您的位置： 专家智库
>
资助详情>
中国博士后科学基金(2005037677)
中国博士后科学基金(2005037677)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：邹晖陆俊羽张珍祥徐永健倪望更多>>
- 相关机构：华中科技大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 全反式维甲酸对人肺动脉平滑肌细胞表型和迁移的影响及可能机制被引量：5
- 2006年
- 目的探讨全反式维甲酸(atRA)对培养的人肺动脉平滑肌细胞(PASMC)表型和迁移的影响及可能机制。方法培养的人PASMC株随机分成8组:对照组(A组)、溶媒组(B组)、10%胎牛血清干预组(C组)、atRA干预组分别加入浓度为0.001μmol/L(D组)、0.01μmol/L(E组)、0.1μmol/L(F组)、1μmol/L(G组)、10μmol/L(H)组的atRA,干预24 h后用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组细胞JWA基因mRNA表达,用改良Boyden小室法检测各组迁移细胞数,用RT-PCR法及免疫细胞化学法检测各组细胞内平滑肌细胞α肌动蛋白(SM-α-actin)mRNA及蛋白表达。结果人PASMC内JWA mRNA表达量A、B、C组分别为0.125±0.014、0.164±0.018、0.164±0.006,3组间比较差异无统计学意义(P均>0.05);而D组(0.326±0.018)、E组(0.440±0.033)、F组(0.460±0.040)、G组(0.589±0.024)、H组(0.821±0.050)分别与A、B、C组比较差异均有统计学意义(P均<0.01);迁移细胞数C组为(30.4±7.4)个/高倍视野(HP),与A组[(7.2±1.9)个/HP]、B组(6.8±2.3)个/HP]比较差异有统计学意义(P均<0.01);而D组[(21.8±2.9)个/HP]、E组[(17.2±2.3)个/HP]、F组[(14.4±3.5)个/HP]、G组[(12.6±3.4)个/HP]、H组[(8.8±2.4)个/HP]与C组比较差异有统计学意义(P均<0.01);但G、H组与A、B组比较差异无统计学意义(P均>0.05);细胞内SM-α-actin蛋白表达量C组为0.219±0.018,与A组(0.319±0.011)、B组(0.325±0.005)比较差异均有统计学意义(P均<0.01);E组(0.328±0.016)、F组(0.386±0.025)、G组(0.442±0.017)、H组(0.501±0.018)与C组比较差异均有统计学意义(P均<0.01);而F、G、H组与A、B组比较差异均有统计学意义(P均<0.01);细胞内SM--αactin mRNA表达量C组为0.144±0.009,与A组(0.299±0.023)、B组(0.296±0.041)比较差异有统计学意义(P均<0.01);而D组(0.487±0.014)、E组(0.501±0.020)、F组(0.611±0.018)、G组(0.774±0.013)、H组(0.851±0.026)与A、B、C组比较差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论atRA能诱导人PASMCs内JWA基因表达增加,使
- 陆俊羽张珍祥徐永健邹晖倪望陈士新
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞JWA迁移表型维甲酸
- 整合素和粘着斑激酶在JWA基因抑制诱导的人肺动脉平滑肌细胞迁移调控中的作用被引量：3
- 2005年
- 目的探讨整合素和粘着斑激酶是否在JWA基因抑制诱导的人肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)迁移调控中起作用。方法前期实验将JWA核酶基因构建到逆转录病毒载体pLXSN上,转染入体外培养的人PASMCs内,并证实转染的JWA特异性核酶基因能抑制PASMCs内JWA基因的表达。该研究应用改良Boyden小室法测定细胞迁移情况,半定量RT-PCR(sqRT-PCR)法测定细胞内整合素αV、整合素β3、粘着斑激酶的mRNA表达量,Westernblot法检测细胞内整合素αV、整合素β3、粘着斑激酶的蛋白表达量。结果与空载体转染细胞(P-pLXSN组)及未转染细胞(PASMCs组)比较,转染JWA核酶基因的细胞(P-JWARZ组)迁移率显著增加,细胞内整合素αV、整合素β3、粘着斑激酶的mRNA及蛋白表达量均显著增加。结论整合素、粘着斑激酶信号通路可能在JWA基因抑制诱导的人肺动脉平滑肌细胞迁移中起调控作用。
- 陆俊羽张珍祥徐永健邹晖倪望陈士新
- 关键词：整合素粘着斑激酶
- 体外转染JWA核酶反转录病毒载体对人肺动脉平滑肌细胞表型及迁移的影响被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨JWA核酶基因转染对肺动脉平滑肌细胞表型及迁移的影响。方法:实验于2004-08/2005-04在华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸病研究室完成。质粒pLXSN为第三军医大学附属新桥医院呼吸研究所惠赠。人肺动脉平滑肌细胞(C-12521)及平滑肌细胞生长培养基2(C-22162)购自德国PromoCell公司。设计合成JWA核酶基因并构建于反转录病毒载体pLXSN上,转染体外培养的人肺动脉平滑肌细胞,经鉴定证实转染成功后,应用半定量反转录聚合酶链反应法测定细胞内JWAmRNA的表达,改良Boyden小室法测定细胞迁移情况,半定量反转录聚合酶链反应法及免疫细胞化学法检测α-SMactin表达量反映细胞表型变化。结果:转染JWA核酶基因的细胞(P-JWARZ)JWAmRNA表达量较空载体转染细胞(P-pLXSN)及未转染细胞(肺动脉平滑肌细胞)显著降低,细胞迁移率显著增加,α-SMactin表达量显著减少(JWAmRNA:0.5812±0.0455,0.7823±0.0292,0.8169±0.0289;细胞迁移:29.6±4.72,7.2±1.44,6.6±1.92;α-SMactinmRNA:0.4418±0.0202,0.4767±0.0209,0.2661±0.0119;α-SMactin蛋白:0.2211±0.0093,0.3251±0.0085,0.3200±0.0095,P<0.01)。结论:JWA核酶基因转染可抑制人肺动脉平滑肌细胞内JWA基因的表达,使细胞分化为合成表型,促进细胞迁移。
- 陆俊羽张珍祥徐永健邹晖倪望陈士新
- 关键词：肺动脉表型
