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农杆菌介导的棉花子叶瞬时表达系统的建立被引量：4: 2014年; 植物瞬时表达系统在研究功能基因的亚细胞定位、蛋白质互作、启动子活性等方面具有重要作用。选取棉花(Gossypium hirsutum)子叶为材料,以β-葡糖醛酸酶基因(GUS)、增强型绿色荧光蛋白基因(eGFP)为报告基因,对棉花子叶生长时间、农杆菌浓度、注射量、共培养时间等因素进行了分析,建立了农杆菌介导的棉花子叶瞬时表达系统。结果表明,对萌发6天的棉花子叶注射50μLOD600为0.5的含目的基因的农杆菌LBA4404或GV3101,共培养2–3天后,外源基因表达效率最高。利用此方法从棉花萌发到观测结果,仅需8–13天,且操作简单易行,可快速检测棉花来源的启动子活性、亚细胞定位、蛋白质互作等。该方法在棉花基因功能研究方面有很好的应用价值。; 刘雪梅王蕾文添龙何鹏俞嘉宁; 关键词：棉花基因功能研究报告基因

棉花蔗糖合成酶基因家族在纤维发育期时空表达模式分析被引量：4: 2015年; 蔗糖合成酶（Sucrose Synthase）是调控植物糖类代谢的关键酶之一,在植物生长发育及渗透调节过程中起着重要的作用。该酶为多基因家族,各成员在植物不同组织及不同发育阶段发挥不同的作用。陆地棉（Gossypium hirsutum）中有15个Sus成员,本研究利用转录组高通量测序及实时定量PCR技术,检测了该基因家族的表达模式。结果表明,Gh Sus1D、Gh Sus3A、Gh Sus3D和Gh Sus6D在起始期（0~3 DPA）大量表达;GhSus7D在10 DPA的纤维中表达量快速增加,达到同期突变体胚珠的4.7倍;Gh Sus1A、Gh Sus5D在纤维伸长期（5~15 DPA）表达量显著高于胚珠,分别在10 DPA、15 DPA时达到峰值;Gh Sus3A、Gh Sus3D、和Gh Sus6D在纤维发育（15 DPA）时表达量重新上升,且在20 DPA时仍处于较高表达水平。Sus基因家族组织表达模式分析表明,它们在陆地棉品种徐州142野生型和突变体中的组织表达模式基本相同,根、茎、叶、花中没有显著差异。但不同Sus基因具有不同的组织表达特异性。; 黄圣何鹏田莉莉俞嘉宁; 关键词：棉花纤维棉花基因表达模式蔗糖合成酶

快速免疫组织化学检测棉花子叶外源基因表达的方法: 免疫组织化学是鉴定组织或细胞内多肽、蛋白质及其他类型分子表达或存在的常用方法,广泛用于多肽和蛋白在组织内的定位、定性及定量研究。免疫组化中植物组织的制片一般有石蜡切片、冰冻切片和特殊组织的直接制片,其中直接制片方法简单,...; 文添龙刘雪梅俞嘉宁; 关键词：免疫组化绿色荧光蛋白; 文献传递

高等植物胁迫诱导型启动子的研究进展被引量：20: 2014年; 逆境胁迫严重影响植物生长发育,降低作物产量。目前在植物抗逆基因工程中,大多使用组成型启动子驱动目的基因表达,组成型启动子的表达虽然能提高转基因植株的抗逆性,但持续过量地表达转化的外源基因有时会阻碍植物的生长且降低其产量。因此,诱导型启动子的研究具有重要的应用价值。该文对近年来植物在逆境胁迫处理下,一些诱导型启动子的种类和功能,可能具有的顺式作用元件,反式作用因子及其研究方法进行了综述。; 文添龙刘雪梅冀亚萍俞嘉宁; 关键词：启动子诱导型启动子胁迫诱导转基因植物

棉花D-7蛋白及其基因的表达模式分析: 胚胎发育晚期富集蛋白（Late-embryogenesis-abundant-proteins,LEA）是一类在种子成熟期大量积累且一般认为与干旱胁迫有关的蛋白,但其也可对其他非生物胁迫如渗透压、低温等起应答。棉花D-7...; 刘雪梅路莎莎俞嘉宁; 关键词：LEA蛋白非生物胁迫; 文献传递

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国家自然科学基金(31270368)