国家自然科学基金(81270545)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：朱红伟余枭黄利华李霞余灿更多>>
- 相关机构：中南大学湘雅三医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠高迁移率族蛋白B1基因短发卡RNA的构建及干扰效果检测
- 2015年
- 目的 构建有效靶向小鼠高迁移率族蛋白B1 （HMGB1）基因的短发卡RNA（shRNA）载体.方法 针对小鼠HMGB1序列设计4条HMGB1干扰序列的shRNA载体：pYr-1.1-musHMGB1-sh1～4以及与哺乳动物基因组无同源性序列的shRNA作为对照（NC）组,Xho Ⅰ酶切鉴定其序列.然后利用质粒转染小鼠肝癌细胞株Hepal-6,实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测干扰效率.结果 经酶切凝胶电泳证实shRNA构建正确;质粒筛选结果表明,转染48h后,pYr-1.1-musHMGB1-sh1～4及NC组的荧光表达率为85％、78％、75％、70％、60％;FQ-PCR显示pYr-1.1-musHMGB1-sh1～4组及NC组转染Hepal-6细胞48h后相对表达量分别为0.52±0.05、0.59±0.08、0.61±0.08、0.57±0.21、1.02±0.21.结论 成功构建表达靶向HMGB1的4条shRNA重组质粒载体,其中pYr-1.1-musHMGB1-sh1质粒对HMGB1基因的抑制作用最强,为研究HMGB1的功能提供实验基础.
- 朱红伟李志强黄利华余枭
- 关键词：高迁移率族蛋白B1RNA干扰
- 高迁移率族蛋白-1在急性胰腺炎大鼠胰腺中的表达被引量：4
- 2014年
- 目的 探讨高迁移率族蛋白-1（HMGB1）在急性胰腺炎大鼠血清及胰腺组织中的表达及意义.方法 44只SD大鼠[（350±30）g]随机分为假手术组和实验组,实验组以5％牛黄胆酸钠胰胆管逆行注射制作急性胰腺炎大鼠模型.酶联免疫吸附试验检测外周血液中不同炎性因子的表达,Western blot法检测胰腺组织中HMGB1的蛋白表达.结果 早期炎性因子白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α在造模3h后表达明显升高,6h达峰值,12 h后出现表达下调[IL-1β：（163.42±19.63） ng/L （6 h）,IL-6：（168.98±19.97） ng/L （6 h）,TNF-α：（1 438.60±94.78） ng/L（6 h）,P＜O.05].HMGB1在外周血清中,3h无明显表达,6h后持续升高[HMGB1：（192.46±34.29） ng/L（6 h）,P＜0.05].结论 HMGB1在急性胰腺炎中的表达晚于早期炎性因子IL-1、TNF-α、IL-6,可能在维持和促进急性胰腺炎的发生、发展中起关键作用.
- 余枭余灿李霞黄利华朱红伟
- 关键词：急性胰腺炎高迁移率族蛋白-1炎性因子
