国家自然科学基金(81270189)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：向定成何建新戴波邱健陈斌更多>>
- 相关机构：广州军区广州总医院广州医科大学广东省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 钠钙交换体启动子促进诱导多能干细胞向心肌细胞转化被引量：1
- 2014年
- 背景:诱导多能干细胞治疗缺血性心脏病被认为是极具前景的方法,但目前仍未找到一种理想的诱导方式。目的:探讨钠钙交换体(NCX1)启动子诱导多能干细胞体外分化为心肌细胞的作用。方法:构建含钠钙交换体1启动子的pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒质粒,使用ViraPowerTM慢病毒包装系统共转染293FT细胞。收集病毒测定病毒滴度后感染小鼠诱导多能干细胞,并使用嘌呤霉素进行筛选。观察胚状体数量以及诱导多能干细胞的分化效率,使用RT-PCR、免疫荧光分析法检测心肌特异标记物。结果与结论:成功构建了含钠钙交换体1启动子的pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒,感染小鼠诱导多能干细胞后使用流式细胞仪分选NCX1+/GFP+细胞。与NCX1-/GFP-细胞相比,NCX1+/GFP+细胞在4 d即出现细胞分化和跳动,NCX1+细胞GATA4/MEF2c/Nkx2.5基因表达分别是NCX1-细胞的4.2,7.5,2.5倍,免疫荧光显示CX43和心肌肌钙蛋白I呈阳性表达。结果表明,钠钙交换体1启动子可以促进小鼠诱导多能干细胞向心肌细胞分化。
- 戴波李洪涛刘泽肖定璋余细勇陈斌何建新向定成邱健Wang Yi-gang
- 关键词：干细胞慢病毒国家自然科学基金
- 过表达miR-29b1在缺氧诱导的心肌细胞凋亡中的作用被引量：3
- 2018年
- 目的:探讨microRNA-29b1(miR-29b1)在缺氧诱导的心肌细胞凋亡中的作用。方法:构建体外心肌细胞AC16细胞缺氧模型来模拟体内心肌细胞缺血缺氧状态。缺氧条件为1%O_2、37℃,24和48 h。分别转染miR-29b1 mimic和Negative control。细胞凋亡采用Annexin V/PI试剂盒通过流式细胞仪检测。使用Western blot检测Bcl-2,Bax,Caspase-3和Caspase-9蛋白表达变化。结果:成功转染miR-29b1 mimics和Negative Control进入AC16心肌细胞。流式细胞仪分析显示凋亡率在转染后显著降低。Western blotting显示在转染后Bcl-2,Bax及Bcl-2/Bax表达轻度增加,Caspase-3和Caspase-9在转染后表达增加明显(P<0.05)。结论:MiR-29b1可抑制心肌细胞缺氧后的凋亡。
- 宋舒璇戴波肖定璋何建新向定成邱健
- 关键词：心肌细胞缺氧凋亡
