浙江省医药卫生科学研究基金(2012KYB056)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 相关作者：张文元李颖杨亚冬刘芳菲房国坚更多>>
- 相关机构：浙江省医学科学院浙江省立同德医院浙江中医药大学更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金杭州市科技发展计划项目浙江省科技厅项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人牙周膜细胞在矿化液作用下的增殖、成骨分化与相关基因表达被引量：4
- 2014年
- 目的:分离培养人牙周膜细胞(PDLCs),观察矿化液对PDLCs细胞增殖和成骨分化的影响。方法:酶解组织块后获得人PDLCs,矿化液处理后观察对细胞影响。采用MTT法检测对细胞增殖;流式细胞分析细胞周期改变;分别通过碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红染色,RT-PCR观察矿化液诱导成骨分化的效果。结果:矿化液对人PDLCs的增殖无显著影响,高浓度地塞米松(Dex)的矿化液有一定抑制作用。含Dex的矿化液可促进成骨分化,包括ALP活性提高,矿化结节形成,以及成骨基因的表达上调。S100A4和PLAP-1是相对特异的牙周膜标志,也参与矿化液诱导的成骨分化的调控过程。结论:含地塞米松的矿化液可有效促进人PDLCs的成骨分化,对细胞增殖影响较小。PDLCs是一种新型的种子细胞,可应用于骨组织工程。
- 李颖张文元杨亚冬张科技房国坚
- 关键词：牙周膜细胞矿化液成骨分化
- 牙周膜细胞与壳聚糖温敏水凝胶生物相容性评价被引量：1
- 2013年
- 目的:评价壳聚糖温敏水凝胶与牙周膜细胞的生物相容性。方法:将牙周膜细胞接种于壳聚糖温敏水凝胶中固化后进行三维培养。通过MTT法、细胞周期分析,活/死细胞染色法检测牙周膜细胞与壳聚糖温敏水凝胶的生物相容性。结果:壳聚糖溶液加入β-磷酸甘油钠后具有温敏特性,在生理温度下固化形成凝胶。壳聚糖水凝胶提取液对细胞增殖没有影响,并可提高细胞S期的比例。牙周膜细胞在壳聚糖水凝胶中三维培养环境下大部分可存活。结论:壳聚糖温敏水凝胶具有良好的生物相容性,有望应用于牙周组织工程。
- 谷子芽翟强吕秋峰彭灿星刘芳菲史月华
- 关键词：牙周膜细胞壳聚糖温敏水凝胶
- 几种胚胎干细胞标志在牙周膜细胞中的表达及意义被引量：2
- 2013年
- 目的检测部分胚胎干细胞标志在牙周膜细胞中的表达。方法通过酶解组织块法分离牙周膜细胞,利用多向分化实验和流式细胞术分析表面标志对获得细胞进行鉴定。利用免疫荧光法和RT-PCR法检测牙周膜细胞中Oct4、Nanog、Sox2、SSEA-4、TRA-1-60、TRA-1-81这些胚胎干细胞标志的表达。结果牙周膜细胞为成纤维细胞样,可分化为成骨细胞和成软骨细胞,可均一表达间充质细胞标志CD44、CD90、CD105,异质性表达间充质标志CD146、Stro-1。细胞免疫荧光实验显示牙周膜细胞表达部分胚胎干细胞标志:Oct4、Nanog、SSEA-4、TRA-1-60阳性,Sox2、TRA-1-81阴性。半定量RTPCR结果显示P3和P8代牙周膜细胞表达Oct4和Nanog,表达量差异不大,Sox2则为阴性。结论牙周膜细胞除了表达常用间充质干细胞标志外,也可表达部分胚胎干细胞标志,这对牙周膜细胞的鉴定和进一步分选纯化有一定应用价值。
- 谷子芽李颖张文元杨亚冬翟强吕秋峰彭灿星
- 关键词：牙周膜细胞胚胎干细胞
- 地塞米松诱导牙周膜干细胞的定向成骨分化及凋亡被引量：3
- 2013年
- 背景:牙周膜干细胞是一类起源于牙组织的成体干细胞,具有良好的成骨分化能力,有望在骨组织工程中得到应用。目的:观察成骨诱导液对牙周膜干细胞成骨分化能力及细胞早期凋亡的影响。方法:从原代牙周膜组织中分离得到牙周膜干细胞,以1×104/cm2浓度铺板后开始诱导。利用1,10,100 nmol/L地塞米松、β-磷酸甘油钠、维生素C为成骨诱导剂,以碱性磷酸酶活性检测、茜素红矿化结节染色、荧光定量PCR等方法对细胞成骨情况进行鉴定,采用AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡情况。结果与结论:地塞米松可有效诱导牙周膜干细胞成骨分化,可显著提高碱性磷酸酶活性,促进茜素红矿化结节形成,提高成骨相关基因骨粘连蛋白及Ⅰ型胶原表达。根据碱性磷酸酶活性和矿化结节实验结果,地塞米松的成骨诱导具有浓度梯度效应,其中100 nmol/L地塞米松具有最佳成骨诱导能力。细胞凋亡结果提示,地塞米松诱导的成骨分化具有一定促凋亡作用,可诱导牙周膜细胞的早期凋亡。
- 谷子芽翟强吕秋峰彭灿星刘芳菲彭晖
- 关键词：干细胞牙周膜干细胞成骨分化碱性磷酸酶荧光定量PCR凋亡
- 人牙周膜细胞复合壳聚糖-胶原温敏水凝胶异种移植构建可注射骨组织的研究
- 2014年
- 目的观察人牙周膜细胞复合壳聚糖-胶原温敏水凝胶异种移植小鼠皮下的组织再生,评价其作为可注射骨组织的可行性。方法将壳聚糖、胶原、β-磷酸甘油钠按比例混合构建温敏性水凝胶。通过活/死细胞染色法检测人牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)在壳聚糖-胶原水凝胶三维培养中的存活。PDLCs成骨预诱导后复合水凝胶注入小鼠背部皮下,6周后取出植入物,通过HE、Masson染色法观察组织的再生以及胶原纤维的形成。结果壳聚糖-胶原水凝胶可支持PDLCs的三维培养,体内实验表明无刺激性。复合细胞后的凝胶支架在动物皮下可形成血管化包块,结缔组织和胶原纤维形成明显高于无细胞的对照组。结论壳聚糖-胶原温敏水凝胶是一种理想的可注射支架,复合PDLCs有望构建可注射骨组织,修复骨缺损。
- 李颖杨亚冬谷子芽杨悦傅婷张文元
- 关键词：牙周膜细胞壳聚糖胶原温敏水凝胶
