruginosa HS-D38 were investigated. PNP could be used by HS-D38 strain as the sole carbon,nitrogen and energy sources,and PNP was mineralized at the maximum concentration of 500 mg/L within 24 h in an mineral salt medium(MSM).The analytical results indicated that the biodegradation of PNP fit the first order kinetics model.The rate constant kPNP is 2.039×10-2/h in MSM medium,KPNP+N is 3.603×10-2/h with the addition of ammonium chloride and KPNP+C is 9.74×10-3/h with additional glucose.The addition of ammonium chloride increased the degradation of PNP.On the contrary,the addition of glucose inhibited and delayed the biodegradation of PNP.Chemical analysis results by thin-layer chromatography(TLC),UV-Vis spectroscopy and gas chromatography(GC)techniques suggested that PNP was converted to hydroquinone(HQ)and further degraded via 1,2,4-benzenetriol(1,2,4-BT)pathway. ZHENG Yongliang LIU Deli LIU Shiwang XU Shangying YUAN Yongze XIONG Li关键词:对硝基苯酚 飞行动力学 绿脓杆菌 铜绿假单胞菌