山东省自然科学基金(ZR2011CQ024)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
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- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶反应条件优化及在大肠杆菌生物发光检测法中的应用
- 2014年
- 利用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)具有荧光性的原理,对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶催化的反应条件进行了优化,目的是提高细菌生物发光法检测大肠杆菌的灵敏度。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶可以专一性地将烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+)转化为NADPH,在激发波长为340 nm、发射波长为460 nm的条件下可以测定反应生成的NADPH荧光强度。本研究确定了实验的最适反应pH为7.5,葡萄糖-6-磷酸的反应浓度为5 mmol/L,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的反应浓度为0.4 U/mL。同时将细菌生物发光法与酶促反应相结合,建立了大肠杆菌与NAD(P)H发光强度之间的关系,为酶促细菌生物发光法应用于大肠杆菌的检测提供基础资料。[中国渔业质量与标准,2014,4(3):12-17]
- 刘慧慧王静雪林洪
- 关键词：NADPH荧光法葡萄糖-6-磷酸脱氢酶大肠杆菌
- 鳆发光杆菌荧光素酶的提取、分离与纯化被引量：2
- 2013年
- 建立了从鳆发光杆菌中提取纯化荧光素酶的方法。鳆发光杆菌25℃培养12h,经过超声破碎、硫酸铵沉淀等步骤后得到粗酶液,再通过DEAE Sepharose CL-6B、DEAE Sephadex A-50进一步纯化,得到电泳纯的荧光素酶,通过SDS-PAGE测得其有两个亚基,分子量分别为36、41ku。经过硫酸铵沉淀以及两步层析后,荧光素酶的纯化倍数达到100倍以上,证明该实验过程具有较好的纯化效果,为荧光素酶性质的研究和商业化应用提供了技术支持。
- 俎聪李明鲁晓东王静雪
- 关键词：荧光素酶纯化
- 一株副溶血弧菌噬菌体VPp1的分离鉴定及裂解性能被引量：8
- 2013年
- 为探究副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的生物防治方法,从水产品市场处污水中分离出一株副溶血弧菌噬菌体VPp1。并借助噬菌斑形态、电镜、酶切等技术对其进行了分类鉴定,同时测定了其裂解谱、最佳感染复数、一步生长曲线以研究其裂解性能。分类鉴定结果表明,其核酸是线型双链DNA,大小在15 kb左右。具有一个正二十面体的头部,头部直径大约为44 nm,无尾,属盖噬菌体科(Tectivirus);裂解性能研究结果表明,其在双层平板上培养12 h可形成中心清亮的噬菌斑,周围有大而明显的晕环。最佳感染复数为0.0001,潜伏期为10 min,裂解量为90.3,是符合条件的潜伏期短裂解量大的理想噬菌体,可用作进一步的应用。
- 彭勇丁云娟林洪王静雪
- 关键词：噬菌体
