国家科技重大专项(2009ZX09102-253)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 相关作者：黄静吴自荣金明飞顾娟劳勋更多>>
- 相关机构：华东师范大学中国科学院上海巴斯德研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项上海市科委“登山计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组人GIP衍生物的克隆、表达、纯化及活性研究被引量：2
- 2010年
- 葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽(glucose-dependent insulinotropic polypeptide,GIP)具有促胰岛素分泌的作用,但因体内半衰期短而限制了其应用。对二肽酶4(dipeptidase IV,DPP IV)识别位点等氨基酸进行改造可有效延长其半衰期。通过人工合成基因或PCR定点突变的方法合成GIP不同突变体基因,将其克隆到大肠杆菌表达载体pET32a(+)中进行诱导表达,通过亲和层析,纯化获得各对应的多肽。经肠激酶酶切后,分别在昆明鼠及糖尿病模型鼠体内研究其生物活性。结果显示突变体mGIP243在昆明鼠体内具有显著的降血糖活性,当给药剂量为48nmol/kg时,其体内降血糖活性可延长至90分钟,相对于将第二位上的丙氨酸突变成丝氨酸的mGIP2和天然GIP半衰期显著延长。GIP类似物mGIP243在2型糖尿病模型鼠中也有降血糖活性,使其可能成为治疗糖尿病的候选药物。
- 宋文程金明飞李冬青赵丽芬张洪丹黄静吴自荣
- 关键词：原核表达血糖
- 人胰高血糖素样肽-1突变体融合蛋白在大肠杆菌中的自诱导表达优化被引量：8
- 2010年
- 考察了在大肠杆菌中自诱导表达人胰高血糖素样肽-1突变体融合蛋白的可行性,并对自诱导培养条件及培养基成分进行优化,以提高蛋白产量。实验结果表明,最优培养基成分为蛋白胨19.17g/L,酵母膏9.59g/L,Na2HPO45.72g/L,KH2PO45.48g/L,(NH4)2SO42.66g/L,NaCl3.33g/L,甘油2%(V/V),葡萄糖0.68g/L,乳糖6.33g/L,MgSO40.24g/L。在温度33°C、接种量1%、pH7、装瓶量20mL/100mL培养条件下,用该最优培养基自诱导表达人胰高血糖素样肽-1突变体融合蛋白的产量可达348.6mg/L。
- 顾娟劳勋金明飞黄静吴自荣
- 关键词：正交设计均匀设计
